蘋果蠹蛾性信息化合物在不同緩釋載體上的釋放速率

姜洪 羅蘭 劉兆良 王浩祺 袁忠林

摘要：本試驗采用殘留法，于第1天和 1、2、3、4、5、6、7、8、9周對4種不同緩釋載體反口橡膠塞、聚乙烯軟管（細，內徑2 mm×外徑3 mm）、聚乙烯軟管（中，內徑4 mm×外徑6 mm）及濾紙片上的蘋果蠹蛾主要性信息化合物E8， E10-十二碳二烯-1-醇含量進行測定，并比較其釋放速率。結果表明，在室內自然條件下，反口橡膠塞中蘋果蠹蛾性信息化合物殘留量在第2～5周時大于0.629 mg，第6周以后緩慢降低，到第9周剩余0.280 mg。而其它載體材料對蘋果蠹蛾性信息化合物的緩釋效果較差，1周之內就將絕大多數的性信息化合物釋放掉。因此，反口橡膠塞可作為誘芯的載體用于蘋果蠹蛾的監測與防治。

關鍵詞：蘋果蠹蛾;性信息化合物;緩釋載體;釋放速率

中圖分類號：S436.61文獻標識號：A文章編號：1001-4942（2019）02-0103-04

Release Rate of Cydia pomonella （Lepidoptera： Tortricidae）

Sex Pheromones on Different Dispensers

Jiang Hong， Luo Lan， Liu Zhaoliang， Wang Haoqi， Yuan Zhonglin

（College of Plant Health and Medicine， Qingdao Agricultural University/ Key Lab of

Integrated Crop Pest Management of Shandong Province， Qingdao 266109， China）

AbstractThe residues of main sex pheromone compound in 4 different dispensers， rubber， PE pipe （middle， inside diameter as 4 mm and outside diameter as 6 mm）， PE pipe （fine， inside diameter as 2 mm and outside diameter as 3 mm） and filter paper， were measured on interval each week and last 9 weeks by gas chromatography， and their release rate were compared. The results showed that the codling moth sex pheromone residues in rubber dispenser were greater than 0.629 mg from the 2nd to the 5th week， and slowly decreased from the 6th weeks; it remained 0.280 mg in the 9th week. The other dispensers had faster release rates， and most of the sex pheromone was released in one week. In conclusion， the rubber could be used as dispenser to monitor and control codling moth.

KeywordsCydia pomonella; Sex pheromone; Controlled-release dispenser;Release rate

蘋果蠹蛾[Cydia pomonella （L.）]是一種毀滅性的仁果類果樹蛀果害蟲，主要危害蘋果、梨等果實，造成大量蛀蟲果，嚴重影響生產和銷售[1，2]。它于1953年在我國新疆發現，到2015年已在新疆、甘肅、寧夏、內蒙古、吉林、遼寧和黑龍江發生危害[3，4]。作為重要的檢疫害蟲，阻斷其擴散與傳播是主要的防治措施，而利用昆蟲性信息素監測和控制其發生與為害是一種重要的手段，該技術具有專一性強、高效、無污染、不傷益蟲等優點，可滿足農業可持續發展的要求[5]。

在利用昆蟲性信息素監測和誘殺中，誘捕器的類型、放置高度及密度、性信息素的誘芯材料和性誘劑的成分及含量是十分重要的，它們直接影響誘捕器的誘捕效果和有效使用時效。為了提高誘捕效果，國內外專家學者在此方面進行了大量研究。目前研究表明，蘋果蠹蛾的性信息素主要成分為E8， E10-十二碳二烯-1-醇，田間試驗結果表明，三角式誘捕器的效果較好[6];在田間應用1.25 mg性誘劑的誘芯誘蛾量最多，高于5 mg或低于0.5 mg劑量的誘芯誘蛾量明顯下降[7]。誘芯材料對昆蟲性信息化合物的利用效率差別很大，但國內關于蘋果蠹蛾性信息素緩釋載體材料比較的研究報道很少。其中李晶等[8]發現新型毛細管誘芯CP20104A、CP20104B、CP20104C、CP20104D、CP20104E的誘捕性能較橡膠誘芯的強;楊興翠等[9]探索過蘋果蠹蛾信息素微膠囊的制備及其緩釋效果。為篩選載體材料易得、成本低廉的誘芯材料，本研究利用氣相色譜法比較4種緩釋載體對蘋果蠹蛾性信息化合物的緩釋效果，旨在為研制效果好的緩釋材料并將其用于田間蘋果蠹蛾的監測與防控奠定基礎。

1材料與方法

1.1試驗材料

蘋果蠹蛾主要性信息化合物（E8， E10-十二碳二烯-1-醇）購自美國Bedoukian公司，產品純度為95%;正己烷為色譜純，天津市津東天正化學試劑廠生產。

緩釋載體：聚乙烯軟管（細）和聚乙烯軟管（中），內徑×外徑分別為2×3、4×6 mm，網購于曼特拉旗艦店;濾紙片，杭州特種紙業有限公司生產;反口橡膠塞（綠色），底部直徑0.9 cm，上部直徑0.5 cm，高1.9 cm，購于北京中捷四方生物科技有限公司。

