慢性痛風急性發作患者TNF-α、IL-2、IL-6變化水平及與腎功能相關性研究

黃楚泉，蔡 奕，林揆斌，林曼娜，鄭裕彬，胡郁剛，李 帆

(廣東省潮州市人民醫院，廣東 潮州 521000)

痛風性關節炎的發生可以促進患者關節持續性損害的發生，研究顯示，痛風性關節炎的發病率可達(223～445)/10萬左右[1，2]。細胞生物學相關因子的改變，可以通過促進炎性細胞的聚集，如單核細胞、巨噬細胞等，加劇關節滑膜組織的損傷，促進關節功能的衰退[3，4]。炎性因子可加快巨噬細胞、單核細胞等的聚集而進一步加重關節損傷[5，6]，參與痛風發作的炎性因子有：環氧化酶2(COX2)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細胞介素(IL)等，它們在痛風急性發作的患者中存在表達水平的異常及變化，對痛風的發病及靶器官的損害中起到關鍵作用，對本病及其并發癥的預防及治療有臨床指導意義及科學依據，本研究選取我院80例急性痛風患者，探討不同指標的表達及其與患者腎功能的關系。

1 資料與方法

1.1一般資料2015年6月至2018年3月我院風濕免疫科確診的慢性痛風急性發作期患者80例(A組)，同時選取40例慢性痛風穩定期患者(B組)、40例來院的健康體查者作為對照組。A組男71例，女9例，年齡(51.1±12.3)歲，病程(5.1±1.8)年，癥狀表現為關節紅腫熱痛、躁動不安，睡眠差。B組男35例，女5例，年齡(52.3±11.2)歲，病程(4.8±2.1)年，癥狀表現為關節輕度的疼痛、能夠正常生活和睡眠。對照組男33例，女7例，年齡(49.5±12.1)歲。3組或者性別及年齡比較，差異均無統計學意義。納入標準：①患者均符合2010年ACR/EULAR 原發性痛風的診斷標準，急性發作期患者表現為關節紅腫、壓痛、活動受限、苔黃、舌質紅暗等；②年齡18～75歲；急性發作時間48 h以內；③慢性痛風穩定期是指患者癥狀消失的期間，即臨床上患者未出現任何癥狀；④30 d內未服用止痛、降酸等藥物治療，未使用對腎功能有影響的藥物；⑤半年內未采用激素類藥物的治療；⑥所有患者均簽知情同意書；⑦經潮州市人民醫院倫理委員會批準。排除標準：①繼發性痛風；②伴冠心病、高血壓、腦梗死等疾病，造血系統異常、肝腎功能異常；③糖尿病等內分泌疾病；④精神障礙；⑤存在惡性腫瘤；⑥伴有原發性腎臟疾病、高血壓腎損傷等。

1.2方法A、B組均進行低嘌呤飲食，并服用碳酸氫鈉片，均未予降酸治療。A組第一天抽完血標本后均口服秋水仙堿片(云南省西雙版納藥業有限責任公司，國藥準字H53021369)0.5 mg/次，2次/日，塞來昔布膠囊(輝瑞制藥有限公司，國藥準字J2014D072)0.2/次，1次/日。

1.3觀察指標比較三組血清TNF-α、IL-2、IL-6及COX2、β2微球蛋白(β2-MG)、尿微量白蛋白(mAlb)、尿酸(UA)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、胱抑素C(Cys-C)。采集空腹靜脈血約5 ml并分作兩份，一份自然抗凝后以3000 r/min離心10 min，取上清液采用酶聯免疫吸附法測定血清中TNF-α、IL-2、IL-6及COX2水平，檢測試劑盒購自北京中杉金橋生物有限公司，部分炎癥因子送廣州南方醫科大學華銀檢驗中心檢測，具體檢測步驟嚴格按照試劑盒說明書進行操作；另一份置于枸櫞酸鈉抗凝管內，加入mAlb、UA、Scr、BUN、Cys-C檢測試劑盒后，利用膠體金法檢測mAlb、UA、Scr、BUN、Cys-C水平，試劑盒購自上海奧普生物醫藥有限公司，具體操作程序按照各種試劑盒的相關說明進行。

1.4統計學方法采用SPSS 16.0統計軟件處理數據。計量資料比較采用單因素方差分析法及LSD-t檢驗；重復測量數據采用多變量方差分析；相關性分析采用Pearson相關分析。P< 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1三組炎癥相關指標比較三組血清TNF-α、IL-2、IL-6、COX2表達水平比較，A組高于B組及對照組，B組高于對照組(P< 0.05)。見表1。

表1 三組炎癥相關指標比較

#與B組比較，P< 0.05，*與對照組比較，P< 0.05

2.2三組腎功能指標比較三組mAlb、UA、BUN、Scr、Cys-C水平比較，A組高于B組及對照組，B組高于對照組(P< 0.05)，見表2。

表2 三組腎功能指標比較

#與B組比較，P< 0.05，*與對照組比較，P< 0.05

2.3A組血清炎癥指標及腎功能指標變化情況治療第7、14天時A組血清TNF-α、IL-2、IL-6及COX2水平及mAlb、UA、Scr、Cys-C水平均較治療第1天降低(P< 0.05)，見表3。

表3 A組血清炎癥指標及腎功能指標變化情況

*與治療第1天比較，P< 0.05

2.4TNF-α、IL-2、IL-6與腎功能相關性分析GFR與IL-2呈正相關，與TNF-α、IL-6呈負相關；SCr與IL-2呈負相關，與TNF-α、IL-6呈正相關(P< 0.05)。見表5。

