原料乳及乳制品中三聚氰胺檢測(cè)方法研究

劉桂伶

摘要：全面分析和比較了目前原料乳及乳制品中三聚氰胺的檢測(cè)方法，主要包括色譜檢測(cè)法（高效液相色譜法、氣相質(zhì)譜法、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法）、光譜檢測(cè)法（拉曼光譜法、近紅外光譜法、熒光光譜法）以及免疫檢測(cè)方法。

關(guān)鍵詞：原料乳及乳制品;三聚氰胺;檢測(cè)方法

中圖分類(lèi)號(hào)：O657;TS252.51? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B? ? ? ? 文章編號(hào)：1007-273X（2019）01-0013-02

三聚氰胺（Melamine）是一種重要的工業(yè)材料，大量應(yīng)用于塑料、紡織、涂料和建筑等行業(yè)。作為一種含氮量高的物質(zhì)，也被非法添加到原料乳及乳制品中，以達(dá)到增加蛋白質(zhì)測(cè)試含量的目的[1]。距2008年“三聚氰胺毒奶粉”事件發(fā)生已有10年，但我國(guó)乳品業(yè)仍面臨食品質(zhì)量安全、成本上漲、消費(fèi)者不信任等諸多不利因素，行業(yè)的發(fā)展仍面臨諸多困難，因此，對(duì)原料乳及乳制品中三聚氰胺的檢測(cè)方法研究尤為重要。

1? 三聚氰胺理化性質(zhì)及限量值

三聚氰胺（Melamine）簡(jiǎn)稱(chēng)三胺，是無(wú)色單斜棱結(jié)晶，無(wú)氣味，低毒，可溶于吡啶、甲醇、甘油、乙酸、熱乙二醇、甲醛等，微溶于熱乙醇，不溶于苯、醚和四氯化碳。三聚氰胺作為一種重要的化工原料，主要用于生產(chǎn)塑料、膠水和阻燃劑[2]。

我國(guó)規(guī)定嬰兒配方奶粉中三聚氰胺的含量上限為1.0 mg/L，其他食品中為2.5 mg/L，如果三聚氰胺含量超標(biāo)，可能會(huì)導(dǎo)致人類(lèi)腎功能衰竭甚至死亡。

2? 三聚氰胺檢測(cè)方法分析

2.1? 色譜檢測(cè)技術(shù)

2.1.1? 高效液相色譜法? 高效液相色譜法（HPLC）測(cè)定范圍廣、樣品組分分離效率高、分析速度快、可實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化， 是目前測(cè)定三聚氰胺最常用的方法之一[3]。《原料乳與乳制品中三聚氰胺檢測(cè)方法》（GB/T22388-2008）是目前應(yīng)用最廣泛的方法之一[4]，為了提高檢測(cè)效率，有人通過(guò)提高三氯乙酸溶液濃度對(duì)該方法的前處理?xiàng)l件進(jìn)行了優(yōu)化，檢測(cè)時(shí)間可縮短4 h[5]。孫治安等[6]成功將印跡聚合物層包覆在Fe3O4 @SiO2磁性材料表面并應(yīng)用于牛奶中三聚氰胺的富集分離，采用HPLC檢測(cè)，建立了一種簡(jiǎn)單、快速和高選擇性測(cè)定牛奶中三聚氰胺的方法。

2.1.2 氣相色譜質(zhì)譜法? 氣相色譜-質(zhì)譜法（GC-MS）用于三聚氰胺的檢測(cè)具有高靈敏度、重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)，但由于三聚氰胺相對(duì)分子質(zhì)量較小， 揮發(fā)性差， 需先將三聚氰胺進(jìn)行衍生處理改善其揮發(fā)性，但衍生化易造成樣品損失。有研究者參考《原料乳與乳制品中三聚氰胺檢測(cè)方法》，樣品凈化后進(jìn)行硅烷衍生，用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀檢測(cè)，有效去除了基質(zhì)所帶來(lái)的干擾[7]。曹艷平等[8]采用反吹技術(shù)結(jié)合三重串聯(lián)四極桿氣相色譜質(zhì)譜對(duì)三聚氰胺進(jìn)行分析，無(wú)需固相萃取柱凈化、氮?dú)獯蹈珊凸柰榛苌?使樣品處理得以簡(jiǎn)化。

2.1.3? 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法? 用三氯乙酸-乙腈溶液提取目標(biāo)分析物，通過(guò)強(qiáng)陽(yáng)離子固相萃取柱凈化，外標(biāo)法定量，用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀對(duì)三聚氰胺殘留含量進(jìn)行檢測(cè)，方法檢測(cè)低限為20 μg/kg[9]。該方法同GC-MS和HPLC法相比， 簡(jiǎn)化了樣品的處理步驟，有利于廣泛使用。初曉娜等[10]采用電噴霧正離子模式多反應(yīng)監(jiān)測(cè)，內(nèi)標(biāo)法定量對(duì)生鮮乳中三聚氰胺進(jìn)行高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定，方法檢出限（3S/N）為0.5 μg/kg。

