外源褪黑素對(duì)NaCl脅迫下5BB葡萄葉片生理特性的影響

韓國(guó)民，劉 茜，唐美玲，代玲敏，*

(1.濱州醫(yī)學(xué)院 藥學(xué)院，山東 煙臺(tái) 264003； 2.煙臺(tái)市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院 葡萄與葡萄酒研究所，山東 煙臺(tái) 265500)

土壤鹽漬化是我國(guó)農(nóng)業(yè)生態(tài)文明建設(shè)面臨的重要問題之一。目前，我國(guó)鹽漬化土地約占可利用土地面積的4.9%[1-2]，主要分布在東北、西北、華北和沿海地區(qū)[3-4]。此外，較高的蒸發(fā)強(qiáng)度和較低的水資源利用量不斷增加干旱和半干旱地區(qū)的鹽漬化程度[5]，許多地區(qū)光照充足且晝夜溫差大，適宜葡萄栽培，是我國(guó)重要的葡萄和葡萄酒產(chǎn)區(qū)，但鹽脅迫限制葡萄樹的生長(zhǎng)、光合作用、產(chǎn)量和果實(shí)品質(zhì)[6-7]。高鹽環(huán)境通過滲透脅迫、離子脅迫和氧化脅迫打破植物細(xì)胞內(nèi)自由基產(chǎn)生與清除的動(dòng)態(tài)平衡，加速植物細(xì)胞膜脂的過氧化，進(jìn)而積累有害物質(zhì)引起植物代謝紊亂，阻礙植物正常的光合作用和營(yíng)養(yǎng)吸收[1，8-11]。研究表明，鹽脅迫使葡萄葉片中葉綠素含量下降[12]、膜脂過氧化加劇[13]和丙二醛含量升高[14]，誘導(dǎo)植物激素相關(guān)基因表達(dá)，減少養(yǎng)分的吸收[15-16]。因此，土壤鹽漬化嚴(yán)重制約了我國(guó)葡萄與葡萄酒產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。

褪黑素(melatonin，MT)是廣泛存在于動(dòng)植物體的一種激素，最早在動(dòng)物的松果體中被發(fā)現(xiàn)，屬吲哚類色胺，化學(xué)名稱為N-乙酰-5-甲氧基色胺[17]，直到20世紀(jì)90年代末期才在植物中被發(fā)現(xiàn)[18-19]。MT是一種廣譜抗氧化劑，具有高效清除活性氧簇(ROS)的能力[20-21]，在植物抵御逆境脅迫中有顯著作用[19，22]，如抵御高溫、低溫、高鹽、干旱、紫外線、電離輻射和重金屬等逆境條件[23]。研究證明，干旱脅迫和鹽脅迫條件下，赤霞珠葡萄幼苗根系和葉片中MT含量顯著增加，且脅迫程度越強(qiáng)增幅越大[24]；此外，外源MT能夠緩解臭氧脅迫、NaHCO3脅迫和高溫脅迫對(duì)葡萄葉片光合作用的傷害[25-27]。卞鳳娥等[28]研究發(fā)現(xiàn)，根施MT能夠緩解NaCl脅迫對(duì)釀酒葡萄威代爾葉片葉綠素?zé)晒馓匦缘挠绊懀庠碝T緩解NaCl對(duì)砧木葡萄品種葉片生理特性的影響仍未見詳細(xì)報(bào)道。

隨著國(guó)內(nèi)外學(xué)者在砧木葡萄選育和應(yīng)用研究方面取得明顯進(jìn)展，抗性砧木嫁接栽培已成為趨勢(shì)，對(duì)中國(guó)葡萄產(chǎn)業(yè)生產(chǎn)、可持續(xù)發(fā)展具有深遠(yuǎn)意義[29]。本試驗(yàn)以砧木品種5BB葡萄為試驗(yàn)材料，研究外源MT對(duì)NaCl脅迫下5BB葡萄葉片生理生化指標(biāo)的影響，探索MT緩解NaCl脅迫5BB葡萄葉片生長(zhǎng)發(fā)育的生理生化機(jī)制，為MT在鹽堿地種植葡萄中的應(yīng)用提供一定的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

