周凌博,李繼仁
(婁底職業技術學院,湖南婁底417000)
乳酸菌固態制劑是由乳酸菌經過培養、發酵、稀釋、干燥等工藝制成(付麗,2016)。研究表明,乳酸菌作為一種益生菌,可以調節畜禽腸道菌群平衡,抑制腸道致病菌定植,提高動物機體免疫力和生長性能等,被廣泛應用于畜禽養殖中(孫玉章,2015;枉侯軍,2015)。但關于乳酸菌干粉固態制劑報道較少。因此,本試驗在21日齡的三黃肉雞基礎日糧中添加不同比例的乳酸菌固態制劑,旨在探討其對三黃肉雞生長性能和免疫機能的影響,為其進一步在臨床中應用及推廣提供參考。
1.1 材料與儀器 乳酸菌固態制劑主要包括乳酸桿菌、乳酸、檸檬酸等,其中乳酸桿菌≥100萬cfu/g購于山東寶來利來生物工程股份有限公司;免疫球蛋白IgG、IgA、IgM ELISA檢測試劑盒購于Elabscience公司;全自動酶標儀由德國EPPENDOR公司生產;隔水式恒溫培養箱由上海一恒科技儀器有限公司生產;ND陽性血清、PBS、1.5 mL EP管、移液槍等常規的試劑及儀器由本實驗室提供。
1.2 基礎日糧配比 采用玉米—豆粕型基礎日糧,飼養水平參照美國NRC(1994)肉雞飼養標準配制(表1),配制過程中不添加任何益生菌制劑和抗菌藥物。
1.3 試驗動物及設計 采用單因素設計試驗,選擇體重相近的3周齡三黃肉雞600只(由婁底地區規?;怆u示范基地提供),隨機分成4組,每個組3個重復,每個重復50只,1組飼喂基礎日糧為空白對照,2、3、4組在基礎日糧中分別添加1.0%、1.5%、2.0%的乳酸菌固態制劑,試驗期為21 d。每個試驗組每個重復單獨平面飼養,自由采食和飲水。按常規的飼養管理方式進行飼養與管理,按照免疫程序對試驗肉雞進行相關疫苗免疫接種。
1.4 指標測定及方法
1.4.1 生長性能的測定 在試驗開始與結束,提前斷料12 h,對每個試驗組中每只肉雞逐個稱重,在試驗期間記錄每個試驗組肉雞的采食量和耗料量,計算各組的平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADF)和料重比(F/G)。
1.4.2 免疫指標的測定 試驗結束后(21 d),每個試驗組中每個重復組隨機抽取5只肉雞翅下靜脈采血,37℃孵育30 min,離心分離血清,-20℃保存。按照ELISA試劑盒說明書進行檢測血清中免疫球蛋白的IgG、IgM、IgA含量。參照付麗(2016)報道方法,用血凝抑制試驗測定試驗肉雞新城疫抗體效價水平。
1.5 數據分析 試驗結果以“平均值±標準差”表示,試驗數據采用SPSS 19.0軟件進行單因素方差分析,采用Duncan's法進行差異顯著性檢驗,以P<0.05表示差異顯著性。

表1 日糧組成與營養水平
2.1 乳酸菌固態制劑對三黃肉雞生長性能的影響 由表2可知,試驗2、3、4組的ADFI均高于1組,但是差異性不顯著(P>0.05);試驗3組和4組的ADF較1組分別提高10.56%、8.52%(P<0.05),試驗2、3、4組之間相比,差異性不顯著(P>0.05),2組高于1組,但差異性不顯著(P>0.05);試驗3組和4組的F/G較1組分別降低16.30%、12.82%(P<0.05)。試驗2、3、4組之間相比,差異性不顯著(P>0.05),2組低于1組,但差異性不顯著(P>0.05)。

表2 乳酸菌固態制劑對三黃肉雞生長性能測定結果
2.2 乳酸菌固態制劑對三黃肉雞免疫指標的影響由表3可知,試驗3、4組試驗肉雞血清中IgG含量較1組分別提高35.58%、34.29%(P<0.05),試驗2、3、4組之間相比,差異性不顯著(P>0.05),2組高于1組,但差異性不顯著(P>0.05);試驗2、3、4組試驗肉雞血清中IgM、IgA含量均高于1組,但差異性不顯著(P>0.05);試驗3、4組肉雞血清中ND抗體效價水平較1組分別提高25.36%、21.73%(P<0.05),試驗2、3、4組之間相比,差異性不顯著(P>0.05),2組高于1組,但差異性不顯著(P>0.05)。

表3 乳酸菌固態制劑對三黃肉雞免疫指標檢測結果
3.1 乳酸菌固態制劑對三黃肉雞生長性能的影響 孫玉章等(2015)發現,在肉雞基礎日糧中添加一定量的乳酸菌復合制劑可以提高肉雞的生產性能。付麗等(2016)報道,乳酸菌培養物可以提高肉雞生長性能,降低料肉比。孔令勇等(2013)研究表明,在基礎日糧中添加一定量的含有乳酸菌的微生態制劑可以提高肉鴨生長性能。本試驗表明,試驗2、3、4組的ADFI均高于1組,但是未達到差異顯著的水平(P>0.05),試驗3、4組的ADF顯著高于空白對照組(P<0.05),F/G顯著低于空白對照組(P<0.05)。因而證實乳酸菌固態制劑可以提高三黃肉雞的生長性能,其中以1.5%添加為適宜。可能由于乳酸菌固態制劑可以促進飼料中營養物質在肉雞腸道內的消化與吸收,提高飼料利用率,因而提高生長性能。另外乳酸菌固態制劑與乳酸菌培養物及培養液相比,更利于保存,方便操作。
3.2 乳酸菌固態制劑對三黃肉雞免疫指標的影響 血清中免疫蛋白在動物機體免疫中起著重要作用,可以誘導動物機體體液免疫應答,因此,血清中免疫蛋白含量是評價機體免疫水平重要指標(呂春炎,2017;張召興,2017)。付麗等(2016)報道,乳酸菌培養物可以提高肉雞血清中免疫球蛋白IgG、IgA含量。袁翔(2014)研究表明,VBNC狀態乳酸菌突變體可以提高肉雞血清中免疫球蛋白的含量。本研究表明,試驗2、3、4組肉雞血清中IgM、IgA含量均高于對照組,但差異性不顯著(P>0.05),試驗3、4組的血清中IgG顯著高于空白對照組(P<0.05),證實了乳酸菌固態制劑可以提高三黃肉雞的血清中免疫球蛋白含量,從而提高機體免疫機能。新城疫(ND)是危害養雞業主要傳染性疾病之一,其抗體水平的變化是機體體液免疫的狀態指標之一。本試驗結果顯示,試驗3、4組的血清中ND抗體效價顯著高于空白對照組(P<0.05),從而證實了乳酸菌固態制劑可以顯著提高三黃肉雞的ND抗體效價水平。與徐基利(2011)、張志焱等(2013)報道一致??赡苡捎谌樗峋虘B制劑可以調節禽類腸道菌群平衡、抑制腸道致病菌定植、提高飼料利用率,促進肉雞的生長發育,因而提高機體內免疫球蛋白及ND抗體水平,從而提高機體的免疫機能。
本試驗結果表明,在基礎日糧中添加1.5%乳酸菌固態制劑可以提高三黃肉雞生長性能和免疫機能。