褐色雙孢蘑菇原生質體制備、再生條件的研究

王金斌 李 文 蔣 瑋 白 藍 劉 華李正鵬 吳文惠 唐雪明,,?

(1上海市農業科學院/上海市農業遺傳育種重點實驗室,上海 201106;2上海海洋大學食品學院,上海 201306)

褐色雙孢蘑菇(Agaricus bisporus Protobello)的菇蓋為棕褐色,菌肉和菇柄呈白色,是商業化菌株白色雙孢蘑菇的一個變種,國內俗稱牛排菇,棕秀一號是國內選育認定的商業化栽培的褐色蘑菇菌株,其味道鮮美,貨架期長,適溫廣,且低溫結實能力強,抗逆,不易褐變[1]。雙孢蘑菇(Agaricus bisporus)栽培起源于法國,至今已有460 多年的歷史,雙孢蘑菇菌種的提純、制備與改良也有100 多年歷史[2]。 雙孢蘑菇的育種方法和技術主要包括自然選種、純種培養、組織分離保種、多孢分離育種[3]、單孢分離育種[4-5]和雜交育種[6-7]等。 但雙孢蘑菇遺傳背景復雜,缺少優良性狀和穩定遺傳的生物學標記,且擔子上的兩個孢子大多是自身可育的異核,其與不能結實的同核體間沒有鎖狀聯合的形態差異,限制了雙孢蘑菇的常規雜交育種工作,導致雙孢蘑菇改良菌株的進程緩慢[8-11]。 目前,世界各國使用的雙孢蘑菇商業菌種來源于國外雜交品種U 系列或國內AS2796 系列的后代,如A15、W192 等工廠化栽培菌株[2]。

隨著雙孢蘑菇選育種技術發展到基因工程水平。Morin 等[12]2012年完成了雙孢菇A. bisporus var.bisporusH97 ( 雙 孢 變 種) 和 A. bisporus var.burnettiiJB137-S8(四孢變種)2 個變種的全基因組序列測定,并構建了全基因組框架圖,為雙孢蘑菇的分子遺傳學研究和功能基因組研究打開了大門。 建立良好穩定的原生質體制備技術是雙孢蘑菇的分子遺傳學操作的關鍵步驟之一[13]。……