儀器設備：氣相色譜-質譜聯用儀（Agilent 6890N-5973N）、氣相色譜儀（Agilent 7890A），由美國安捷倫科技有限公司生產。

1.2試驗方法

1.2.1蘋果蠹蛾性信息化合物含量測定方法參照陳傳秀等[10]的方法進行。氣相色譜條件：首先使用氣相色譜-質譜聯用儀（Agilent 6890N-5973N）進行GC-MS檢測，確定蘋果蠹蛾性信息化合物的保留時間。采用7890A氣相色譜儀進行樣品分析，非極性毛細管色譜柱為30 m×0.25 mm×0.25 μm。升溫程序：50℃保持2 min，以5 ℃·min-1升溫至220℃，保持10 min。進樣器溫度220℃，柱頭壓力103.43 kPa，隔墊吹掃流量2.6mL·min-1，不分流進樣模式（保持0.75min），分流出口吹掃流量60 mL·min-1，載氣節省20mL·min-1;色譜柱流速1.5 mL·min-1，檢測器溫度230℃，He流量20 mL·min-1;空氣流量400 mL·min-1;尾吹氣流量41.915mL·min-1。用Agilent Chemstation軟件進行數據采集。

1.2.2蘋果蠹蛾性信息化合物標準曲線的繪制參照楊興翠等[9]的方法進行。精確稱取0.1000 g蘋果蠹蛾性信息化合物，用正己烷溶解后轉移到100 mL容量瓶中定容。分別吸取0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 mL上述溶液于10 mL比色管內，加正己烷至10 mL刻度，得到濃度為0、0.05、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30 mg/mL溶液，用氣相色譜儀（Agilent 7890A）檢測不同濃度對應的峰面積，以濃度為縱坐標，峰面積為橫坐標，制作標準曲線。

1.2.3蘋果蠹蛾性信息化合物不同載體誘芯的制備參照朱虹昱等[11]的方法制備載體誘芯。將蘋果蠹蛾性信息化合物配制成質量濃度為100mg/mL的正己烷溶液，將10 μL溶液用微量進樣器加到上述4種不同載體中，溶劑自然揮發后，每個緩釋載體就成為含性信息化合物1 mg的誘芯;空白誘芯載體用等量的正己烷。

1.2.4不同載體、不同時間蘋果蠹蛾性信息化合物殘留量的測定將制備好的不同載體緩釋誘芯懸于室內，分別于第1天和1、2、3、4、5、6、7、8、9周取樣測定性信息化合物殘留量，比較不同載體材料的緩釋速率，每處理3次重復。將取樣的不同載體材料誘芯剪碎，加入3 mL正己烷，提取24 h后，取1 mL提取液注入干凈的色譜樣品瓶中，蓋緊瓶蓋并于4℃冰箱中保存待測。為確保檢測結果的準確性，所有樣品于制備完成后集中在氣相色譜上進行檢測。檢測時用微量進樣器取1 μL提取液用氣相色譜檢測，測定峰面積，與同一時期制備的標準曲線進行對比計算殘留量。

1.3數據處理

根據3次重復峰面積的平均值與同一時間測定的標準曲線，計算所測樣品中蘋果蠹蛾性信息化合物含量，再根據稀釋倍數換算成每種載體性信息化合物的殘留量。用Microsoft Excel 2007進行數據處理并作圖，使用SPSS 21.0統計分析軟件進行方差分析與擬合。

2結果與分析

2.1蘋果蠹蛾性信息化合物含量的標準曲線

蘋果蠹蛾性信息化合物在色譜樣品瓶中貯存時可能會發生降解、吸附或揮發，因此測定了不同時間蘋果蠹蛾性信息化合物含量并制作標準曲線，以此來校正不同時間誘芯載體中性信息化合物的殘留量。以蘋果蠹蛾性信息化合物的濃度對峰面積平均值進行回歸，得到不同時間的標準曲線方程，由表1可知，在不同時間標準曲線呈良好的線性關系。

2.2蘋果蠹蛾性信息化合物在不同載體中的緩釋情況

由圖1可知，反口橡膠塞和聚乙烯軟管（中）載體中蘋果蠹蛾性信息化合物隨時間延長基本呈先快后慢的下降趨勢。經測定，不同時間取樣的不同載體中性信息化合物含量存在差異。具體表現為第1天，反口橡膠塞、聚乙烯軟管（中）、聚乙烯軟管（細）和濾紙上性信息化合物殘留量分別為0.9987、0.8767、0.6495、0.4083 mg;第1周，反口橡膠塞、聚乙烯軟管（中）、聚乙烯軟管（細）和濾紙上殘留量分別為0.9011、0.2361、0.0998、0 mg;第2周反口橡膠塞、聚乙烯軟管（中）和聚乙烯軟管（細）殘留量分別為0.6628、0.0804、0 mg;從第3周開始，反口橡膠塞、聚乙烯軟管（中）中的性信息化合物緩慢減少，反口橡膠塞中的殘留量在第5周大于0.629 mg，第6周以后小于0.5 mg;聚乙烯軟管（中）中的殘留量自第3周開始均小于0.1 mg;第9周反口橡膠塞中的殘留量為0.280 mg。由此可得，反口橡膠塞是4種載體中緩釋效果最好的材料，其緩釋效果可達9周以上。方差分析表明，反口橡膠塞中蘋果蠹蛾性信息化合物殘留量在第2～5周之間、7～9周之間差異不顯著（P>0.05）。

3討論與結論

蘋果蠹蛾是一種重要的檢疫性害蟲，采用昆蟲信息化合物制備的仿生誘芯對其進行監測、誘殺具有重要意義。良好的緩釋材料對于害蟲的誘集時間、誘集效果十分重要。本研究通過4種緩釋載體的篩選，得出反口橡膠塞對蘋果蠹蛾性信息化合物的緩釋效果最好，是制作蘋果蠹蛾誘芯的較好材料。

本試驗只研究了不同載體對蘋果蠹蛾性信息化合物主要成分的緩釋效果，對不同配比的各成分以及添加抗氧化劑的緩釋情況未有涉及。蘋果蠹蛾性信息化合物不同成分的配比、抗氧化劑添加后的緩釋效果及田間誘蛾試驗還需進一步研究。

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