發酵豆粕對凡納濱對蝦生長性能和酶活性的影響

燕 磊， 趙 敏， 朱 偉， 席慶凱， 劉天驥，

吳月明1， 王正國1， 孫春華1，李 巍3，李洪琴1， 朱正鵬1*

（1.新希望六和股份有限公司，北京朝陽 100102；2.青島農業大學，山東青島 266109；3.成都楓瀾科技有限公司，四川成都 611731）

豆粕作為一種優質飼料原料，不僅蛋白質含量高，而且氨基酸種類豐富，已在飼料工業中廣泛應用（胡夢紅等，2007）。但與魚粉相比，豆粕蛋氨酸含量低，且含多種抗營養因子，從而降低了水產動物對其營養物質的吸收和利用率，而且還會對水產動物的免疫系統造成破壞（楊玉娟等，2016）。利用微生物發酵技術可以有效降解豆粕中的抗營養因子，并將大豆蛋白降解為優質小肽蛋白源，大大提高豆粕的營養性能和使用價值 （楊耐德等，2008）。然而，不同加工工藝對發酵豆粕的質量影響很大，其飼喂效果存在很大差異 （張代等，2017）。目前，鮮有關于發酵豆粕對凡納濱對蝦作用效果比較的報道，因此，本研究將不同加工工藝生產的豆粕添加到飼料中飼喂對蝦，研究其對凡納濱對蝦生長性能和酶活性的影響，以期為發酵豆粕在對蝦飼料中的應用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗豆粕及飼料配方 本試驗所用去皮豆粕和干發酵豆粕均購于市場，濕基發酵豆粕由公司內部提供。試驗配制3種飼料，分別添加6%去皮豆粕、4%干發酵豆粕、7%濕發酵豆粕，調整魚粉、花生粕、玉米DDGS比例，保證蛋白質含量一致。試驗日糧組成及營養水平見表1。

1.2 試驗動物及飼養管理 本試驗在新希望飼料研究院即墨特水養殖基地進行，試驗選取初始體質量為3.6~4.2 g體格壯、活力好、規格整齊、無明顯疾病的對蝦99900尾，隨機分成3組，每組6個重復，每個重復5550尾對蝦。分別投喂以上三種飼料，即去皮豆粕、干發酵豆粕、濕發酵豆粕飼料。試驗期為73 d。

表1 試驗日糧組成及營養水平%

飼養管理參照劉君華（2017）的研究方法，每日投料 4 次（06:00、10:00、14:00、18:00），每周對投餌量進行調整。水池內配置充氧設施，并定時開啟，以保證蝦池中溶解氧>5 mg/L，鹽度為30‰自然海水，水溫23~32℃，pH 7.5~8.5，氨氮濃度低于1.0 mg/L，亞硝酸鹽濃度低于0.01 mg/L。

1.3 樣品收集 飼養試驗結束時，將試驗蝦禁食24 h，然后計算每個水泥池試驗蝦的數量并稱取總重量，用于計算試驗蝦存活率 （SR）、末重（FBW）、質量增加率（WG）、特定生長率（SGR）和飼料轉化率（FE）。生長性能計算公式如下：

質量增加率/%=（W2-W1）/W1×100；

特定生長率/%=（lnW2-lnW1）/T×100；飼料轉化率/%=F/（W2-W1）×100；

成活率/%=終末蝦尾數/初始蝦尾數×100。

式中：T為試驗天數，d；W2為試驗結束時各處理魚的平均體質量，g；W1為試驗開始時各處理魚的平均體質量，g；F為試驗期間所用飼料總重，g。

試驗結束，每池隨機選取6尾試驗蝦取肝胰臟，并置于-80℃冰箱保存，用于分析酚氧化酶（PO）、總抗氧化能力（TAS）、超氧化物歧化酶（SOD）活性。

1.4 樣品分析 將飼料樣品烘干 （105℃）至恒重，采用凱式定氮法（VELP，UDK142自動蒸餾裝置，意大利）測定粗蛋白質含量，索氏抽提法測定脂肪含量（SOX416，Gerhardt，瑞典），失重法測定灰分含量；參照國標測定方法 （GB/T5009.124-2003），使用日立L-8800型氨基酸分析儀測定飼料氨基酸組成；肝胰臟樣品送至南京建成生物科技有限公司測定相關酶活性。

1.5 數據統計 采用SPSS 17.0軟件對數據結果進行單因素方差分析（One-way ANOVA），差異顯著后進行Duncan’s多重比較，數據以“平均值±標準差”表示，差異顯著水平為0.05。

