加米霉素注射液治療多殺性巴氏桿菌引起牛呼吸道疾病的臨床療效觀察

馮言言 ， 魏秀麗 ， 鄭 莉 ， 林 紅 ， 孟 芳 ， 李龍飛 ， 孔 梅 ， 吳連勇

(1.齊魯動物保健品有限公司 ， 山東 濟南 250100 ； 2.山東省獸藥質量檢驗所/山東省畜產品質量安全監測與風險評估重點實驗室 ， 山東 濟南 250022)

加米霉素(Gamithromycin)為半合成的大環內酯類獸用抗生素，由法國梅里亞有限公司開發，其制劑為Zactran?注射液，于2008年7月和2011年6月分別經歐盟和FDA批準用于靶動物牛(肉牛和非泌乳期奶牛)，2016年2月經歐盟批準用于靶動物豬，隨后于2017年經歐盟批準用于靶動物羊，可用于治療牛和豬由敏感菌引起的呼吸道疾病以及羊的蹄皮炎。加米霉素對引起牛呼吸道疾病的主要病原菌多殺性巴氏桿菌、溶血性曼氏桿菌、睡眠嗜組織菌等具有較好的體外抑菌和殺菌作用，在臨床治療中具有吸收快、分布廣、安全高效等優點[1-8]。

齊魯動物保健品有限公司現已成功開發加米霉素原料及其注射液，擬用于治療對加米霉素敏感的多殺性巴氏桿菌引起的牛呼吸道疾病。目前，國內尚無加米霉素注射液治療由多殺性巴氏桿菌引起的牛呼吸道疾病的臨床報道，本試驗進行了相關研究，以期為國內臨床合理安全用藥提供參考。

1 試驗藥品

1.1 受試品 加米霉素注射液，含量規格為50 mL ∶7.5 g(15%)，批號為1304001，由齊魯動物保健品有限公司生產。

1.2 對照品 替米考星注射液，含量規格為10 mL ∶3 g(30%)，批號為20131001，由山東正邦生物科技有限公司生產。

2 方法

2.1 動物入選標準 牛經臨床診斷必須為患有呼吸道疾病，表現為呼吸急促及高熱癥狀，其中呼吸系統得分≥1，精神狀態得分≥1分，且直腸肛溫≥40.0 ℃。

2.2 受試動物分組與給藥 將符合入選標準的動物隨機分到加米霉素注射液各劑量組和替米考星注射液對照組中，其中加米霉素注射液低、中、高劑量組的給藥劑量分別為3、6 mg/kg·bw和9 mg/kg·bw，均為單次皮下注射，單一注射位點給藥不超過10 mL。替米考星注射液對照藥物按推薦給藥方案皮下注射，一次量，10 mg/kg·bw。從第1天給藥當天起持續觀察10 d。

入選的受試牛在給藥治療前用鼻拭子插入鼻腔采集樣品，進行呼吸道病原菌的分離培養。

2.3 評價參數 第1次給藥當天算起，給藥后每日測量并記錄體溫，連續測量5 d，觀察期結束時再測量體溫1次。同時在試驗期間每天觀察并記錄受試牛的精神狀態、呼吸、食欲等情況，并按如下標準進行打分：

(1)呼吸評分 0分=正常：無異常呼吸系統癥狀，呼吸頻率和深度適當；1分=輕度呼吸困難：有漿液性鼻涕或眼分泌物排出，和/或并發咳嗽癥狀；2分=中度呼吸困難：鼻腔和眼排出黏性或膿性分泌物，呼吸頻率和深度增加；3分=嚴重呼吸困難：呼吸頻率和深度顯著增加，包括以下一個或多個癥狀，如張口呼吸、腹式呼吸或用力伸頭。

(2)精神狀態評分 0分=正常：靈敏，活潑，具有良好的反應性；1分=輕度抑郁：離群素居、低頭，耳朵下垂，但對微小刺激反應迅速；2分=中度抑郁：離群素居、低頭，肌肉無力(行走時兩腿交叉站立)，對最小刺激反應遲鈍或需要更大的刺激才呈現反應；3分=嚴重抑郁：躺臥不愿站立，或離群素居不愿走動，共濟失調，或行走時搖擺明顯，目光呆滯，頭耷拉耳下垂，可能有過度的流涎、流淚；4分=瀕死：動物不能站立，接近死亡，極可能任何抗生素治療均無效。