試驗(yàn)材料為砧木葡萄品種5BB的成熟葉片，于2017年8月在濱州醫(yī)學(xué)院(煙臺(tái))葡萄資源圃摘取。

1.2 處理

從頂端第1片完全展開的葉片算起，摘取第5～7片長(zhǎng)勢(shì)一致的葉片，低溫(冰盒)保存帶回實(shí)驗(yàn)室。參照王平[30]的處理方法并進(jìn)行改良：摘取的葉片分別用自來水和蒸餾水沖洗，用濾紙把剩余的水吸干，將葉柄從基部減去1～2 cm防止產(chǎn)生氣栓，然后用脫脂棉包裹住葉柄。將其插入配好的MT(不同濃度)+0.25 mol·L-1NaCl混合溶液中浸濕，每組處理30片葉片。鹽脅迫中外源MT濃度的設(shè)置參考Meng等[31]的方法并進(jìn)行改進(jìn)：①水空白處理(CK)；②0.25 mol·L-1NaCl 鹽脅迫處理(0 MT)；③0.25 mol·L-1NaCl+100 nmol·L-1MT(100 MT)；④ 0.25 mol·L-1NaCl+200 nmol·L-1MT(200 MT)；⑤0.25 mol·L-1NaCl+500 nmol·L-1MT(500 MT)。

處理好后用封口膜封好放入墊有濕濾紙的培養(yǎng)架中，并用保鮮膜覆蓋在培養(yǎng)架上進(jìn)行保濕，光照16 h·d-1，光照強(qiáng)度為2 000 lx。在鹽處理后的第0、1、2、3、4、5、6天分別取葉片，進(jìn)行各項(xiàng)生理指標(biāo)的測(cè)定。

1.3 測(cè)定項(xiàng)目及方法

1.3.1 光合指標(biāo)

每天上午09:00—11:00，用CIRAS-2便攜式光合測(cè)定系統(tǒng)(PPSystems，英國(guó))測(cè)定葉片的凈光合速率Pn、氣孔導(dǎo)度Gs和胞間CO2濃度Ci。測(cè)定條件：光量子通量密度為1 000 μmol·m-2s-1，參比室CO2濃度為(360±20)μmol·L-1，葉室溫度為(25.0 ± 0.5)℃。

1.3.2 葉綠素相對(duì)含量(SPAD)

隨機(jī)選取各處理的葉片，采用Konica SPAD-502Plus(日本)便攜式葉綠素儀測(cè)定葉片的葉綠素SPAD值。

1.3.3 葉片相對(duì)電解質(zhì)外滲率(REC)

使用電導(dǎo)率儀測(cè)定。用打孔器打取15個(gè)圓片(避開主脈)，放入試管中，加10 mL蒸餾水，搖勻，測(cè)電導(dǎo)率Ea，然后將試樣在室溫下放置24 h，搖勻測(cè)電導(dǎo)率Eb，將試樣煮沸15 min，冷卻測(cè)定電導(dǎo)率Ec。計(jì)算公式：REC=(Eb-Ea)/(Ec-Eb)。

1.3.4 其他指標(biāo)

參照張志良等的方法[32]，采用考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定可溶性蛋白質(zhì)含量，采用硫代巴比妥酸法測(cè)定丙二醛(MDA)含量，采用氮藍(lán)四唑光還原法測(cè)定超氧化物歧化酶(SOD)活性。

1.4 數(shù)據(jù)分析

每次指標(biāo)測(cè)定重復(fù)3次，數(shù)據(jù)均采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，使用SPSS 23.0進(jìn)行方差分析(ANOVA)，當(dāng)存在顯著性差異時(shí)(P<0.05)，平均值進(jìn)行Tukey(HSD)多重比較檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 細(xì)胞膜脂

REC和脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA是衡量膜損傷程度的重要指標(biāo)。由圖1-A可知，從第2天開始，葉片REC在NaCl脅迫下開始顯著增加，但MT顯著緩解了葉片電解質(zhì)的外滲(P<0.05)，不同濃度的緩解效果從大到小依次為100 MT、200 MT和500 MT，其中100 MT處理與CK未出現(xiàn)顯著差異(P>0.05)；從第4天開始，100 MT處理的葉片REC開始顯著高于CK(P<0.05)，但緩解效果依然顯著(P<0.05)，其REC值僅為0 MT葉片的78.29%，此時(shí)500 MT的緩解效果已經(jīng)基本消失，其REC值與0 MT的基本持平；到第6天時(shí)，只有100 MT處理的葉片REC顯著低于0 MT。隨著時(shí)間的推移，未進(jìn)行NaCl脅迫的CK實(shí)驗(yàn)組葉片REC值緩慢增加，可能與離體葉片的活性有關(guān)。

