四川省遂寧地區(qū)表觀健康成年人群血漿FMN，F(xiàn)MN/TP比值及FMN/ALB比值參考區(qū)間的建立*

肖光軍，劉艷婷，楊 洪，李祥坤，楊 娜，曹 丹，陳小冬

(遂寧市中心醫(yī)院檢驗科，四川遂寧 629000)

果糖胺(fructosamine，F(xiàn)MN)是血液中葡萄糖與清蛋白(albumin，ALB)及其他蛋白分子N末端的氨基發(fā)生非酶促糖化反應(yīng)所產(chǎn)生的衍生物，但因其半衰期較短，可反映人體最近2～3周內(nèi)血糖的平均水平，并與機(jī)體內(nèi)血糖的濃度水平呈正相關(guān)，且具有檢測方便、成本低、不易受飲食和藥物影響等優(yōu)點(diǎn)，現(xiàn)已成為糖尿病患者的臨床診療指標(biāo)之一[1-3]。目前，大部分實(shí)驗室為縮短實(shí)驗室內(nèi)樣本周轉(zhuǎn)時間常使用血漿樣品進(jìn)行FMN的檢測，但其檢測報告仍沿用血清樣品的參考區(qū)間。而研究表明[4]，血漿與血清所含有的成分存在一定差異，用血漿代替血清檢測FMN時，不能直接使用血清樣品的參考區(qū)間，故本研究初步建立了四川遂寧地區(qū)表觀健康成年人群血漿FMN的參考區(qū)間；同時相關(guān)文獻(xiàn)報道[5-6]，果糖胺/總蛋白比值(fructosamine to total protein ratio，F(xiàn)MN/TP)和果糖胺/清蛋白比值(fructosamine to albumin ratio，F(xiàn)MN/ALB)均能有效排除血清中蛋白濃度對FMN水平的影響，能較好地提高糖尿病的診斷效能，因此本研究進(jìn)一步建立了該人群血漿FMN/TP和FMN/ALB的參考區(qū)間。

1材料與方法

1.1 研究對象 選取2017年1月～12月在遂寧市中心醫(yī)院健康管理中心進(jìn)行健康體檢的14 639例20～79歲的表觀健康成年人作為研究對象，其中男性4 811例，女性9 828例，中位年齡48歲(40～58歲)。將所有對象按性別分組后，再根據(jù)年齡分為6個亞組：20～29歲組、30～39歲組、40～49歲組、50～59歲組、60～69歲組和70～79歲組，男性各組依次為469例、624例、1 240例、1 008例、1 036例及434例，女性各組依次為1 104例、1 434例、3 141例、2 288例、1 382例及479例。研究對象入選標(biāo)準(zhǔn)：①既往無高血壓、糖尿病、冠心病、卒中、血脂異常、高尿酸血癥、甲狀腺功能異常及其它慢性疾病史，近半年內(nèi)無獻(xiàn)血史、輸血史及手術(shù)治療史；②實(shí)驗室檢查其肝功、腎功、血脂、血糖、尿酸、血細(xì)胞檢測等均正常；③胸部X線檢查其心肺影均未見異常；④肝、膽、胰、脾、腎超聲檢查均未見異常；⑤心電圖檢查未見異常。排除標(biāo)準(zhǔn)：①空腹靜脈血漿葡萄糖≥6.1 mmol/L的體檢者；②BMI≥28 Kg/m2的肥胖者；③處于妊娠期或哺乳期的女性；④體檢前1個月內(nèi)使用過可能影響糖代謝的藥物如糖皮質(zhì)激素、甲狀腺激素、噻嗪類利尿劑等；⑤調(diào)查表中基本信息、既往史等填寫不完善者。試驗前均告知研究對象試驗的性質(zhì)、目的，并填寫知情同意書[7]。