2.4 治愈和無效判定標準

2.4.1 治愈標準 受試動物處于下列狀態應被認為治愈：自給藥后到第10天(試驗結束)時入選試驗的存活牛如果呼吸和精神狀態記分均≤1分，且直腸肛溫低于40 ℃者，即認為治愈。依據每組治愈的動物數占各組入選動物數的比例計算出每組的治愈率。

2.4.2 無效標準 以下情況被認為治療失敗或無效：(1)若動物自第二次治療后第3天起至觀察期結束，精神狀態記分達到2分、呼吸狀態記分達2分且直腸肛溫≥39.5 ℃，或不管直腸肛溫是多少但呼吸狀態記分達3分者，均認為是治療失敗；(2)給藥及觀察期內動物因呼吸道疾病瀕死或死亡的屬于治療失敗；(3)試驗期間給動物使用除加米霉素注射液或替米考星注射液以外其他呼吸系統治療的藥物也屬于治療失敗。

依據每組治療后無效動物數占其入選動物數的比例計算出各組的無效率。

2.5 療效評價標準 主要藥效學指標：治愈率。

2.6 數據處理 用SPSS應用軟件系統對2個治療組間的數據進行顯著性檢驗。其中動物體溫、呼吸和精神狀態數據采用t檢驗，治愈率等采用卡方檢驗。

3 結果及分析

3.1 病例入選情況 試驗在揚州大學實驗農牧場和揚州市東郊奶牛場進行，2013年7月-11月期間自上述奶牛場共篩選出具有典型呼吸道疾病癥狀的非泌乳奶牛60頭。對牛呼吸道分泌物在血瓊脂培養基中進行細菌分離及純化，觀察細菌形態，并進行革蘭、美藍染色和鏡檢鑒定。結果表明患有呼吸道疾病的牛中近2/3動物可檢出多殺性巴氏桿菌，分離結果見表1。

表1 各試驗組牛入選前多殺性巴氏桿菌分離結果

3.2 藥物治療效果 加米霉素注射液各劑量組和替米考星注射液對照組中動物的體溫、呼吸評分和精神狀態評分結果見表2～表4。結果顯示，治療后體溫、呼吸評分以及精神狀態評分表現良好的牛，加米霉素注射液給藥組牛的體溫在治療后第2天開始下降，至第4天時體溫基本恢復正常，呼吸和精神狀態評分也均低于1分。統計學分析結果顯示，加米霉素注射液各治療組之間以及與替米考星注射液對照組之間動物在體溫、呼吸評分和精神狀態評分之間無顯著性差異。

綜合動物的體溫、呼吸和精神狀態變化，加米霉素注射液各治療組和替米考星注射液對照組臨床療效評價結果見表5。

表2 加米霉素注射液和替米考星注射液給藥時(0 d)及給藥后1-5 d和10 d的體溫 (℃)

表3 加米霉素注射液和替米考星注射液給藥時(0 d)及給藥后1-5 d和10 d的呼吸評分

表4 加米霉素注射液和替米考星注射液給藥時(0 d)及給藥后1-5 d和10 d的精神狀態評分

表5 各試驗組臨床療效評價

由表5可以看出，加米霉素注射液高、中、低劑量組的治愈率分別為93.33%、86.67%和53.33%，替米考星注射液對照組治愈率為80.00%。統計學分析結果顯示，加米霉素注射液高、中劑量組和替米考星注射液對照組間的治愈率均無顯著性差異(P>0.05)，但與加米霉素注射液低劑量組相比存在顯著差異(P<0.05)。

4 結論

綜上所述，單次皮下注射加米霉素注射液，可有效治療多殺性巴氏桿菌引起的牛呼吸道疾病。考慮到加米霉素注射液高劑量(9 mg/kg·bw)、中劑量(6 mg/kg·bw)對牛呼吸道疾病的治療效果差異不顯著，均優于加米霉素注射液低劑量(3 mg/kg·bw)和替米考星注射液對照組，但加米霉素注射液高劑量用藥成本較高，因此推薦加米霉素注射液臨床用藥方案為：皮下注射，1次量為6 mg/kg·bw。