圖1 外源褪黑素對(duì)NaCl脅迫下葡萄葉片相對(duì)電導(dǎo)率和丙二醛含量的影響Fig.1 Effects of exogenous melatonin on electrolyte leakage and MDA content of grape leaves under NaCl stress

如圖1-B所示，第1天，各處理組葉片中MDA含量并未出現(xiàn)顯著性差異；從第2天開始，0 MT組的葉片MDA含量開始顯著高于CK組(P<0.05)，但MT對(duì)葉片細(xì)胞脂膜的保護(hù)作用并未明顯出現(xiàn)。第4天所有NaCl脅迫處理的葉片MDA含量顯著增加(P<0.05)，外源MT處理與0 MT沒有顯著差異，直至第5天100 MT的保護(hù)效果才開始顯著出現(xiàn)，其MDA含量的增長(zhǎng)率僅為第4天的6.99%，而0 MT的增長(zhǎng)率為14.65%。整體來看，隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)，5組處理的葉片MDA含量都呈現(xiàn)升高的趨勢(shì)，其中CK的MDA含量亦平緩增長(zhǎng)，可能與離體葉片的活性有關(guān)。

因此，MT可以同時(shí)降低NaCl脅迫下葡萄葉片的REC和MDA，減弱鹽脅迫對(duì)葉片膜損傷的程度，但MDA對(duì)MT保護(hù)作用的敏感程度遠(yuǎn)弱于REC。

2.2 滲透調(diào)節(jié)物和保護(hù)酶活性

可溶性蛋白質(zhì)和SOD分別是植物脅迫條件下典型的葉片滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)和保護(hù)酶。由圖2-A可知，NaCl脅迫下葉片可溶性蛋白呈先增加后降低的趨勢(shì)，第3天可溶性蛋白質(zhì)含量達(dá)到最高值，之后逐漸減少；到第6天，可溶性蛋白質(zhì)的含量與第1天基本持平。第2天，MT處理組可溶性蛋白含量略高于0 MT組，但并未出現(xiàn)顯著差異；第3天，100 MT、200 MT、500 MT處理的葉片可溶性蛋白質(zhì)含量分別比0 MT處理高出17.83%、13.37%和7.24%，且100 MT和200 MT顯著高于0 MT組(P<0.05)。

圖2 外源褪黑素對(duì)NaCl脅迫下葡萄葉片可溶性蛋白質(zhì)和SOD活性的影響Fig.2 Effects of exogenous melatonin on soluble protein and SOD activity of grape leaves under NaCl stress

如圖2-B所示，NaCl脅迫下葉片SOD活性和可溶性蛋白的變化趨勢(shì)一致，均是先升高后下降。不同的是SOD活性在第3天才開始顯著增加(P<0.05)，在隨后的脅迫過程中SOD活性又逐漸降低。第3天，0 MT的SOD活性顯著高于CK，說明NaCl脅迫促使葉片做出應(yīng)激反應(yīng)，增加保護(hù)酶濃度進(jìn)行自我防護(hù)；此時(shí)，3組MT處理的SOD活性均顯著高于0 MT(P<0.05)，但此時(shí)3個(gè)濃度MT處理之間的SOD活性并未出現(xiàn)顯著差異。隨著NaCl脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)，0 MT處理的SOD活性迅速下降，第4天減少了18.32%，到第6天其SOD活性僅為第3天的52.53%，是脅迫之前的(0 d)68.64%，說明NaCl脅迫對(duì)葉片保護(hù)酶產(chǎn)生了較大影響，但MT處理緩解了NaCl脅迫下SOD活性的降低。從第4天開始，3組MT處理SOD活性均顯著高于0 MT，且100 MT的緩解效果最好，SOD活性顯著高于200 MT和500 MT。因此，鹽脅迫會(huì)使葉片SOD活性降低，褪黑素處理則提高了SOD活性。

