一測多評（一標多測）質量評價模式在中藥分析領域中的應用

王宏偉，申玉華，姜英子

（1.延邊大學藥學院，吉林 延吉 133002；2.吉林省藥品檢驗所，吉林 長春 130033）

0 引言

中藥的化學成分數目眾多，且各成分之間具有相互協同作用，在研究其有效性時，單一成分含量無法全面反映中藥產品質量，多指標含量測定模式已成為眾多專家學者的共識，傳統的多指標含量測定要求種類繁多的對照品，一測多評法（一標多測）可以解決對照品的瓶頸問題[1]。從2009 年到2018年9 月20 日，在中國知網上檢索到的相關文獻達570 余篇，其中有關藥材、飲片采用一測多評方法的文獻研究306 篇，成方制劑210 篇，其他59 篇。中國藥典收載的品種從1 個（2010 年版）增加到9 個（2015 年版），由此可見，該方法已然成為未來中藥質量整體可控性的發展趨勢之一。

1 概述

1.1 原理

依據在一定的范圍（線性范圍）內成分的量（濃度或質量）與檢測器響應成正比的原理，即W=fA，在多指標質量評價時，假設某樣品中含有i 個組分，fi=Wi/Ai（i=1，2，…，k，…，m），式中Ai 為組分峰面積，Wi 為組分濃度。選取其中的一個組分k為內參物，建立組分k 與其他組分m 之間的相對校正因子fkm=fk/fm=Wk/Wm×（Am/Ak），由此可導出計算公式：Wm=Wk×Am/（fkm×Ak），其中Ak 為內參物的峰面積，Wk 為內參物的濃度，Am 為其他組分峰面積，Wm 為其他組分m 的濃度[2-3]。

1.2 特點

傳統的多指標成分定量評價方法在標準執行階段，需要多個對照品，而一測多評法可以通過測定易得、簡單的一個有效成分，實現多個成分（沒有對照品或難以供應）的同步測定，最終達到控制中藥整體質量的目的，不需要對每個組分都建立含量測定方法及相關的考察，具有檢測成本低、簡便、快速的特點[4]。同時，還存在一些不足之處，如其適用性有待進一步驗證，各個定量組分的色譜條件有一定要求等。

1.3 技術要求

一測多評方法的構建內容包括指標成分的確立、分析方法的建立、測定條件的選擇、參照物及供試品溶液的制備、相對校正因子及相對保留時間的計算、方法學驗證、相對校正因子耐用性考察、色譜峰的定位及多個實驗室復核等，其中相對校正因子和待測色譜峰的準確定位是一測多評方法的最關鍵的兩個環節，在標準中對于實驗條件與參數要盡可能詳細地描述[5]。方法學驗證應參照藥典附錄要求對準確度、精密度、專屬性、定量限、線性、耐用性等內容進行考察，應符合要求。

2 應用

2.1 應用在中藥材及飲片中

在量-效關系評價、同源中藥質量評價及基源鑒定、采收加工及提取工藝優化環節、飲片炮制質量標準、不穩定成分定量評價等方面得到探索和應用，具體見表1。

2.2 應用在中藥成方制劑中

用于中藥制劑、藥材-中間體-制劑、同品種不同劑型的質量評價，具有代表性的統計見表2。

表1 一測多評法在中藥材及飲片測定中的應用

表2 一測多評法在中藥成方制劑中的應用

3 一測多評法研究過程中主要影響因素

3.1 參照物的選擇

從以上表1 和表2 中可以看出，參照物具有以下特點：多為在樣品中有較高含量、有明確的藥理作用、分離及制備相對簡單、性質比較穩定、易于檢測。若測定成分中有2 個以上滿足條件，可通過比較一測多評法與外標法測定結果或RCF 耐用性考察的RSD 進行選擇[6]，也可選擇2 個參照物進行分組計算，或用2 個參照物進行保留時間的校準。

3.2 相對校正因子（RCF）的耐用性

一測多評研究更多采用高效液相-紫外檢測器，主要分為兩種：（1）如果檢測的成分是結構母核相同的類似物，由于同類成分紫外吸收光譜相近，選擇在最大吸收波長處即可；（2）如果檢測不同的成分，由于參照物的紫外吸收光譜和其他待測成分相差較遠，檢測波長可選擇兩者共用的吸收波長區，或在梯度洗脫過程中根據各待測成分的最大吸收波長，實現可變波長檢測[7-8]。

除了檢測波長外，不同的實驗室、pH 值、體積流量、不同檢測人員、不同的色譜儀器、柱溫等均會出現結果不同的相對校正因子，因此導致實際測量值與計算值出現偏差。

3.3 相對校正因子的計算方法

基于現有研究一測多評實例，絕大部分相對校正因子的計算方法采用多點校正法，除此之外還有斜率校正法、定量因子校正法等。斜率校正法和定量因子校正法在一定程度上彌補了多點校正法的不足。相對校正因子的最終確定，要根據相對校正因子計算法得到的數值與不同儀器、不同色譜柱測得的相對校正因子一起進行計算求得算數平均值，即相對校正因子值。

4 結語

一測多評方法是中藥多指標控制的一種新穎、高效、低成本的方法，已經取得較大進展[9-10]。相關研究逐年增多，但目前一測多評法仍存在一些問題：色譜峰定位方法的探索不完善、定位不準確；藥材樣品批次較少，產地未全面包含主產區、道地產區；缺少一測多評法的共享數據庫和更詳細的技術指南。因此有必要建立多成分一測多評測定法中相關參數的數據庫，制定通用的質量評價標準，對一測多評法的適用范圍、方法學考察驗證等內容做進一步規范。