2 結果

2.1 生長性能和飼料效率 發酵豆粕對凡納濱對蝦生長性能和飼料效率的影響如表2所示，其中干發酵豆粕和濕發酵豆粕兩組之間終末均重無顯著性差異（P＞0.05），但分別顯著高于去皮豆粕組 2.74、4.14 g（P ＜ 0.05）；濕發酵豆粕組質量增加率和特定生長率顯著高于另外兩組（P＜0.05），其中濕發酵豆粕組質量增加率和特定生長率顯著高于去皮豆粕組96.03%、0.38%/d；干發酵豆粕和濕發酵豆粕組成活率高于去皮豆粕組3.1%、1.8%，但差異不顯著（P＞0.05）。

2.2 酶活指標 發酵豆粕對凡納濱對蝦酶活性的影響如表3所示，干發酵豆粕組超氧化物歧化酶活性、總抗氧化能力及酚氧化酶活性高于去皮豆粕組 3.86、0.21 U/mg prot、0.18 U/mL，低于濕發酵豆粕組 1.74、0.16 U/mg prot、0.24 U/mL，但各試驗組之間無顯著性差異（P＞0.05）。

表2 發酵豆粕對凡納濱對蝦生長性能及飼料效率的影響

表3 發酵豆粕對凡納濱對蝦酶活性的影響

3 討論

3.1 發酵豆粕對凡納濱對蝦生長性能及飼料效率的影響 目前，已有研究表明，一定量的發酵豆粕替代魚粉對魚類生長性能無顯著性影響 （王立改等 ，2018；Liang 等 ，2017；Barnes 等 ，2015；Barnes等，2012）。彭松等（2015）在凡納濱對蝦的研究中發現，以6%發酵豆粕等氮替代魚粉，對蝦的生長性能和飼料效率未受影響；另外，試驗動物個體大小對植物蛋白的敏感程度不一樣。冷向軍等（2007）研究表明，發酵豆粕代替魚粉的比例超過20%時，對蝦（0.1 g）體質量增加率有下降的趨勢。楊耐德等（2008）研究發現，發酵豆粕替代量低于33.33%時，對蝦（1.82 g）生長性能和飼料效率無顯著差異。本試驗中發酵豆粕組終末均重、質量增加率及特定生長率均高于去皮豆粕組，且濕基發酵豆粕組生長性能顯著高于去皮豆粕組，這與李小梅等（2012）研究結果一致。這可能是豆粕經微生物發酵之后，大量高分子蛋白質被分解成利于消化吸收的小分子多肽，這些小肽提高了機體蛋白質的合成效率，進而提高了對蝦的生長性能。而濕發酵豆粕，未經過烘干過程，而直接進入了飼料生產制粒過程，更多的保留了發酵中產生的有益菌次生代謝產物，更有利于對蝦的攝食和生長。另外，楊玉芬等（2009）研究發現，在發酵過程中，適當增加水分含量，可以促進乳酸菌的繁殖，進一步促進其對底物發酵產生有機酸，而有機酸是衡量發酵質量的重要指標，乳酸含量越高，表示發酵質量越好（劉媛媛等，2006）；另外，蔡國林等（2008）研究發現，有機酸具有獨特的芳香，可掩蓋飼料中的不適氣味，提高飼料適口性，這可能是濕基發酵豆粕應用效果優于干發酵豆粕的原因。

3.2 發酵豆粕對凡納濱對蝦酶活性的影響 眾所周知，免疫學指標能夠反映機體的免疫功能和生理狀況，而飼料中添加適量的發酵豆粕可以提高魚類免疫機能（陳萱等，2005）。宋文新（2009）研究發現，發酵豆粕替代10%的魚粉可以提高黑鯛幼魚堿性磷酸酶、超氧化物歧化酶及血清溶菌酶活性；吳釗（2016）研究發現，發酵豆粕替代魚粉可以顯著提高大黃魚肝臟中超氧化物歧化酶活性，但對肝臟中谷丙轉氨酶和谷草轉氨酶沒有顯著性影響。在本研究中發現，干發酵豆粕和濕發酵豆粕組超氧化物歧化酶活性均高于去皮豆粕組，而且濕發酵豆粕組總抗氧化能力顯著高于去皮豆粕組，這可能是發酵過程中產生了游離型大豆異黃酮，從而提高了其生物活性，這與彭松等（2015）的研究結果一致。Sang等（2016）研究發現，飼料中添加發酵豆粕可以顯著提高生長期巖魚血清抗氧化酶活性；豆粕中的抗營養因子會引起魚體的氧化脅迫現象，造成魚體的應激反應，而發酵工藝可以有效降低豆粕中的抗營養因子，這可能是發酵豆粕組對蝦總抗氧化能力高于去皮豆粕組的原因。

4 結論

本次試驗條件下，飼料中添加發酵豆粕能改善凡納濱對蝦生長性能及飼料效率，而且濕基發酵豆粕效果優于干發酵豆粕。