DC-CIK細胞生物療法聯合化療治療中晚期非小細胞肺癌的近期臨床效果研究

張霞

隨著人類生存環境污染的加劇，肺癌已成為我國發病率和病死率最高的惡性腫瘤，且呈逐年升高趨勢，因肺癌致死的人數占癌癥死亡總人數的22%[1]。非小細胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)是肺癌中最常見的類型(約占80%)，發病隱匿，多數患者發現時腫瘤已進展至中晚期[2]，而中晚期NSCLC的治療以放化療為主[3]。因放化療不良反應較多，部分伴發基礎疾病的患者耐受性較差，預后不佳。隨著轉化醫學與精準診療的發展，生物療法逐漸應用于臨床，在取得顯著抗腫瘤效果的同時，減輕了不良反應。有研究顯示，采用樹突狀細胞誘發殺傷細胞(Dendritic cell Cytokine induced killer cell, DC-CIK) 的生物療法治療NSCLC效果顯著[4]。為此，本研究試探討化療聯合DC-CIK細胞生物療法治療中晚期NSCLC的臨床效果。現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014年1月—2015年6月我院收治的中晚期NSCLC患者86例。納入標準：年齡18～80歲；不耐受或拒絕手術者；綜合身體狀況卡氏功能評分≥60分；臨床資料完整，可配合隨訪。排除標準：嚴重肝腎功能不全者；妊娠或哺乳期女性；合并其他重要臟器功能不全或惡性腫瘤者；器官移植，服用免疫抑制劑者；生物制劑過敏者；胸腔大量積液，出現廣泛轉移者。86例患者依據治療方案的不同分為對照組和觀察組各43例。對照組：男23例、女20例；年齡42～74歲，平均(56.58±8.21)歲；臨床分期，ⅢA期13例、ⅢB期16例、Ⅳ期14例；病理類型，腺癌20例、鱗癌14例、大細胞癌5例、其他4例。觀察組：男24例、女19例；年齡45～78歲，平均(57.74±7.86)歲；臨床分期，ⅢA期15例、ⅢB期14例、Ⅳ期14例；病理類型，腺癌18例，鱗癌15例，大細胞癌、其他各5例。兩組年齡、性別、臨床分期、病理類型差異無統計學意義(t值為0.584，χ2值分別為0.047、0.276、0.192，P值均＞0.05)，具有可比性。本研究經醫院倫理委員會審批通過，所有患者均知情同意并簽字。

1.2 治療方法

1.2.1 DC-CIK細胞制備 每次化療前取患者外周血50 mL，抗凝處理后收集單核細胞。分離后的單核細胞于RPMI-1640培養基中進行培養，在37 ℃、5% CO2條件下孵育2 h，收集非貼壁細胞用于CIK培養、貼壁細胞用于DC培養。非貼壁細胞提取后，調節細胞密度為106個/mL，依次加入干擾素-γ，IL-2和抗CD3抗體進行體外誘導成熟處理。DC主要采用粒細胞集落刺激因子、IL-4以及腫瘤壞死因子-α(TNF-α)進行體外誘導處理。DC細胞和CIK細胞按1∶5的比例共同培養5～7 d，待細胞數目達到5×109后采集細胞使用。

1.2.2 治療方案 兩組患者均未接受放療。對照組采用常規化療方案：順鉑+紫杉醇靜脈滴注，第1天，紫杉醇注射液150 mg/m2加入到500 mL葡萄糖溶液(0.05 g/mL)中靜脈滴注；第1～3天，順鉑75 mg/m2溶于0.9%氯化鈉溶液靜脈滴注。觀察組在對照組化療基礎上聯合應用回輸DC-CIK細胞療法：培養2周的DC-CIK細胞離心收集和洗滌處理，以100 mL 0.9%氯化鈉溶液重懸處理，2 h內靜脈滴注回輸。兩組患者在治療期間密切監測全身狀態，28 d為1個療程，連續治療2個療程。

1.3 觀察指標 觀察并比較兩組的治療效果，以及治療期間患者白細胞減少癥等不良反應發生情況，治療前后TNF-α、CD4+和CD4+/CD8+免疫指標水平。

1.4 療效判定標準 兩組患者療程結束后判定治療效果，療效評價標準分為完全緩解、部分緩解、穩定及進展4個級別。完全緩解：臨床癥狀和病灶均消失。部分緩解：臨床癥狀有所緩解，腫瘤體積縮小。穩定：臨床癥狀和腫瘤大小無變化。進展：腫瘤進展惡化，出現新病灶。總有效率=(完全緩解病例數+部分緩解病例數)/總例數×100%。