2.3 SPAD值和氣體交換參數(shù)

2.3.1 SPAD值

葉綠體是植物葉片完成光合作用的細(xì)胞器，其結(jié)構(gòu)和功能正常是植物生存的前提，但鹽脅迫極易引起葉綠體膜系統(tǒng)的絮亂和破壞[33]。從圖3-A可以看出，葡萄葉片經(jīng)0.25 mol·L-1NaCl脅迫1 d后SPAD值均顯著下降(P<0.05)，但100 MT處理的葡萄葉片SPAD值在NaCl脅迫不同時(shí)間下均高于其他NaCl脅迫處理的葉片。第4天，100 MT處理葉片與0 MT、200 MT和500 MT處理葉片SPAD值的差值達(dá)到最大，分別比CK低4%、20%、18%和21%，具有顯著差異(P<0.05)。但從第5天開始，100 MT對(duì)葉綠體的保護(hù)作用逐漸下降，這與CK組的趨勢(shì)一致，推測(cè)這應(yīng)該與離體葉片本身的活性有關(guān)；第4天之前，500 MT保護(hù)葉綠體的效果好于200 MT，而4 d以后，500 MT的保護(hù)效果開始下降，但SPAD值整體還是略高于0 MT處理。

圖3 外源褪黑素對(duì)NaCl脅迫下葡萄葉片葉綠素相對(duì)含量和氣體交換參數(shù)的影響Fig.3 Effects of exogenous melatonin on soluble protein and gas exchange parameters of grape leaves under NaCl stress

2.3.2 氣體交換參數(shù)

很多植物生理應(yīng)激指標(biāo)可用于評(píng)估逆境脅迫對(duì)植物光合作用的影響。本試驗(yàn)選取凈光合速率(Pn)、氣孔導(dǎo)度(Gs)、細(xì)胞間隙CO2濃度(Ci)3個(gè)指標(biāo)，分別在離體5BB葉片NaCl脅迫的0、1、2、3、4、5、6 d進(jìn)行監(jiān)控。如圖3-B所示，NaCl脅迫第1天，CK和100 MT處理組的葉片Pn并未出現(xiàn)顯著降低，但0 MT和500 MT兩組處理葉片Pn與脅迫前葉片比較出現(xiàn)了顯著降低(P<0.05)，且兩者無顯著差異；從第2天開始，0 MT處理組葉片Pn顯著低于所有外源MT處理組，除100 MT與CK未出現(xiàn)顯著差異外，其余2組MT處理(200 MT和500 MT)Pn均顯著低于CK。隨著時(shí)間的推移，CK和所有NaCl脅迫處理的Pn值均呈降低趨勢(shì)，降低速率分別為CK>100 MT>200 MT>500 MT>0 MT；在第6天之前，除100 MT外，其余NaCl脅迫處理的Pn均顯著低于CK(P<0.05)。

由圖3-C可知，Gs在不同處理中的變化趨勢(shì)與Pn基本一致，但NaCl脅迫下MT對(duì)Gs的緩解效果優(yōu)于Pn。NaCl脅迫的第2天，Gs緩解效果最差的500 MT比0 MT處理的葉片Gs高25.66%，此時(shí)，500 MT的Pn僅比0 MT高出13%。隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)，CK和所有NaCl脅迫處理的Gs值亦呈降低趨勢(shì)，降低速率分別為CK>100 MT>200 MT>500 MT>0 MT。因此，MT可以緩解NaCl對(duì)葉片光合參數(shù)Pn和Gs的影響，100 MT的緩解效果最好，其次為200 MT，隨著MT濃度的增加，MT的緩解效果不斷降低。

在植物光合作用的氣孔限制分析中，Ci的變化趨勢(shì)常用于光合速率變化和氣孔因素之間關(guān)系的確定。由圖3-D可知，第1天，0 MT、200 MT和500 MT處理組的葉片Ci值顯著增高(P<0.05)，從第2天開始，200 MT和500 MT處理組葉片Ci基本趨于穩(wěn)定，但隨著NaCl脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)，0 MT處理組Ci值持續(xù)增加，第6天的Ci值增長(zhǎng)至NaCl脅迫前的1.38倍；CK和100 MT處理組的葉片Ci值變化相對(duì)穩(wěn)定，直到第2天才有所增加，隨后一直維持在400 μmol·m-2s-1左右，并且整體比200 MT和500 MT略低，但各MT處理間并未出現(xiàn)顯著差異(P>0.05)。因此，與Pn和Gs相比，Ci值的變化比較穩(wěn)定，并沒有隨著Pn和Gs的持續(xù)降低而減少；所有MT處理組均與0 MT組差異顯著，但不同MT處理對(duì)Ci的影響并不顯著。