1.2 儀器與試劑 FMN，TP，ALB等常規(guī)生化項目均使用日立7600全自動生化分析儀檢測，試劑及其配套校準(zhǔn)品均由四川邁克生物科技股份有限公司提供。儀器性能良好、運(yùn)行正常，并定期進(jìn)行維護(hù)保養(yǎng)和校準(zhǔn)，室內(nèi)質(zhì)控均在控[8]。

1.3 方法

1.3.1 樣本采集與檢測 使用肝素鈉抗凝真空采血管采集所有研究對象清晨空腹靜脈血3 ml，輕輕顛倒混勻6～8次后以4 000 r/min的參數(shù)離心5 min及時分離血漿，并于采樣后2 h內(nèi)完成全檢測并收集數(shù)據(jù)。

1.3.2 FMN/TP和FMN/ALB計算：根據(jù)研究對象血漿樣本中的FMN，TP及ALB的濃度計算FMN/TP和FMN/ALB，其公式分別為：FMN/TP=FMN÷TP，F(xiàn)MN/ALB=FMN÷ALB，單位均為μmol/g。

2結(jié)果

2.1 檢測結(jié)果的離群值檢驗及數(shù)據(jù)分布 所有研究對象按性別分組后，Kolmogorov-Smirnov正態(tài)性檢驗顯示，男性和女性血漿FMN，F(xiàn)MN/TP及FMN/ALB檢測結(jié)果均呈偏態(tài)分布(P<0.05)，其Z值和P值見表1；Mann-WhitneyU秩和檢驗顯示，血漿FMN，F(xiàn)MN/TP及FMN/ALB的濃度水平在男性和女性間差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，見表1。

表1 男性和女性表觀健康成年人群血漿FMN，F(xiàn)MN/TP及FMN/ALB濃度分布[M(P25，P75)]

2.2 各年齡組FMN，F(xiàn)MN/TP及FMN/ALB濃度水平的比較 見表2。將男性和女性分別按年齡段分組后，Kolmogorov-Smirnov檢驗顯示，各組FMN，F(xiàn)MN/TP及FMN/ALB的檢測結(jié)果均呈偏態(tài)分布(P<0.05)，且男性和女性血漿FMN/TP，F(xiàn)MN/ALB的濃度水平均隨著年齡的增加而逐漸升高。Mann-WhitneyU秩和檢驗對各組進(jìn)行比較，結(jié)果顯示：FMN在男性 20～29歲組，30～39歲組和40～49歲組三組間差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，以及70～79歲組與50～59歲組、60～69歲組間差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，其余各組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；而在女性各年齡段間僅70～79歲組與50～59歲組、60～69歲組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，其余各組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。FMN/TP在男性20～29歲組和30～39歲組兩組間、以及60～69歲組和70～79歲組兩組間差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，其余各組間差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；而在女性各年齡段間差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。FMN/ALB在男性和女性各年齡段間差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

表2 各年齡組FMN，F(xiàn)MN/TP，F(xiàn)MN/ALB濃度水平的比較(n=14 639)

2.3 表觀健康成年人群血漿FMN，F(xiàn)MN/TP及FMN/ALB參考區(qū)間建立 分別將表2中的男性和女性各年齡組表觀健康成年人群血漿FMN，F(xiàn)MN/TP及FMN/ALB濃度水平的中位數(shù)與其總體區(qū)間的中位數(shù)進(jìn)行比較，男性各年齡組血漿FMN，F(xiàn)MN/TP及FMN/ALB濃度水平中位數(shù)的變異依次為0，-2.27%～3.18%和-6.74%～6.47%；而女性則依次為0～5.88%，-2.23%～2.23%和-3.90%～5.71%。男女各年齡組FMN，F(xiàn)MN/TP及FMN/ALB中位數(shù)的變異均<25%，故男性和女性各年齡組均可合并，不需按年齡段分組設(shè)置參考區(qū)間。按性別分組，以百分位數(shù)法建立四川遂寧地區(qū)男性和女性表觀健康成年人群血漿FMN，F(xiàn)MN/TP及FMN/ALB的參考區(qū)間，見表3。

表3 表觀健康成年人群血漿FMN，F(xiàn)MN/TP及FMN/ALB的參考區(qū)間(P2.5，P97.5)

