腸桿菌肽替代土霉素鈣對斷奶仔豬生長性能的影響

趙青海 胡 毅

（1.北京中農穎泰生物技術有限公司，北京100193；2.華中農業大學動物醫學院，湖北武漢430070）

土霉素鈣屬于四環素類抗生素， 抗菌譜較廣。 自2017 年硫酸粘桿菌素在飼料中禁用之后， 土霉素鈣作為替代品大量使用在各個階段的主商品飼料中， 作為主要的抗生素品種，對于減少仔豬斷奶腹瀉， 促進生長具有一定的作用。 然而， 土霉素鈣如果長期超量添加，存在非常嚴重的耐藥性問題， 各企業和研究機構深刻認識到這一點， 并積極尋求解決之道。 2019 年7 月10 日農村農業部發布194 號公告， 明確在2020 年7 月1 日前， 飼料生產企業停止生產含有促生長類藥物飼料添加劑的商品飼料， 故尋找土霉素鈣的替代產品以及方案， 具有非常重大的意義。

腸桿菌肽最早是由1993 年美國普林斯頓大學從腸道細菌中分離出一類分子量小于2.5KD (千道爾頓） 的索套結構肽， 由21 個氨基酸組成， 分子質量為2.1kDa， 其中N 端的8 個氨基酸形成一個圓形的環狀結構， 9-21氨基酸形成β 發夾結構， 貫穿圓環， 故其性質非常穩定， 對高溫、 蛋白酶有良好耐受性。腸桿菌肽對革蘭氏陰性菌具有強烈的殺滅作用， 在微生物實驗室條件下， 針對大腸桿菌，沙門氏菌等主要有害菌可以做遠低于土霉素鈣的最低抑菌濃度。 本試驗在斷奶仔豬日糧中添加腸桿菌肽替代原配方中的土霉素鈣， 研究并驗證其對斷奶仔豬生產性能的影響， 旨在為腸桿菌肽替代土霉素鈣提供科學依據。

1 材料與方法

腸桿菌肽（抗菌肽含量0.5%）， 林州中農穎泰生物肽有限公司提供。 20%土霉素鈣， 正大集團購買。

1.2.1 試驗動物及設計 挑選8 欄健康的平均斷奶日齡在21 日齡左右、 斷奶方式一致、 平均斷奶體重在7-8 公斤的仔豬， 分為2個組， 每組3 個重復， 每個重復20 頭左右，各處理間初始體重無明顯差異。 試驗前3 天保健， 不使用抗生素等藥物， 試驗期為16d。 試驗用基礎日糧配方及營養水平見表1。 各個處理組日糧中藥物添加見表2。 試驗豬在斷奶前按豬場的正常飼養管理規定進行飼養和免疫。試驗期間自由采食， 供給衛生的飲水， 并進行嚴格的環境監控， 以保證實驗的準確性。

表1 基礎日糧配方及營養水平

營養濃度

表2 各處理組日糧藥物添加方案

1.2.2 檢測指標與方法

1.2.2.1 記錄指標

記錄每欄仔豬初重、 末重、 飼料消耗量，每天記錄每欄采食量折算每頭日采食量， 早晚中晚各觀察一次仔豬腹瀉情況。

1.2.2.2 計算指標：

日增重（g/d） = （試驗末總重+試驗期死亡/淘汰的動物總重-試驗初總重） /試驗頭數， 其中試驗頭日數應包括被淘汰的豬試驗天數在內。

料肉比=總耗料/總增重

腹瀉率= （腹瀉頭數* 腹瀉天數） /（試驗豬頭數* 試驗天數） *100%

2 結果與分析

腸桿菌肽替代土霉素鈣對斷奶仔豬生產性能的影響腸桿菌肽替代土霉素鈣對斷奶仔豬生產性能和腹瀉率的影響見表3。 同土霉素鈣組相比， 抗菌肽組日增重提高了4%、 采食 量 提 高 了2.2% （P ＞0.05）、 料 肉 比 增 加0.8%， 腹瀉率降低12.4%， 整個試驗期無仔豬死亡。

表 3 腸桿菌肽替代土霉素鈣對斷奶仔豬生產性能和腹瀉率的影響

3 討論

自抗生素發明以來， 抗生素不僅僅對人類的健康產生了巨大的作用， 并且在動物的健康以及生產性能的提高有著不可磨滅的貢獻，極大地豐富了我們對動物食品的需求。

然而隨著時代的發展， 抗生素也展現出來了它有害的一面。 近30 年來， 抗生素在動物飼料中的使用量日漸增長， 品種也日漸豐富，隨之而來是我們必須面對的兩個問題： 其一是動物本身對抗生素產生耐藥性的問題， 需要不停地增加使用量才能維持同樣的效果，最終導致某類抗生素失效。 其二是在商品飼料以及養殖現場抗生素的使用量過量導致的食品安全問題。 非抗生素類物質替代抗生素在動物生產過程中使動物保持健康和穩定的生產性能， 是我們必須面對的課題， 抗菌肽就是其中一個非常重要的研究方向。

抗菌肽分子量小、 水溶性好、 熱穩定性較高、 生物功能多樣， 有著與傳統抗生素不同的殺菌機制， 不易導致耐藥性菌株的產生。目前全球共發現的抗菌肽已達到兩千多種。腸桿菌肽是一種優質的抗菌肽， 研究顯示，腸桿菌肽不僅僅對革蘭氏陰性菌具有非常明確的殺滅作用， 而且因其膜穿孔的殺菌機制，極難產生耐藥性， 符合抗生素替代品的發展趨勢。 Sophie 等（2000） 研究發現， 腸桿菌肽純品對E.coli O157：H7 最低抑菌濃度為1μg/ml。Fabian 等（2007） 研究顯示， 其對沙門氏菌最低抑菌濃度為3.12μg/ml， 以上研究表明， 腸桿菌肽最主要的兩種導致動物生產性能降低和腹瀉的兩種革蘭氏陰性菌作用確切。

針對養殖現場， 研究者們對現場采集的大腸桿菌野生毒株進行了最低抑菌濃度的測定。研究結果表明， 20%土霉素鈣和0.5%腸桿菌肽對大腸桿菌標準菌株ATCC25922 都有很強的抑菌效果； 而0.5%腸桿菌肽大腸桿菌野生毒株的抑制效果明顯高于20%土霉素鈣； 土霉素鈣對CVCC50094 表現出很強的抑菌效果，但對野生型沙門氏菌， 0.5%腸桿菌肽對大部分沙門氏菌的MIC 小于20%土霉素鈣， 效果較好。 無論是在實驗室， 還是在生產現場， 新型抗菌肽腸桿菌肽均能體現出較好的抑菌能力， 做到了替代抗生素， 但避免了使用抗生素的弊端， 是在無抗時代下一個值得深入研究并推廣的選項。