3 討論

鹽脅迫是一種影響植物生存的最廣泛非生物脅迫之一，通過影響植物的生理生化特征抑制植物的正常生長(zhǎng)發(fā)育，嚴(yán)重影響經(jīng)濟(jì)作物的產(chǎn)量和經(jīng)濟(jì)效益。植物受鹽脅迫危害，最直接的原因是細(xì)胞內(nèi)Na+的大量積累，不僅降低植物對(duì)K+和Mg2+等的吸收和積累，而且引起的細(xì)胞內(nèi)外滲透壓變化導(dǎo)致離子毒害和滲透不平衡，損害細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能，進(jìn)而破壞細(xì)胞膜的完整性。在植物正常生長(zhǎng)環(huán)境下，細(xì)胞內(nèi)的電解質(zhì)在細(xì)胞膜的阻隔作用下保留在細(xì)胞內(nèi)，當(dāng)細(xì)胞膜遭受鹽脅迫傷害時(shí)，植物細(xì)胞會(huì)啟動(dòng)胞內(nèi)電解質(zhì)外滲滲透調(diào)節(jié)機(jī)制進(jìn)行自我保護(hù)[34]，此時(shí)細(xì)胞膜的阻隔作用降低使電解質(zhì)涌向細(xì)胞外，增加葉片REC。REC是衡量植物體內(nèi)細(xì)胞內(nèi)溶物擴(kuò)散到細(xì)胞外的一項(xiàng)生理指標(biāo)，也是反映細(xì)胞質(zhì)膜是否受到傷害的指標(biāo)。REC越高，植物受到的鹽脅迫傷害則越大。此外，NaCl脅迫還促使植物體內(nèi)源活性氧的大量積累，誘發(fā)膜脂過氧化損害細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能的完整性[35]，被動(dòng)增加其滲透性，促進(jìn)REC的滲出。

本研究中，圖1-A顯示外源MT在第2天就開始有效緩解電解質(zhì)的滲漏，維持質(zhì)膜系統(tǒng)的完整性，但是外源MT是通過影響植物細(xì)胞滲透調(diào)節(jié)機(jī)制還是利用本身的抗氧化能力消除內(nèi)源活性氧阻礙膜脂過氧化來減緩NaCl脅迫葉片中REC值的增長(zhǎng)，還需要進(jìn)一步印證。MDA作為膜脂過氧化的最終產(chǎn)物，可用于衡量植物膜脂過氧化的標(biāo)準(zhǔn)，其含量能夠間接反映出植物在逆境脅迫下細(xì)胞膜受傷害程度[36]。圖1-B中外源褪黑素在前4 d的NaCl脅迫下并未顯著影響葉片MDA的積累，說明在這段時(shí)間內(nèi)外源MT并沒有直接與內(nèi)源活性氧反應(yīng)阻礙膜脂過氧化，而是通過改變植物細(xì)胞滲透調(diào)節(jié)機(jī)制來影響電解質(zhì)的滲漏。

逆境脅迫下植物可溶性蛋白的變化有2種情況，一種是可溶性蛋白降解或其合成途徑受阻引起可溶性蛋白減少，另外一種是誘導(dǎo)合成新的蛋白進(jìn)而提高可溶性蛋白的含量[39]。因此，有些研究中鹽脅迫使可溶性蛋白增加[40]，也有些研究中的結(jié)果相反[41-42]，但外源褪黑素均增加了可溶性蛋白的含量[40-41]。本研究中葉片可溶性蛋白在NaCl脅迫下呈現(xiàn)先增加后降低的趨勢(shì)(圖2-A)，外源MT從第2天開始顯著增強(qiáng)可溶性蛋白的積累，其影響效果類似REC。一般認(rèn)為，MT引起的可溶性蛋白含量增加能夠有效增強(qiáng)植物的滲透調(diào)節(jié)能力，降低葉片的REC含量，所以本試驗(yàn)中MT在第2天對(duì)REC的顯著性影響歸因于可溶性蛋白的增加，說明NaCl脅迫初期MT通過調(diào)節(jié)可溶性蛋白的含量來改變植物細(xì)胞滲透調(diào)節(jié)機(jī)制；NaCl鹽脅迫3 d以后，MT處理組和0 MT的可溶性蛋白含量差異顯著性逐漸消失，第5天時(shí)其影響效果基本可忽略，但第5天后MT對(duì)REC的影響依然顯著，此時(shí)，對(duì)SOD活性的顯著影響也存在，說明NaCl脅迫后期MT通過提高SOD活性阻礙膜脂過氧化來緩解電解質(zhì)液的外滲。