2.2? 光譜檢測(cè)技術(shù)

2.2.1? 拉曼光譜法? 表面增強(qiáng)拉曼散射（SERS）技術(shù)可以極大地增強(qiáng)吸附在某些金屬（如金、銀、銅等）表面物質(zhì)的拉曼散射信號(hào)，并能提供吸附分子豐富的結(jié)構(gòu)信息[11]。研究人員搭建了一套線掃描式拉曼高光譜檢測(cè)系統(tǒng)，對(duì)奶粉和三聚氰胺顆粒混合樣本進(jìn)行了檢測(cè)研究，感興趣區(qū)域內(nèi)所有像素點(diǎn)的拉曼強(qiáng)度平均值與三聚氰胺濃度之間線性度較高[12]。奶粉樣品經(jīng)15%三氯乙酸溶液提取，中性氧化鋁除雜后進(jìn)行拉曼光譜檢測(cè)，該方法比常規(guī)表面增強(qiáng)拉曼光譜法樣品前處理簡(jiǎn)單，相比色譜等檢測(cè)方法耗時(shí)短，在奶粉質(zhì)控方面應(yīng)用前景佳[13]。

2.2.2? 近紅外光譜法? 近紅外（Near infrared，NIR）光譜技術(shù)是—種快速便捷不破壞原始樣本的新型分析技術(shù)，被譽(yù)為“綠色分析技術(shù)”[14]。劉海學(xué)等[15]發(fā)展了一種基于近紅外自相關(guān)譜定性定量分析摻三聚氰胺奶粉的檢測(cè)方法，以奶粉中摻入的三聚氰胺濃度為外擾進(jìn)行相關(guān)計(jì)算，選擇隨濃度變化敏感區(qū)為建模區(qū)間，所建立的方法對(duì)未知樣品的識(shí)別正確率為100%。

2.2.3? 熒光分析技術(shù)? 采用水熱法，以膽酸鈉為穩(wěn)定劑與還原劑合成金納米（AuNCs）。三聚氰胺與AuNCs作用后使其熒光增強(qiáng)，由此建立了一種測(cè)定三聚氰胺的熒光分析新方法，該方法具有操作簡(jiǎn)單和靈敏度高等特點(diǎn)，可用于市售牛奶中痕量三聚氰胺的測(cè)定[16]。趙弟萍等[17]還建立了一種基于熒光量子點(diǎn)的側(cè)向?qū)游鲈嚰垯z測(cè)新方法，熒光試紙條對(duì)三聚氰胺檢測(cè)的肉眼檢測(cè)限能達(dá)到10 ng/mL，檢測(cè)時(shí)間為10 min，適合于三聚氰胺現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)。

2.3? 免疫檢測(cè)技術(shù)

膠體金免疫層析法以抗原抗體特異性結(jié)合為基礎(chǔ)、大孔徑微孔濾膜為載體、膠體金為固相標(biāo)記物來(lái)定性檢測(cè)樣品中的待測(cè)物質(zhì)[18]。程國(guó)棟等[19]建立了快速檢測(cè)乳制品中三聚氰胺的膠體金免疫層析試紙條分析法。采用活化酯法制備三聚氰胺酶標(biāo)抗原，將三聚氰胺抗體、HRP抗體分別與溴化氰活化的瓊脂糖凝膠偶聯(lián)制備相應(yīng)的抗體膠作為檢測(cè)層和質(zhì)控層，建立用于檢測(cè)乳制品中三聚氰胺的免疫親和凝膠柱方法，該檢測(cè)方法操作簡(jiǎn)便，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程約15 min，可用作三聚氰胺現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)的有效手段[20]。

3? 結(jié)論

原料乳及乳制品是我們生活中極其重要的食物來(lái)源，但是受到三聚氰胺的污染對(duì)人身安全及健康構(gòu)成嚴(yán)重威脅，因此迫切需要研究和開(kāi)發(fā)高靈敏度、快捷、低成本的檢測(cè)技術(shù)對(duì)乳及乳制品中三聚氰胺進(jìn)行實(shí)時(shí)快速的檢測(cè)。然而，現(xiàn)有的檢測(cè)方法僅能滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)室條件下對(duì)三聚氰胺的檢測(cè)，如何使分析方法簡(jiǎn)潔化、實(shí)用化，滿(mǎn)足日常生活的應(yīng)用和需求，是三聚氰胺檢測(cè)技術(shù)開(kāi)發(fā)的重要發(fā)展方向。總之，原料乳及乳制品中三聚氰胺的檢測(cè)方法仍需要不斷完善和深入。

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