奶牛隱性乳房炎診斷技術(shù)研究進(jìn)展

阮瑞寶

摘要：奶牛的隱性乳房炎臨床癥狀不典型，但是乳汁的營(yíng)養(yǎng)成分會(huì)發(fā)生變化，隨著病情的發(fā)展會(huì)惡化為臨床型乳房炎，因此，對(duì)隱性乳房炎的早期診斷十分重要，早期診斷可以控制病情發(fā)展，降低經(jīng)濟(jì)損失。本文主要闡述了奶牛隱性乳房炎的診斷技術(shù)及研究新進(jìn)展，為奶牛隱性乳房炎的綜合防控提供參考。

關(guān)鍵詞：奶牛隱性乳房炎;診斷技術(shù);研究新進(jìn)展

奶牛隱性乳房炎是奶牛的常見(jiàn)多發(fā)病，其發(fā)生率與奶牛的年齡和胎次密切相關(guān)，年齡越大，胎次越高越容易發(fā)生，多數(shù)由各種病原菌感染引起，給養(yǎng)牛業(yè)帶來(lái)嚴(yán)重危害和巨大經(jīng)濟(jì)損失[1]。奶牛隱性乳房炎的臨床癥狀不明顯，但會(huì)導(dǎo)致其產(chǎn)奶量下降，奶品質(zhì)下降，且患隱性乳房炎的病牛產(chǎn)的奶汁中含有炎性因子及致病菌，會(huì)危害人類身體健康[2]，因此，加強(qiáng)奶牛隱性乳房炎的早期診斷至關(guān)重要，奶牛隱性乳房炎的診斷技術(shù)包括病原檢測(cè)方法、乳汁檢測(cè)方法、微量元素檢測(cè)方法、酶檢測(cè)方法、蛋白檢測(cè)方法和分子生物學(xué)檢測(cè)方法，下面對(duì)奶牛隱性乳房炎的診斷技術(shù)及研究新進(jìn)展進(jìn)行介紹。

1 病原檢測(cè)方法

奶牛隱性乳房炎的致病原很多，通過(guò)對(duì)各種致病原的檢測(cè)，既可以確診疾病，又為后續(xù)治療提供參考依據(jù)。奶牛隱性乳房炎的主要致病菌包括金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、各種鏈球菌、真菌及霉形體等。可以通過(guò)對(duì)病牛乳汁中的細(xì)菌分離培養(yǎng)進(jìn)行診斷，病牛乳汁中的細(xì)菌分離培養(yǎng)后可以通過(guò)鏡檢觀察和各種病原微生物的生化培養(yǎng)進(jìn)行鑒定，本方法是常規(guī)方法，應(yīng)用較多，但是檢測(cè)結(jié)果有時(shí)會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性，而且細(xì)菌分離培養(yǎng)有時(shí)需要2—3d，不適合快速臨床診斷。

2 乳汁檢測(cè)方法

乳汁檢測(cè)方法可以通過(guò)對(duì)乳汁體細(xì)胞數(shù)、電導(dǎo)率和pH值測(cè)定以及電泳診斷。當(dāng)發(fā)生奶牛隱性乳房炎時(shí)，乳中體細(xì)胞會(huì)被破壞，發(fā)生沉淀，乳汁中體細(xì)胞數(shù)會(huì)增加。乳腺上皮組織細(xì)胞制造乳糖能力下降，導(dǎo)致乳汁中滲透壓低于血漿滲透壓，Na+、CI-和HC03-等離子滲透到乳汁中，乳汁電導(dǎo)率會(huì)升高。正常乳汁的pH值為6.5—6.8，當(dāng)發(fā)生奶牛隱性乳房炎時(shí)，乳汁pH值會(huì)增高。乳汁中血清蛋白和免疫球蛋白含量會(huì)增高，B一乳球蛋白和a-乳白蛋白會(huì)降低。通過(guò)乳汁體細(xì)胞數(shù)、電導(dǎo)率、pH值和蛋白含量的變化可以判斷其是否發(fā)生奶牛隱性乳房炎。

3 微量元素檢測(cè)方法

發(fā)生奶牛隱性乳房炎時(shí)，血清中的微量元素Fe、Se、Mn和Zn的含量會(huì)下降，通過(guò)監(jiān)測(cè)血清中微量元素Fe、Se、Mn和Zn的含量變化進(jìn)而判斷奶牛是否感染隱性乳房炎。

