不同儲存溫度對白僵菌孢子活性的影響

張力泉 張建華 查玉平 夏劍萍

(1. 當陽市王店林業管理站 宜昌 444100；2.當陽市森防站 宜昌 444100； 3.湖北省林業科學研究院 武漢 430075)

白僵菌是一種真菌高效生物殺蟲劑，廣泛應用于農林害蟲的生物防治，具有安全環保、專一性強等優點[1]。有研究表明，白僵菌在10～30 ℃時均能生長，5 ℃和35 ℃時則基本上停止生長[2]。白僵菌工業化生產中，白僵菌粉劑的儲存是其中關鍵之一。目前生產中，白僵菌粉劑儲存溫度一般采取0～4 ℃。本研究擬對冷庫不同儲存溫度儲存一定時長的白僵菌粉劑的活性影響進行試驗研究，為進一步找到合適的大量白僵菌粉劑存儲溫度提供依據。

1 材料和方法

1.1 供試菌種

S16、D16、J16三種白僵菌菌株培養提純的白僵菌高孢粉，來源于當陽市興林白僵菌研發中心。

1.2 方法

儲存白僵菌高孢粉：分別將同一批次的同等質量、體積的白僵菌高孢粉塑料袋封存，置于0,1,2,3,4 ℃冷庫中、常溫地下室儲存4個月。

儲存溫度對白僵菌孢子活性影響的測定：

(1)儲存溫度對白僵菌生長影響的測定：將0,1,2,3,4 ℃冷庫中、常溫地下室儲存4個月的白僵菌高孢粉取出復蘇，每組接種5個培養皿，26 ℃、PDA培養基中培養7 d。菌株生長的觀察：菌株在培養1周后，在超凈工作臺上用解剖鏡觀察其生長情況。

(2)儲存溫度對白僵菌活孢率影響的測定：將0,1,2,3,4 ℃冷庫中、常溫地下室儲存4個月的白僵菌高孢粉取出復蘇，用真菌液體培養基培養24 h后檢測活孢率。以上兩組試驗，每處理設2個重復，以同批次剛產出白僵菌高孢粉活孢率做空白對照。

統計分析：測定各組白僵菌的菌落在培養皿上的直徑、活孢率取平均值。用新復極差法(SSR)進行統計分析。

2 結果與分析

2.1 不同儲存溫度對白僵菌生長的影響

表1 不同儲存溫度對白僵菌生長的影響

由表1可以看出，生長率(mm/周)統計結果：白僵菌在剛生產出來0m儲存(空白組)，生長最佳；在0～4 ℃之間，白僵菌均能夠生長，但以0 ℃和1 ℃低溫儲存條件下，生長情況相對較好；其中以地下室常溫(25 ℃)儲存效果最差；此外，不同菌種在同一儲存溫度值下的生長速度盡管有差異，但基本上差異不大。

2.2 不同儲存溫度對白僵菌活孢率的影響

表2 不同儲存溫度對白僵菌孢子活孢率的影響

由表2可見，白僵菌(空白組)在剛生產出來的活孢率最高；在0～4 ℃之間，白僵菌活孢率高低依次是0,1,4,2,3℃；但是地下室常溫組(25℃)活孢率顯著降低。

3 討論

本研究結果表明：在0～4 ℃的冷庫條件下，白僵菌孢子處于干燥、低溫停止生長的環境條件，孢子處于休眠狀態，活性保持完好，置于地下室常溫(25 ℃)，仍處于白僵菌孢子生長所適條件，白僵菌孢子繼續萌發生長，但因缺少營養、其他微生物競爭生長，白僵菌孢子逐漸失去活性甚至衰亡。由此可見，白僵菌如果需要儲存一段時間，以0～1 ℃儲存效果較好，不適合暴露于地下室常溫(25 ℃)。白僵菌比較適合的儲存溫度為0～1 ℃,而且環境必須干燥清潔，綜上將白僵菌高孢粉封存后儲存于0～1 ℃冷庫最為適宜。上述結論對進一步開展大量存儲白僵菌高孢粉提供了參考依據。

白僵菌作為我國新型高效、綠色生物殺蟲劑，具有廣泛的市場前景。多年來實踐表明，白僵菌防治松毛蟲、玉米螟等農林害蟲具有很好的防效[3-4]。但受限于白僵菌生長條件，白僵菌高孢粉生產具有很強的季節性，因此將白僵菌儲存一定時間，并有效保持其生物防蟲的活性是白僵菌項目研究一個重要領域。