早期應用阿托伐他汀對實驗性自身免疫性重癥肌無力大鼠病情的干預作用

姚志成 遲壽軍 劉 峻

（1 遼寧省人民醫院神經內科，遼寧 沈陽 110016；2 遼寧中醫藥大學基礎醫學院，遼寧 沈陽 110847；3 遼寧中醫藥大學附屬醫院神經內科，遼寧 沈陽 110032）

重癥肌無力主要累及神經肌肉接頭突觸后膜上乙酰膽堿受體，由乙酰膽堿受體抗體介導，補體參與的自身免疫性疾病，表現為肌肉終板功能障礙和隨之易疲勞的肌肉無力[1]。本實驗旨在比較一線用藥強的松與不同時期應用阿托伐他汀對EAMG大鼠的治療效果，報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗動物：清潔級健康雌性6～8周齡Lewis大鼠50只，體質量160～180 g，購于北京軍事醫學科學院。于（22±2） ℃飼養，亮/暗周期12 h/12 h，自由進食飲水，7 d適應性飼養后開始實驗。

1.1.2 試劑：AchRα1 129～145多肽片段；大鼠AchR-ab ELISA檢測試劑盒；完全弗氏佐劑、不完全弗氏佐劑、磷酸緩沖液，均購自美國Sigma公司；GS-15R低溫高速離心機。

1.1.3 藥物：強的松片(規格5毫克/片)，阿托伐他汀片(規格10毫克/片)。

1.2 方法：大鼠給藥劑量根據體表面積折算，約等于成人等效劑量的6～8倍，所以強的松組按照5.4 mg/（kg·d）的劑量溶解于純水灌胃4周；阿托伐他汀晚期干預組按照1 mg/（kg·d）溶解于純水灌胃4周，灌胃給藥體積為1 mL/100 g，早期干預組大鼠自初次免疫后10 d開始使用上述相同濃度阿托伐他汀溶液灌胃，每日1次至實驗結束。模型對照組每日給予生理鹽水灌胃，空白組例行抓握觀察一般情況不作處理。進行第一次免疫當天，所有大鼠稱重記錄體質量情況，之后每周監測2次并做記錄。

1.3 統計學分析：所得實驗數據均采用SPSS16.0軟件進行分析，數據用（±s）表示。對各組數據采用t檢驗或單因素方差分析，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 造模后大鼠的評估和體質量情況，見表1。

表1 治療前后各組大鼠的臨床Lennon評分比較（±s）

表1 治療前后各組大鼠的臨床Lennon評分比較（±s）

注：與正常組比較，△P＜0.05；與模型組比較，▲P＞0.05，*P＜0.05；與強的松組比較，●P＞0.05

組別 動物數 治療前 治療后正常組 10 0.0±0.0 0.0±0.0 EAMG模型組 8 1.7±0.3△ 1.2±0.4強的松組 10 1.8±0.2△ 0.9±0.2*阿托伐他汀后期干預組 9 1.7±0.5△ 1.3±0.3▲阿托伐他汀早期干預組 10 1.0±0.4△ 0.8±0.3*●

2.2 血清AChR-Ab檢測：造模結束時，各組與空白組比較，AChR-Ab含量含量均顯著升高；與模型組相比，早期干預組AChR-Ab含量含量較低，強的松組用藥4周后，AChR-Ab含量含量與治療前相比顯著降低；早期干預組與前次檢測相比，AChR-Ab含量含量有所下降（P＜0.05），差異均有統計學意義。

2.3 不同治療后大鼠血清各因子水平情況，見表2。

表2 各組大鼠血清細胞因子水平（n=10，±s，ng/L）

表2 各組大鼠血清細胞因子水平（n=10，±s，ng/L）

注：①與空白對照組相比，P＜0.05；②與模型組相比，P＜0.05；③與模型組相比，P＞0.05

組別 n IFN-γ IL-2 IL-4 IL-17 TGF-β空白對照組 10 648.3±24.8 516.1±75.2 30.9±2.0 39±1.8 98.8±5.0 EAMG模型組 8 798.5±6.7① 668.3±29.5① 48.0±3.3① 55±1.9① 89±4.5①強的松組 10 730.5±23.5①② 539±33.5①② 34.5±1.8①② 46.3±1.9①② 100±4.5①②阿托伐他汀后期干預組 9 762.5±7.3③ 657±31.1③ 46.7±3.5③ 49.6±3.3③ 83±5.0③阿托伐他汀早期干預組 10 689.5±20.12①② 539.6±32①② 40.8±2.3①② 45.7±2.8①② 99.5±3.0①②

3 討 論

人類自身免疫性疾病的發病機制較為復雜，MG亦是如此，人體體液及細胞免疫均在其致病過程中發揮了作用，多種抗體、補體及細胞因子等參與了發病過程，MG具體的發病機制仍處于研究階段，許多關鍵因素仍不為人所知[2-3]。本實驗中，與空白對照組相比模型組大鼠血清AChR-Ab含量顯著增高（P＜0.05），肌無力樣改變，體質量進行性下降，說明本實驗中免疫動物所用的AchRα1129～145多肽片段具備高度免疫原性可誘導機體產生特異性免疫應答。

本實驗結果發現早期干預組確有控制EAMG大鼠MG癥狀的作用，同時組內大鼠血清IL-4升高，其作用機制可能是他汀類藥物既可以抑制Th1細胞因子又可以促進Th2細胞因子的生成，并且其在機體內的分解伴有信號轉導和轉錄活化因子-6的磷酸化，而磷酸化的STAT6參與了分泌IL-4的Th2細胞的分化，從而使得IL-4水平上升，降低血清AChR Ab水平，緩解EAMG大鼠的臨床癥狀。