表5 TNF-α、IL-2、IL-6與腎功能相關性分析 (r)

*P< 0.05

3 討論

痛風性關節炎的發生，主要與體內尿酸結石形成導致的機械性關節損傷有關，特別是在合并有自身免疫性或者代謝性疾病的人群中，痛風性關節炎的發病率更高，臨床預后更差。痛風性關節炎的發生發展，可以在下列方面影響到患者的遠期預后[7，8]：①疾病可以導致關節部位的變形，促進關節畸形、僵硬、結締組織增生等病理生理改變；②痛風性關節炎的發生，促進了關節功能退行性病變的發生，導致關節功能的喪失。而通過對于痛風性關節炎發病過程中相關生物學機制的研究，可以為抑制關節病變的持續性損害，改善關節功能預后等方面提供積極的臨床依據。IL-2、IL-6等，能夠在激活ROCH信號通路的同時，促進下游單核細胞對于關節軟組織的浸潤，促進患者關節周圍纖維結締組織細胞膜完整性損傷等，進而導致關節部位不良預后的發生。近年來基礎方面的研究也證實，IL-2、IL-6等炎癥因子的激活，能夠造成局部組織的免疫紊亂，加劇氧化應激反應，導致痛風性關節炎患者糖皮質激素治療敏感性的下降[9，10]；COX2能夠促進關節腔或者滑膜等組織代謝，從而增加關節外基質的分解或者軟骨組織的持續性損害。部分研究認為高表達的COX2或者IL-2及IL-6等，能夠促進患者關節軟骨基底膜組織的持續性損害，降低關節腔液體的緩沖保護功能[11，12]，但缺乏對于其與痛風性關節炎患者腎臟損傷的關系研究。

本研究發現，在痛風性關節炎患者血清中多種炎癥因子表達水平異常，TNF-α、IL-2、IL-6、COX2等炎癥因子明顯升高，與對照組比較差異有統計學意義，進一步證實TNF-α、IL-2、IL-6及COX2等參與痛風性關節炎的發病，從機制上考慮，不同的因子對于疾病的影響可能與下列幾個方面的因素有關：①TNF-α、IL-2及IL-6等炎性因子的異常表達，促進了患者體內局部關節腔內的關節炎的炎癥因子富集，加劇了單核細胞或者巨噬細胞等對于關節滑膜上皮組織細胞的損害；②TNF-α、IL-2、IL-6及COX等的高表達，加劇了下游自然殺傷性T淋巴細胞等對于關節軟骨組織的損害作用，促進了軟骨組織基底膜完整性的破壞。茍靜等[13，14]在探討了112例不同病情的痛風性關節炎患者的體內不同生物學因子的表達過程中發現，TNF-α等的上升幅度可達55%以上，且患者的關節損傷越為嚴重，關節功能預后越差，相關炎癥因子指標的上升越為明顯。在急性發作期患者的體內，不同的生物學因子的表達濃度上升更為明顯，提示了細胞炎癥因子的異常表達與患者的病情具有密切的關系，這可以為臨床上評估患者慢性痛風性關節炎急性發作的風險提供依據，并為臨床上疾病的治療預后隨訪研究提供可靠的參考指標。

在臨床上，mAlb、UA、Scr、BUN、Cys-C等指標均是評估患者腎功能損傷的重要指標，腎小球濾過率的下降或者腎小管重吸收功能的損害等，均可以促進體內循環血中不同因子的高表達，加劇mAlb、UA、Scr、BUN、Cys-C等的上升。本研究發現，慢性痛風急性發作患者的TNF-α、IL-2、IL-6及COX2水平及mAlb、UA、Scr、Cys-C在治療后不同的時間節點都出現明顯降低，差異有統計學意義，提示急性發作患者通過控制炎癥后，炎癥因子水平下降，相應地，其評估腎功能損害的相關指標同樣改善。提示細胞炎癥因子或者腎功能指標可能在評估痛風患者的病情轉歸情況過程中具有一定的潛在作用，同時提示腎功能得到了一定的保護，體內炎癥因子均得到了一定的抑制。最后，相關關系分析顯示，體內的腎功能損傷指標與患者體內的細胞炎癥因子的表達具有密切的關系，提示生物學因子如TNF-α、IL-2等可能在加劇腎臟損傷方面發揮了重要作用。Choe等研究證實，痛風患者的尿液呈酸性，而尿酸濃度越高則越容易產生腎結石。由于痛風是嘌呤及尿酸代謝出現障礙而產生，尿酸又屬于嘌呤代謝的產物，若患者未及時有效治療痛風，則其體內的尿酸濃度不算上升，形成結晶體或尿酸鹽，沉積于腎小管，產生結石。而患者長期的藥物服用會使機體腎小管及腎小球發生實質性的改變，最終引起腎功能障礙[15]。而痛風患者的TNF-α、IL-2、IL-6在進行治療時均呈現一定幅度的波動，在治療過程中，腎功能中的GFR與SCr也得到不斷改善，有學者認為TNF-α、IL-2、IL-6與腎功能具有一定的相關性[16]。本研究中GFR與IL-2呈正相關，與TNF-α、IL-6均呈負相關；SCr與IL-2呈負相關，與TNF-α、IL-6均呈正相關，均提示患者病情好轉，與上述結論基本相符。

本次研究的創新性在于探討了TNF-α、IL-2等細胞因子在急性及慢性痛風性關節炎患者血清中的差異性表達及相應的腎功能異常變化。綜上所述，慢性痛風急性發作期患者血清TNF-α、IL-2、IL-6、COX2的水平升高明顯，并且與患者的腎功能損傷具有一定的關系。