1.5 統計學處理 采用SPSS 22.0統計軟件分析和處理數據，計量資料以均數±標準差表示，符合正態分布且方差齊的數據比較應用獨立樣本t檢驗；計數資料以率表示，組間比較采用χ2檢驗；P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組療效比較 觀察組完全緩解2例、部分緩解21例、穩定及進展20例，總有效率53.5%；對照組部分緩解13例、穩定及進展30例，總有效率30.2%；兩組總有效率差異具有統計學意義(χ2=4.778，P＜0.05)。

2.2 兩組不良反應發生情況比較 觀察組有17例出現不良反應，其中白細胞減少癥3例，胃腸道反應和骨髓抑制各2例，肝腎功能損傷10例，不良反應發生率39.53%；對照組有15例出現不良反應，其中白細胞減少癥7例，胃腸道反應4例，周圍神經毒性、骨髓抑制各2例，不良反應發生率34.88%；觀察組不良反應發生率略高于對照組但差異無統計學意義(χ2=0.199，P＞0.05)。

表1 對照組與觀察組治療前后各項免疫指標水平比較

2.3 兩組治療前后各項免疫指標水平比較 治療前兩組患者TNF-α、CD4+、CD4+/CD8+水平差異無統計學意義(t值分別為1.364、0.173和1.297，P值均＞0.05。治療后兩組患者各項免疫指標均得到改善，差異均具有統計學意義(P＜0.05)。治療后觀察組各項免疫指標改善程度均優于對照組，差異均具有統計學意義(t值分別為4.378、5.095和4.336，P值均＜0.05)。見表1。

3 討論

近年來，肺癌的發病率和病死率已躍居世界惡性腫瘤的第1位，NSCLC是肺癌最常見的組織類型，由于NSCLC的發病比較隱匿性，多數NSCLC患者確診時已進展到Ⅲ期或Ⅳ期，預后多不佳[5]，中晚期NSCLC的治療以化療為主。臨床上用于治療NSCLC的化療方案和化療藥物較多，如紫杉類、順鉑、多西他賽、吉西他濱等是一線常用藥物，在延長患者生存時間、提高生活質量等方面均取得了較為理想的效果[6]。

中晚期NSCLC患者身體各項機能較差，多合并營養不良，加之化療帶來的胃腸反應等因素影響，患者免疫機能相對較差，無法耐受長時間、大劑量的放化療[7]。生物治療中的細胞治療主要通過向患者體內回輸免疫活性細胞，達到增強機體免疫功能，從而實現抗腫瘤的目的。針對肺癌的免疫療法多采用淋巴因子激活的殺傷細胞、腫瘤浸潤淋巴細胞及DC-CIK細胞。目前，生物治療已受到越來越多腫瘤界研究者的重視，越來越多的生物治療新技術逐漸應用于臨床抗腫瘤治療中[8]。DC細胞可從非免疫組織轉移到淋巴器官，刺激初始T細胞活化增殖，此外DC細胞可參與抗原呈遞，促進輔助T細胞和殺傷性T細胞(CTL)增殖。CIK對臨床上多種腫瘤細胞具有殺傷作用，可促進腫瘤患者免疫重建，清除放化療后殘余癌細胞或微小病灶。相關研究顯示，DC與CIK聯合培養，DC可激活CIK的活性、促進CIK成熟，有利于緩解腫瘤患者的T細胞免疫缺陷，發揮協同抗腫瘤效應[9]。本研究采用順鉑聯合紫杉醇化療方案，順鉑是一類廣譜抗癌藥物，作用于核酸嘧啶以及嘌呤堿基，抑制DNA的復制，加快腫瘤細胞凋亡；紫杉醇屬于細胞周期特異性抗腫瘤藥物，可抑制細胞有絲分裂，促進細胞凋亡，抑制細胞增殖與侵襲。臨床研究顯示，順鉑聯合紫杉醇不易產生交叉耐藥現象，在不增加藥物毒性的前提下，提高了抗腫瘤效果[10]。

本研究的對照組NSCLC患者接受常規化療方案，觀察組NSCLC患者在對照組化療方案基礎上聯合DC-CIK治療，兩組接受相同療程治療后，結果顯示：觀察組治療總有效率高于對照組，且觀察組治療后各項免疫指標改善程度優于對照組，而兩組在治療期間的不良反應發生率無差異，上述結果提示化療聯合DC-CIK治療中晚期NSCLC，能夠改善患者免疫功能、提高治療效果，且未見不良反應增加。綜上，對于中晚期NSCLC患者，如不能耐受或不接受手術治療，可以考慮在常規化療方案基礎上聯合應用DC-CIK細胞療法。