葉綠體是植物葉片進(jìn)行光合作用的細(xì)胞器，內(nèi)含的葉綠素含量是衡量植物光合活性的重要生理指標(biāo)之一。鹽脅迫通過2個(gè)途徑減少植物葉綠素含量：一是降低葉綠素合成酶活性、抑制葉綠素的合成；另一個(gè)是細(xì)胞膜質(zhì)過氧化后破壞膜結(jié)構(gòu)的完整性，促進(jìn)葉綠素的分解[33，43]。本研究結(jié)果表明，NaCl脅迫顯著降低葉片葉綠素含量，但100 nmol·L-1外源MT能夠顯著緩解NaCl脅迫對(duì)葉綠素的損害。由于在MT增強(qiáng)SOD活性之前葉綠素的減少已經(jīng)出現(xiàn)緩解趨勢(shì)，可以說明外源MT是通過提升葉綠素合成酶活性來減弱葉綠素合成的抑制程度。因此，MT不但可以提升SOD、過氧化物酶和過氧化氫酶等保護(hù)酶的活性，還可以增強(qiáng)葉綠素合成酶的活性。

Pn是衡量植物光合系統(tǒng)是否正常的生理指標(biāo)，引起Pn降低的因素分為氣孔因素和非氣孔因素，非氣孔因素包括光合相關(guān)酶活性和光合器官損傷程度[44]。本研究中發(fā)現(xiàn)，NaCl脅迫下葡萄葉片Pn和Gs隨著脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)呈顯著降低的趨勢(shì)，且兩者之間呈現(xiàn)較好的線性關(guān)系，但Ci值持續(xù)升高，說明NaCl脅迫下非氣孔因素引起了Pn的降低，應(yīng)該與相關(guān)酶活性降低和光合器官持續(xù)受損有關(guān)；本試驗(yàn)中外源MT有效緩解了Ci的增加，尤其是第3天開始Ci值基本保持穩(wěn)定，說明MT處理組的葉片氣孔因素是引起Pn降低的原因，此時(shí)的外源MT通過增強(qiáng)相關(guān)酶活性保護(hù)了葉片的光合器官，進(jìn)而促進(jìn)氣孔的開放，提高了葉片的光合速率。這與楊陽(yáng)等[45]通過外源鈣緩解干旱脅迫對(duì)葡萄光合作用的影響結(jié)果一致。

此外，本研究發(fā)現(xiàn)外源MT濃度越高(100～500 nmol·L-1)，對(duì)緩解葡萄葉片NaCl脅迫的效果越差，這可能與較高濃度MT會(huì)誘導(dǎo)蛋白質(zhì)的氧化變性有關(guān)[26，46]。整體評(píng)估不同濃度外源MT緩解NaCl脅迫的效果可知，100 nmol·L-1的MT處理效果最好，該結(jié)果與其他不同濃度外源MT對(duì)植物逆境脅迫緩解作用的研究結(jié)果一致[26，41]。

綜上所述，適宜濃度的MT能提高NaCl脅迫下砧木葡萄品種5BB葉片可溶性蛋白含量，改善其滲透調(diào)節(jié)能力，增強(qiáng)相關(guān)保護(hù)酶活性，維持細(xì)胞活性氧代謝平衡，降低葉片膜脂過氧化程度，最終保護(hù)葉片的光合作用，減少鹽脅迫對(duì)砧木葡萄品種5BB的損傷。其中，外源MT對(duì)葉片相關(guān)酶活性的調(diào)節(jié)起到關(guān)鍵保護(hù)作用。但是較高濃度的外源MT對(duì)砧木葡萄也有不利影響，效果較好的外源MT濃度為100 nmol·L-1。