3討論糖尿病(DM)是一種常見的內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病，其發(fā)病率一直處于上升趨勢，對患者早期診斷、及時干預(yù)和長期治療監(jiān)測是減少并發(fā)癥、降低其死亡率的關(guān)鍵措施[1]。目前糖尿病常用的診斷及監(jiān)測指標(biāo)有空腹血糖、口服葡萄糖耐量試驗、糖化血紅蛋白、糖化清蛋白、FMN和血清1，5‐脫水葡萄糖醇等[1-3]，但因FMN檢測結(jié)果不受飲食、藥物、運(yùn)動、貧血及血紅蛋白變異體等因素的影響[5-6]，且檢測方便、成本低廉，而被大量應(yīng)用于臨床；同時，因其半衰期比糖化血紅蛋白短，能更靈敏地反映患者檢測前2～3周內(nèi)血糖的波動情況，作為糖化血紅蛋白檢測的有效補(bǔ)充，能指導(dǎo)臨床及時調(diào)整用藥方案，已成為DM和DM前期簡單而可靠的療效監(jiān)測依據(jù)[1-3，5-6]。相關(guān)研究表明[5-6]，F(xiàn)MN易受血清蛋白濃度的影響，從而限制了其臨床應(yīng)用價值，但可通過FMN/TP比值和FMN/ALB比值來排除血清蛋白濃度對FMN水平的影響，提高FMN對糖尿病的診斷效能。故本文對四川遂寧地區(qū)健康成年人群血漿中FMN，F(xiàn)MN/TP比值和FMN/ALB比值的濃度水平進(jìn)行了探討，觀察其在性別和年齡段間是否有差異，并建立了血漿參考區(qū)間，以指導(dǎo)臨床合理應(yīng)用實(shí)驗室檢查結(jié)果。

研究結(jié)果顯示，男性和女性間血漿FMN，F(xiàn)MN/TP及FMN/ALB濃度水平比較差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，且均呈偏態(tài)分布(P<0.05)。將其進(jìn)一步按年齡段分組，各年齡組數(shù)據(jù)均呈偏態(tài)分布。從表2可見男性和女性血漿FMN/TP，F(xiàn)MN/ALB的濃度水平均隨著年齡的增加而逐漸升高，而各組間FMN的濃度水平差異較小；但男性和女性各年齡組血漿FMN，F(xiàn)MN/TP及FMN/ALB濃度水平的中位數(shù)與其總體區(qū)間中位數(shù)的差異均<25%，均可不獨(dú)立分組建立參考區(qū)間，以避免過多分組給臨床的診療帶來不必要的干擾[8]，故本研究僅按性別進(jìn)行分組建立了適宜于本實(shí)驗室檢測系統(tǒng)及其所服務(wù)成年表觀健康人群的血漿FMN，F(xiàn)MN/TP及FMN/ALB參考區(qū)間。所建立的血漿FMN參考區(qū)間與廠商試劑說明書提供的成人FMN血清參考區(qū)間(1.1～2.2 mmol/L)相比較有較大的差異，這可能與參考人群、飲食與營養(yǎng)、居住環(huán)境與氣候、標(biāo)本類型、實(shí)驗室環(huán)境及其檢測系統(tǒng)不一致等多種因素有關(guān)，這也進(jìn)一步說明實(shí)驗室需根據(jù)實(shí)際情況建立適宜于其服務(wù)人群的參考區(qū)間[9-10]。

本研究所建立的參考區(qū)間也存在一定的局限性，首先本研究的研究對象為表觀健康人群，所制定的納入標(biāo)準(zhǔn)和排除標(biāo)準(zhǔn)可能存在缺陷，可能會影響研究結(jié)果；其次研究對象為20～79歲的體檢人群，未能覆蓋兒童、青少年、孕婦等人群，也未能對城鎮(zhèn)居民與農(nóng)村居民的水平差異進(jìn)行探討，今后尚需多中心、多地域的前瞻性隨訪研究以進(jìn)一步確認(rèn)[9]。