4 酶檢測(cè)方法

發(fā)生奶牛隱性乳房炎時(shí)，一些酶類的生化活性會(huì)增強(qiáng)，這些酶類包括乳酸脫氫酶（ LDH）、髓過(guò)氧化物酶（MPO）、B-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶（NAG）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ ALT）和乳酸過(guò)氧化物酶（LP）等[3]。通過(guò)檢查酶活性的變化，判斷是否發(fā)生奶牛隱性乳房炎。

5 蛋白檢測(cè)方法

發(fā)生奶牛隱性乳房炎時(shí)，急性反應(yīng)蛋白（ APP）含量會(huì)明顯升高[4]，急性反應(yīng)蛋白（APP）又包括結(jié)合珠蛋白（HP）與血清淀粉樣蛋白A（SAA），發(fā)生奶牛隱性乳房炎時(shí)，這些蛋白的含量都會(huì)增加，通過(guò)監(jiān)測(cè)APP、HP和SAA蛋白含量的變化就可以判斷是否發(fā)生奶牛隱性乳房炎。

6 分子生物學(xué)檢測(cè)方法

上面介紹的都是奶牛隱性乳房炎的常用檢測(cè)方法，通過(guò)聯(lián)合應(yīng)用幾種檢測(cè)方法就可以確診奶牛隱性乳房炎。此外，一些分子生物學(xué)檢測(cè)方法具有快速、敏感和特異的優(yōu)點(diǎn)，適合臨床快速診斷和分子流行病學(xué)調(diào)查。武果桃等[5]建立了直接提取病原菌DNA檢測(cè)奶牛隱性乳房炎的方法，對(duì)太原市小店區(qū)某規(guī)模化奶牛場(chǎng)39頭隱性乳房炎患牛，利用Chelex-100方法直接提取奶樣金黃色葡萄球菌、大腸桿菌及停乳鏈球菌DNA進(jìn)行檢測(cè)。該方法可以直接檢測(cè)奶牛隱性乳房炎，具有簡(jiǎn)單、快速、經(jīng)濟(jì)、無(wú)污染和PCR敏感性高等優(yōu)點(diǎn)，對(duì)奶牛隱性乳房炎的檢測(cè)具有重要意義。蔣成硯等[6]建立了奶牛隱性乳房炎乳房鏈球菌的巢式PCR檢測(cè)方法，采用巢式PCR技術(shù)，根據(jù)細(xì)菌16S rRNA序列保守區(qū)設(shè)計(jì)通用引物，再在乳房鏈球菌16S rRNA保守區(qū)內(nèi)的可變區(qū)設(shè)計(jì)特異性引物，通過(guò)兩輪PCR擴(kuò)增，可以對(duì)奶牛隱性乳房炎乳房鏈球菌進(jìn)行擴(kuò)增。該方法能快速有效檢測(cè)出奶牛隱性乳房炎乳房鏈球菌。

7 結(jié)語(yǔ)

奶牛隱性乳房炎是長(zhǎng)久以來(lái)一直困擾廣大養(yǎng)殖戶的頭疼問(wèn)題，發(fā)生奶牛隱性乳房炎會(huì)導(dǎo)致奶牛的奶品質(zhì)嚴(yán)重下降，產(chǎn)奶量下降，帶來(lái)無(wú)法估計(jì)的經(jīng)濟(jì)損失并嚴(yán)重危害人類健康。隨著各種診斷技術(shù)的發(fā)展，各種檢查方法的靈敏度會(huì)越來(lái)越高，加快奶牛隱性乳房炎的早期診斷必然會(huì)減少臨床奶牛乳房炎的發(fā)生，為養(yǎng)牛業(yè)的發(fā)展帶來(lái)可觀的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益。

參考文獻(xiàn)

[1]郝景鋒，李心慰，劉國(guó)文長(zhǎng)春地區(qū)奶牛隱性乳房炎發(fā)病情況調(diào)查與分析[J]黑龍江畜牧獸醫(yī)，2018（20）：112-115

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[3]薛銀奶牛隱性乳房炎的幾種診斷方法[J]畜牧獸醫(yī)科技信息，2018（10）：68-69

[4]張汾柱奶牛隱性乳房炎的診斷方法與防治措施[J]現(xiàn)代畜牧科技，2018（7）：105.

[5]武果桃，牛國(guó)慶，牛琛，等直接提取病原菌DNA檢測(cè)奶牛隱性乳房炎試驗(yàn)[J]中國(guó)奶牛，2017（5）：29-31

[6]蔣成硯，劉杰，李橋善，等奶牛隱性乳房炎乳房鏈球菌巢式PCR檢測(cè)方法的建立[J]云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)），201 6，31（5）：955-958