豬尿中沙丁胺醇殘留的檢測方法介紹

王鏨彧 于世明 李 蕊 江 淼 金慧然 陶 婭

黑龍江省農產品和獸藥飼料技術鑒定站，哈爾濱 150001

沙丁胺醇于1975年首次在我國上市，其能快速地松弛氣道平滑肌，對因上呼吸道疾病引起的支氣管痙攣有良好的治療效果。當沙丁胺醇作為豬的促生長劑長期添加使用后，豬宰殺后組織中可能有濃度較高的沙丁胺醇殘留，人食用后就會出現頭暈、頭痛、肌肉顫動、惡心、嘔吐等中毒癥狀，對心臟病患者和高血壓患者，甚至會危及生命。筆者就豬尿中沙丁胺醇殘留的各種檢測方法作一總結，以期為食品藥品安全部門檢測沙丁胺醇提供科學參考。

1 高效液相色譜法

高效液相色譜法是在經典液相柱色譜基礎上，采用高壓泵、高效填料和高靈敏度檢測器，實現了分析速度快，分離效率高和操作自動化。檢測樣品通過提取和凈化后，再使用高效液相色儀進行檢測。金雁等[1]報道過高效液相色譜法測定豬肉中沙丁胺醇殘留量的研究，豬肉樣品中加入EDTA-2Na、磷酸溶液和高氯酸進行提取，提取后的樣品再通過C18固相萃取柱進行純化，純化后的樣品經高效液相色儀檢測。檢測結果顯示，沙丁胺醇的最佳檢測波長是196 nm，在0.04～10.0 μg/mL范圍內線性關系良好，最低檢出限為1 μg/mL，其中1、10、50 μg/mL 的平均回收率分別為 71.5%、82.1%、88.1%，3個回收質量濃度的相對標準偏差均小于10%，這說明該高效液相色譜法對豬肉中沙丁胺醇殘留量的測定具有良好的靈敏度和精密度。

2 液相色譜-串聯質譜法

質譜分析法是通過對被測樣品離子的質荷比的測定來進行分析的一種分析方法，液相色譜串聯質譜儀主要由高效液相色譜、接口裝置（電離源）、質譜儀組成，高效液相色譜與一般的液相色譜相同，其作用是將混合物樣品分離后進入質譜儀。朱英才等[2]報道過使用超高效液相色譜-串聯質譜法檢測豬尿中沙丁胺醇的殘留，豬尿樣品先用氫氧化鈉溶液和叔丁醇-叔丁基甲醚 (50∶50)溶液進行提取，再用MCX小柱進行凈化，凈化后的樣品過0.22 μm濾膜后供液相色譜-串聯質譜儀分析。檢測結果表明，沙丁胺醇使用MCX小柱凈化后的回收率為93.8%，在1～50 μg/L范圍內線性關系良好，最低檢出限為0.08 μg/L，最低定量限為0.27 μg/L，其中2、10、50 μg/L的平均回收率分別為89.1%、93.8%、96.6%，3個回收質量濃度的相對標準偏差均小于10%，這表明建立的檢測方法適用于豬尿中沙丁胺醇的檢測。

谷旭等[3]使用超高壓液相色譜-飛行時間質譜法對沙丁胺醇在豬尿液和其代謝產物進行測定，豬尿樣品通過乙腈處理，37℃氮氣吹干乙睛復溶，過0.22 μm濾膜后供試。試驗結果顯示，沙丁胺醇的保留時間為1.8 min，在正離子模式下，沙丁胺醇的特征離子的質荷比為240，沙丁胺醇生成較少的脫水碎片離子的質荷比為222。沙丁胺醇給藥后0～6 h尿液樣本中鑒定出的代謝產物最多，共鑒定出可能的代謝物5個，其中2種代謝產物尚未見報道。

3 酶聯免疫吸附法

目前可以使用間接競爭性酶聯免疫法和直接競爭性酶聯免疫法來測定豬尿中沙丁胺醇殘留，本檢測方法操作簡便，分析時間相對較短，且檢出限也在不斷降低。鄭宏偉等[4]報道過酶聯免疫試劑盒對豬尿中沙丁胺醇的含量測定效果和方法。豬尿經過孵育和洗板處理后，通過酶標儀測定并使用RIDAWIN軟件計算供試樣品中沙丁胺醇的含量。試驗結果表明，豬尿中1、2、4和8 ng/mL 4個不同質量濃度的沙丁胺醇的添加回收率分別為86.0%、90.5%、94.5%、93.2%，相對平均偏差為3.9%～11.6%，這表明本方法適合豬尿中沙丁胺醇的含量檢測。李建鯤等[5]報道過一種豬尿中的沙丁胺醇ELISA試劑盒檢測技術，使用間接競爭ELSA法檢測豬尿樣樣品中的沙丁胺醇的含量，測定結果顯示，該測定方法可定量測定豬尿中沙丁胺醇含量的范圍為0.1～3.0 ng/mL，且516批豬尿樣品測試結果顯示，建立的測定方法的靈敏度良好，特別適用于沙丁胺醇低水平殘留的檢測。

4 膠體金免疫法

膠體金免疫法是以膠體金作為示蹤標志物應用于抗原抗體的一種快速定量檢測方法。現在膠體金免疫層析試紙條標記探針的檢測靈敏度在不斷提高，對檢測物的檢出率也在不斷提升。吳雨豪等[6]報道過使用多枝狀膠體金免疫層析試紙條定量檢測豬尿中沙丁胺醇，多枝狀的膠體金有比傳統球形膠體金更高的摩爾消光系數，試驗使用65 nm多枝狀膠體金，將抗沙丁胺醇單克隆抗體標記在AuNFs上制備檢測探針，通過建立了基于T（試紙條檢測線）/C（質控線）比值法來定量檢測豬尿中沙丁胺醇的含量。試驗結果顯示，豬尿中沙丁胺醇的定量線性范圍為0.05～1.0 ng/mL，最低檢出限為0.027 ng/mL，豬尿中0.05、0.15、0.5 ng/mL 3個不同質量濃度的沙丁胺醇的添加回收率分別為 107.74%、101.53%、110.68%，相對平均偏差為1.5%～9.1%，這表明本方法適合豬尿中沙丁胺醇的現場快速篩查檢測。

5 結語

隨著檢測分析技術的不斷發展，豬尿中沙丁胺醇的檢測方法的靈敏度和精確度也在不斷提高。相信將來沙丁胺醇的檢測技術會變得更加精確、操作更便捷，各種檢測方法都朝著實用方向進發，為消費者的食品安全保駕護航。