原料乳及乳制品中三聚氰胺檢測方法研究

劉桂伶

摘要：全面分析和比較了目前原料乳及乳制品中三聚氰胺的檢測方法，主要包括色譜檢測法（高效液相色譜法、氣相質譜法、液相色譜-串聯質譜法）、光譜檢測法（拉曼光譜法、近紅外光譜法、熒光光譜法）以及免疫檢測方法。

關鍵詞：原料乳及乳制品;三聚氰胺;檢測方法

中圖分類號：O657;TS252.51? ? ? ? 文獻標識碼：B? ? ? ? 文章編號：1007-273X（2019）01-0013-02

三聚氰胺（Melamine）是一種重要的工業材料，大量應用于塑料、紡織、涂料和建筑等行業。作為一種含氮量高的物質，也被非法添加到原料乳及乳制品中，以達到增加蛋白質測試含量的目的[1]。距2008年“三聚氰胺毒奶粉”事件發生已有10年，但我國乳品業仍面臨食品質量安全、成本上漲、消費者不信任等諸多不利因素，行業的發展仍面臨諸多困難，因此，對原料乳及乳制品中三聚氰胺的檢測方法研究尤為重要。

1? 三聚氰胺理化性質及限量值

三聚氰胺（Melamine）簡稱三胺，是無色單斜棱結晶，無氣味，低毒，可溶于吡啶、甲醇、甘油、乙酸、熱乙二醇、甲醛等，微溶于熱乙醇，不溶于苯、醚和四氯化碳。三聚氰胺作為一種重要的化工原料，主要用于生產塑料、膠水和阻燃劑[2]。

我國規定嬰兒配方奶粉中三聚氰胺的含量上限為1.0 mg/L，其他食品中為2.5 mg/L，如果三聚氰胺含量超標，可能會導致人類腎功能衰竭甚至死亡。

2? 三聚氰胺檢測方法分析

2.1? 色譜檢測技術

2.1.1? 高效液相色譜法? 高效液相色譜法（HPLC）測定范圍廣、樣品組分分離效率高、分析速度快、可實現自動化， 是目前測定三聚氰胺最常用的方法之一[3]?！对先榕c乳制品中三聚氰胺檢測方法》（GB/T22388-2008）是目前應用最廣泛的方法之一[4]，為了提高檢測效率，有人通過提高三氯乙酸溶液濃度對該方法的前處理條件進行了優化，檢測時間可縮短4 h[5]。孫治安等[6]成功將印跡聚合物層包覆在Fe3O4 @SiO2磁性材料表面并應用于牛奶中三聚氰胺的富集分離，采用HPLC檢測，建立了一種簡單、快速和高選擇性測定牛奶中三聚氰胺的方法。

2.1.2 氣相色譜質譜法? 氣相色譜-質譜法（GC-MS）用于三聚氰胺的檢測具有高靈敏度、重現性好等優點，但由于三聚氰胺相對分子質量較小， 揮發性差， 需先將三聚氰胺進行衍生處理改善其揮發性，但衍生化易造成樣品損失。有研究者參考《原料乳與乳制品中三聚氰胺檢測方法》，樣品凈化后進行硅烷衍生，用氣相色譜質譜聯用儀檢測，有效去除了基質所帶來的干擾[7]。曹艷平等[8]采用反吹技術結合三重串聯四極桿氣相色譜質譜對三聚氰胺進行分析，無需固相萃取柱凈化、氮氣吹干和硅烷化衍生， 使樣品處理得以簡化。

2.1.3? 液相色譜-串聯質譜法? 用三氯乙酸-乙腈溶液提取目標分析物，通過強陽離子固相萃取柱凈化，外標法定量，用高效液相色譜-串聯質譜儀對三聚氰胺殘留含量進行檢測，方法檢測低限為20 μg/kg[9]。該方法同GC-MS和HPLC法相比， 簡化了樣品的處理步驟，有利于廣泛使用。初曉娜等[10]采用電噴霧正離子模式多反應監測，內標法定量對生鮮乳中三聚氰胺進行高效液相色譜-串聯質譜法測定，方法檢出限（3S/N）為0.5 μg/kg。

2.2? 光譜檢測技術

2.2.1? 拉曼光譜法? 表面增強拉曼散射（SERS）技術可以極大地增強吸附在某些金屬（如金、銀、銅等）表面物質的拉曼散射信號，并能提供吸附分子豐富的結構信息[11]。研究人員搭建了一套線掃描式拉曼高光譜檢測系統，對奶粉和三聚氰胺顆粒混合樣本進行了檢測研究，感興趣區域內所有像素點的拉曼強度平均值與三聚氰胺濃度之間線性度較高[12]。奶粉樣品經15%三氯乙酸溶液提取，中性氧化鋁除雜后進行拉曼光譜檢測，該方法比常規表面增強拉曼光譜法樣品前處理簡單，相比色譜等檢測方法耗時短，在奶粉質控方面應用前景佳[13]。

2.2.2? 近紅外光譜法? 近紅外（Near infrared，NIR）光譜技術是—種快速便捷不破壞原始樣本的新型分析技術，被譽為“綠色分析技術”[14]。劉海學等[15]發展了一種基于近紅外自相關譜定性定量分析摻三聚氰胺奶粉的檢測方法，以奶粉中摻入的三聚氰胺濃度為外擾進行相關計算，選擇隨濃度變化敏感區為建模區間，所建立的方法對未知樣品的識別正確率為100%。

2.2.3? 熒光分析技術? 采用水熱法，以膽酸鈉為穩定劑與還原劑合成金納米（AuNCs）。三聚氰胺與AuNCs作用后使其熒光增強，由此建立了一種測定三聚氰胺的熒光分析新方法，該方法具有操作簡單和靈敏度高等特點，可用于市售牛奶中痕量三聚氰胺的測定[16]。趙弟萍等[17]還建立了一種基于熒光量子點的側向層析試紙檢測新方法，熒光試紙條對三聚氰胺檢測的肉眼檢測限能達到10 ng/mL，檢測時間為10 min，適合于三聚氰胺現場快速檢測。

2.3? 免疫檢測技術

膠體金免疫層析法以抗原抗體特異性結合為基礎、大孔徑微孔濾膜為載體、膠體金為固相標記物來定性檢測樣品中的待測物質[18]。程國棟等[19]建立了快速檢測乳制品中三聚氰胺的膠體金免疫層析試紙條分析法。采用活化酯法制備三聚氰胺酶標抗原，將三聚氰胺抗體、HRP抗體分別與溴化氰活化的瓊脂糖凝膠偶聯制備相應的抗體膠作為檢測層和質控層，建立用于檢測乳制品中三聚氰胺的免疫親和凝膠柱方法，該檢測方法操作簡便，整個檢測過程約15 min，可用作三聚氰胺現場快速檢測的有效手段[20]。

3? 結論

原料乳及乳制品是我們生活中極其重要的食物來源，但是受到三聚氰胺的污染對人身安全及健康構成嚴重威脅，因此迫切需要研究和開發高靈敏度、快捷、低成本的檢測技術對乳及乳制品中三聚氰胺進行實時快速的檢測。然而，現有的檢測方法僅能滿足實驗室條件下對三聚氰胺的檢測，如何使分析方法簡潔化、實用化，滿足日常生活的應用和需求，是三聚氰胺檢測技術開發的重要發展方向。總之，原料乳及乳制品中三聚氰胺的檢測方法仍需要不斷完善和深入。

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