女性陰道分泌物產ESBLs腸桿菌科細菌監測及耐藥分析

陳雷鳴，陳藝升，石雯茜，應春妹

(復旦大學附屬婦產科醫院檢驗科,上海 200011)

生殖道感染是較常見的婦科疾病，腸桿菌科細菌是主要病原菌[1]。β-內酰胺酶(ESBLs)主要由革蘭陰性桿菌產生，腸桿菌科細菌是主要的產ESBLs菌株。隨著β-內酰胺酶類抗菌藥物的廣泛使用，臨床上產ESBLs菌株暴發流行，且耐藥性呈明顯上升趨勢[2]。為了了解女性生殖道感染產ESBLs腸桿菌科細菌檢出率，并分析其耐藥情況，收集本院從臨床女性陰道分泌物分離出的腸桿菌科細菌進行了ESBLs檢測，同時做了藥敏試驗，分析菌株流行現狀和抗菌藥物的耐藥性，為臨床合理應用抗菌藥物治療提供依據。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2014年1月至2017年12月本院女性陰道分泌物分離腸桿菌科細菌939株。

1.2儀器與試劑 細菌鑒定和藥敏試驗采用法國生物梅里埃公司VITECK 2 Compact全自動細菌鑒定分析儀和藥敏分析系統；美國BD公司血平板和麥康凱平板。

1.3方法 標本按《全國臨床檢驗操作規程》第3版進行接種和培養[3]。

1.4質控菌株 大腸埃希菌ATCC25922為陰性對照，肺炎克雷伯菌ATCC700603為ESBLs陽性對照。

2 結 果

2.1產ESBLs腸桿菌科細菌檢出分布 陰道分泌物中共分離培養出腸桿菌科細菌939株，其中ESBLs腸桿菌科細菌257株，檢出率27%，見圖1。其中包含大腸埃希菌220株，占86%；肺炎克雷伯菌34株，占13%；其他3株，占1%，包括臭鼻克雷伯菌2株，產酸克雷伯菌1株，見表1。

圖1 腸桿菌科細菌和產ESBLs菌株檢出分布表1 產ESBLs腸桿菌科細菌檢出分布(n)

年份n大腸埃希菌肺炎克雷伯菌臭鼻克雷伯菌產酸克雷伯菌2014837012012015524741020165248400201770551410總數2572203421

2.2產ESBLs大腸埃希菌藥敏結果 氨芐西林、頭孢唑啉均為耐藥，厄他培南、亞胺培南和頭孢替坦均為敏感，見表2。

表2 220株產ESBLs大腸埃希菌耐藥率(%)

續表2 220株產ESBLs大腸埃希菌耐藥率(%)

2.3產ESBLs肺炎克雷伯菌藥敏結果 頭孢唑啉為耐藥，亞胺培南為敏感，見表3。

表3 34株產ESBLs肺炎克雷伯菌耐藥率(%)

2.4257株產ESBLs腸桿菌科細菌，耐3～5、6～8和>9種藥物比例分別為18%、44%和25%，見圖2。

圖2 2014-2017年耐3～5、6～8和>9種藥物比例的趨勢(%)

3 討 論

β-內酰胺類抗菌藥物是目前治療感染的重要藥物，療效好，毒性小，主要包括青霉素類、頭孢菌素類、碳青霉烯類等。它們的共同特點是都具有抗菌活性成分——β-內酰胺環[4]，而β-內酰胺酶的產生是細菌對β-內酰胺類抗菌藥物耐藥最常見的機制。近年來，由于臨床β-內酰胺類抗菌藥物廣泛使用，耐藥菌株增加，產超廣譜β-內酰胺酶細菌引發的耐藥情況較為嚴重。產ESBLs菌株主要由腸桿菌科細菌產生，其中以大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌為代表。ESBLs是由質粒介導的絲氨酸蛋白酶，他能部分水解青霉素類、頭孢菌素類和氨曲南，此外，ESBLs質粒經常攜帶其他抗菌藥物耐藥基因，并且可在菌株之間轉移和傳播，引起菌株多重耐藥，給臨床治療帶來一定的困難[5]。

本院2014年至2017年陰道分泌物分離產ESBLs腸桿菌科細菌檢出率為20%～35%，主要為大腸埃希菌，其次為肺炎克雷伯菌，與相關文獻報道一致[6-8]。此外藥敏結果顯示產ESBLs菌株對青霉素、一代頭孢菌素、三代頭孢菌素等有較高的耐藥率；對磺胺類、喹諾酮類、氨基糖苷類也表現出相當的耐藥率；但對亞胺培南、頭孢替坦和加有酶抑制劑的青霉素類等有較高靈敏度，與相關文獻報道一致[9-12]。4年間耐3～5種藥物的比例有所上升，耐6～8種藥物的比例上升速度很快，而耐大于9種以上藥物的比例則有所下降，總體反映出同時耐多種藥物的趨勢不斷升高。其中對氨芐西林、頭孢唑啉和頭孢曲松3種藥物4年的耐藥率都維持在很高的水平。對厄他培南、亞胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢替坦、頭孢吡肟耐藥率都維持在較低水平，可以作為治療的首選藥物。

正常情況下，由于陰道的“自凈”功能以及人體正常的免疫力，不會導致女性生殖道感染[13]。但是由于不合理地使用廣譜抗菌藥物，再加上個人衛生意識薄弱，接觸到被污染的生活用水、衛生用品以及不潔的性生活[14]，陰道內正常菌群將受到抑制。而產ESBLs腸桿菌科細菌由于對多種抗菌藥物耐藥，表現出生存競爭優勢，大量繁殖。對于育齡女性，生殖道感染帶來的危害是極大的，經常導致不孕不育、異位妊娠、流產。如果上行感染絨毛膜或胎兒在通過產道時獲得感染，可導致新生兒出現敗血癥或腦膜炎[15]。

4 結 論

本次研究發現女性陰道分泌物產ESBLs腸桿菌科細菌攜帶率較高，對亞胺培南和頭孢替坦全部敏感，其次厄他培南和哌拉西林/他唑巴坦也具有較高的抗菌活性，可作為初始治療的經驗用藥。綜上所述，產超廣譜β-內酰胺酶的腸桿菌科細菌檢測和藥敏監測，可以指導臨床女性生殖道感染時抗菌藥物合理使用，有效控制耐藥菌株蔓延，對流行病學研究也具有十分重要的意義。