蔡文博 段 虹 王 軍 朱元娣
(1中國農業大學園藝學院,北京 100193;2中國農業大學食品科學與營養學院,北京 100083)
中國是世界葡萄(Vitis vinifera L.)生產大國,自2011年起鮮食葡萄產量已位居世界首位,2014年起葡萄栽培面積躍居世界第2 位[1],截至2015年底,栽培面積達79.9 萬hm2,產量達1 366.9 萬t。 我國葡萄生產以鮮食葡萄為主,占80%左右,葡萄苗木標準化生產是產業發展的基礎[2-3]。 葡萄可以通過扦插或嫁接等方法進行無性繁殖,但周期長且易積累病害。 植物組織培養技術能夠不受季節的限制,快速繁殖優質的葡萄苗木,同時降低成本[4-6]。 因此,建立有效的鮮食葡萄品種組培快繁體系,不僅可以滿足優質苗木的商業化生產需求,還能為優質葡萄市場提供技術參考。
常規的組培快繁體系包括無菌外植體的建立、啟動培養、繼代培養和馴化移栽四個環節[7]。 外植體的選擇是葡萄組培快繁的第一步。 選取長新梢(10 cm)作為外植體,有利于誘導不定芽的發生[8-9]。 培養基成分與配比能夠影響外植體的啟動培養和繁殖體的增殖效率[10]。 研究表明,添加2 mg·L-16-芐氨基腺嘌呤(6-benzylamino purine,6-BA)和0.2 mg·L-1萘乙酸(1-naphthlcetic acid, NAA)的MS 培養基作為巨峰的初代培養基,2.0 ~5.0 cm 新梢為外植體,萌芽率達到71.1%[11];MS 培養基添加0.2 mg·L-13-吲哚丁酸(3-indolebutyric acid, IBA)、1.0 mg·L-16-BA 和0.5 mg·L-16-糠氨基嘌呤(kinetin, KT)啟動培養釀酒葡萄莖段外植體,萌芽率達73%以上,側芽萌發生長狀況良好[12]。 繼代過程中,繁殖體在不同培養基上的生長情況不同,1/2 MS 培養基有利于Dixie 和Fry 葡萄莖段的增殖增長[8-9,13];木本植物培養基(woody plant medium,WPM)促使葡萄砧木3309 和SO4 生長良好,生根率近100%[14],但圓葉葡萄品種如Carlos 和Fry在WPM 培養基上長勢較差,表現出嚴重的玻璃化現象[15-16]。……