參考區(qū)間：

[1] JUNG M，WARREN B，GRAMS M，et al．Performance of non-traditional hyperglycemia biomarkers by chronic kidney disease status in older adults with diabetes：results from the atherosclerosis risk in communities study[J]．Journal of Diabetes，2018，10(4)：276-285．

[2] PARRINELLO C M， SHARRETT A R， MARU-THUR N M，et al．Racial differences in and prognostic value of biomarkers of hyperglycemia[J]．Diabetes care，2016，39(4)：589-595．

[3] 季雄娟，邵靜，陸勝．糖化血紅蛋白及糖化清蛋白水平對糖尿病視網(wǎng)膜病變的診斷價值分析[J]．現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2018，33(5)：77-81．

JI Xiongjuan，SHAO Jing，LU Sheng．Diagnostic value of glycocsylated hemoglobin A1c and glycated albumin levels in diabetic retinopany[J]．J Mod Lab Med，2018，33(5)：77-81．

[4] 楊琳，肖光軍，楊洪，等．血漿與血清樣本果糖胺檢測結(jié)果的比較分析[J]．醫(yī)學(xué)信息，2018，31(19)：158-160．

YANG Lin，XIAO Guangjun，YANG Hong，et al．Comparative analysis of the results of detection of fructosamine in plasma and serum samples[J]．Medical Information，2018，31(19)：158-160．

[5] 陳立新，張靖宇，王麗芳，等．果糖胺/血漿清蛋白與果糖胺/血漿總蛋白在糖尿病診斷中的價值比較[J]．國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2017，38(16)：2288-2290．

CHEN Lixin，ZHANG Jingyu，WANG Lifang，et al．Comparison of the value of fructosamine to albumin ratio and fructosamine to total protein ratio in the diagnosis of diabetes mellitus[J]．Int J Lab Med，2017，38(16)：2288-2290．

[6] 張麗紅，黃婷婷．果糖胺/血清蛋白比值對糖尿病的診斷價值[J]．中國糖尿病雜志，2015，23(10)：912-914．

ZHANG Lihong，HUANG Tingting．The value of fructosamine/serum protein ratio in diagnosis of diabetes mellitus[J]．Chinese Journal of Diabetes，2015，23(10)：912-914．

[7] 中華人民共和國國家衛(wèi)生和計劃生育委員會．WS/T 402-2012：臨床實(shí)驗室檢驗項目參考區(qū)間的制定[S]．北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2013．

Ministry Health and Family Planning Commission of the People’s Republic of China．WS/T402-2012：Define and determine the reference intervals in clinical laboratory[S]．Beijing：China Standard Press，2013．

[8] 高原，楊劍敏，王歡，等．上海市區(qū)2 408例健康兒童末梢血血常規(guī)參數(shù)的參考區(qū)間調(diào)查分析[J]．檢驗醫(yī)學(xué)，2012，27(3)：217-220．

GAO Yuan，YANG Jianmin，WANG Huan，et al．Survey analysis on the routine reference intervals of peripheral blood determination among 2 408 healthy children in Shanghai[J]．Laboratory Medicine，2012，27(3)：217-220．

[9] 章曉燕，王薇，何法霖，等．全國網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)參考區(qū)間和決定限現(xiàn)狀調(diào)查與分析[J]．現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2016，31(3)：158-161．

ZHANG Xiaoyan，WANG Wei，HE Falin，et al．Investigation and analysis of reference intervals and decision limits of reticulocyte count in China[J]．J Mod Lab Med，2016，31(3)：158-161．

[10] 段敏，趙海建，王薇，等．臨床檢驗參考區(qū)間和決定限的質(zhì)量要求[J]．現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2017，32(5)：148-151．

DUAN Min，ZHAO Haijian，WANG Wei，et al．Qu-ality requirements for reference intervals and decision limits in clinical laboratory[J]．J Mod Lab Med，2017，32(5)：148-151．