氨氮對青海湖裸鯉水花魚苗的急性毒性試驗

羅穎 ，閆麗婷 ，吳洪芳 ，汪鵬程 ，李瑾 ，田文根

（1.青海湖裸鯉救護中心，青海 西寧 810016；2.青海湖裸鯉繁育與保護重點實驗室，青海 西寧 810016）

青海湖裸鯉俗稱“湟魚”，屬鯉形目，鯉科，裂腹魚亞科。是青海湖中唯一的水生經濟動物。具有耐寒冷、耐鹽堿的特性。養殖水體中氨氮通常是制約魚類正常生長的重要因子之一。在養殖過程中，尤其是高密度養殖模式下，當含量達到一定值時能夠影響魚類的行為、代謝、免疫等，對養殖個體產生毒害作用，誘發多種疾病，甚至導致大量死亡，造成巨大損失。該試驗研究氨氮對青海湖裸鯉水花魚苗的毒性，對水體中氨氮對青海湖裸鯉的安全濃度和半致死濃度進行確定，為健康養殖青海湖裸鯉提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 材料

該次試驗采用的試驗魚為青海湖裸鯉“水花”魚苗，來自青海湖裸鯉救護中心，全長為0.9～1.7 cm，試驗中所用的魚體表沒有任何損傷，總生命特征正常。試驗過程中水溫保持在16.5～17.0℃。

試驗藥品：分析純氯化銨、分析純氫氧化鈉。試驗用水：經過曝氣48 h的自來水，水溫16.5～17.0℃，pH值7.9。

使用容積為45 L的玻璃魚缸作為毒性試驗容器，每個容器裝20 L試驗液。

1.2 試驗方法

遵照96 h靜水式急性試驗規范進行，用干燥的氯化銨及氫氧化鈉分析純配置不同氨氮濃度。氨氮濃度分別為 0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、0.50 mg/L,根據青海湖裸鯉魚苗養殖過程中池塘水中的實際pH值，設置pH值為8.5且氨氮濃度梯度相同的試驗組，并設置對照組。

測定水中pH值和溫度，將試驗用的青海湖裸鯉“水花”魚苗隨機在每個箱中放入20尾。持續觀察96 h，及時打撈死亡個體。試驗中在24、48、72、96 h分別記錄試驗箱中試驗魚的中毒癥狀及病死率。

1.3 數據處理

試驗數據處理采用SPSS 19軟件分析引入概率單位歸回算法，安全質量濃度（SC）采用下列公式求得：

SC＝0.1×96hLC50。

2 結果

2.1 氨氮對青海湖裸鯉水花魚苗的急性中毒試驗

試驗開始時，低氨氮試驗組青海湖裸鯉水花魚苗活動正常與對照組相同，但高濃度對照組的青海湖裸鯉水花魚苗游動劇烈，隨著試驗時間延長6 h后，出現游動遲緩、時上浮時下沉、身體側臥和痙攣的癥狀，最終沉底死亡。

在pH值為7.9條件下氨氮為0.25、0.30 mg/L試驗組以及在pH值為8.5條件氨氮濃度0.25 mg/L試驗組，試驗魚始終與對照組試驗魚活動情況相同。

氨氮對青海湖裸鯉水花魚苗的急毒性試驗結果見表1及表2。從表中可以看出，除對照組及前兩組以外都出現了不同情況的死亡。隨著氨氮濃度的增加，青海湖裸鯉水花魚苗的病死率增加。在相同氨氮濃度下，中毒時間越長病死率越高，pH值的上升病死率也隨之升高。

2.2 青海湖裸鯉“水花”魚苗的半致死濃度和安全濃度

根據表1和表2，對氨氮濃度和青海湖裸鯉水花魚苗的病死率進行回歸分析計算出氨氮對青海湖裸鯉水花魚苗的半致死濃度（LC50）和安全濃度（SC）如表3所示。

表1 pH值為7.9條件下氨氮對青海湖裸鯉水花魚苗的急性毒性試驗結果%

表2 pH值為8.5條件下氨氮對青海湖裸鯉水花魚苗的急性毒性試驗結果 %

表3 氨氮對青海湖裸鯉水花魚苗的半致死濃度和安全濃度

3 分析與討論

養殖水體當中氨氮含量主要來源于飼料剩餌、水體缺氧時硝化細菌對含氮有機物的還原、魚類等生物糞便的沉積。水花魚苗下塘前水中氨氮于前期肥水以及連續陰雨天水中缺氧產生。

試驗中在pH值為7.9條件下氨氮濃度低于0.3 mg/L，青海湖裸鯉“水花”魚苗未出現不適及死亡情況。在濃度為0.35 mg/L試驗組，在試驗48～72 h試驗魚陸續出現出現游動遲緩的癥狀。pH值為8.5條件氨氮濃度低于0.25 mg/L，青海湖裸鯉“水花”魚苗未出現不適及死亡情況。在濃度為0.30 mg/L試驗組，在試驗72 h后有5%試驗魚出現游動遲緩的癥狀在濃度為0.35 mg/L試驗組，在濃度為0.35 mg/L試驗組，試驗進行12 h后小部分試驗魚開始出現游動緩慢癥狀。

水體中氨氮的含量往往會隨著水溫和酸堿程度的變化而相應改變，在該次試驗中，相同氨氮濃度條件下，試驗魚在pH值8.5環境中出現氨氮中毒癥狀要早于pH值7.9。pH值8.5條件下試驗組的半致死濃度也高于pH值7.9條件下試驗組。pH值的升高會使氨氮毒性增強。

在青藏高原地區地表水pH值普遍偏高，故在青海湖裸鯉魚苗下塘前期根據池水pH值合理施肥，如遇連續陰雨需注意水質調控。根據該試驗結果以期為養殖戶提供有益的參考。