URAT1基因多態(tài)性與維吾爾族高尿酸血癥的交互作用研究

李瑞 秦麗巖 張蓓

[摘要] 目的 探索人尿酸鹽轉運子基因（URAT1）rs3825018、rs505802和rs524023位點基因多態(tài)性與維吾爾族高尿酸血癥（HUA）的交互作用。 方法 選取2014年11月～2016年12月在新疆烏魯木齊市某附屬醫(yī)院健康管理中心參加健康體檢的維吾爾族2340例作為研究對象，并根據尿酸水平分為HUA組（n = 986）與對照組（n = 1354）。測量研究對象的身高、體重、腰臀圍、血壓等一般指標，并收集其禁食12 h后的靜脈血液標本，檢測血尿酸、肌酐、葡萄糖、總膽固醇和三酰甘油等生化指標及URAT1基因rs3825018、rs505802和rs524023位點基因多態(tài)性。 結果 HUA組與對照組的URAT1基因rs3825018、rs505802和rs524023位點等位基因及基因型頻率分布比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P > 0.05）。遺傳模型分析發(fā)現，無論是否調整年齡和性別，rs3825018、rs505802和rs524023三個多態(tài)性位點在三個遺傳模型中均與維吾爾族HUA無顯著相關（95%CI跨越1）。交互作用結果顯示，維吾爾族女性攜帶rs505802位點突變在相加模型中存在負交互作用（S = -0.146，P < 0.05）。 結論 URAT1基因rs3825018、rs505802和rs524023位點突變可能不會影響維吾爾族HUA的易感性，維吾爾族女性攜帶rs505802位點突變可能會在一定程度上降低發(fā)生HUA的風險。

[關鍵詞] 人尿酸鹽轉運子1基因;單核苷酸基因多態(tài)性;維吾爾族;高尿酸血癥

[中圖分類號] R589.7? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1673-7210（2019）03（a）-0004-04

[Abstract] Objective To explore the interaction between human urate transporter 1 （URAT1） gene rs3825018， rs505802 and rs524023 gene polymorphisms and Uygur hyperuricemia （HUA）. Methods A total of 2340 Uygur subjects who took part in physical examination in the health management center of an Affiliated Hospital in Urumqi from November 2014 to December 2016 were selected as subjects and divided into HUA group （n = 986） and control group （n = 1354） according to the level of uric acid. The body height， weight， waist and hip circumference， blood pressure and other general indicators were measured. The venous blood samples were collected after fasting for 12 hours. The biochemical indicators such as serum uric acid， creatinine， glucose， total cholesterol and triacylglycerol， and the polymorphisms of URAT1 gene rs3825018， rs505802 and rs524023 loci were detected. Results The distribution of alleles and genotype frequencies of rs3825018， rs505802 and rs524023 in URAT1 gene were not significantly different between HUA group and control group （P > 0.05）. Genetic model analysis found that rs3825018， rs505802 and rs524023 were not significantly associated with Uyghur HUA in all three genetic models （95% CI across 1）， regardless of age or gender. The results of the interaction showed that there was a negative interaction between the Uygur females carrying the rs505802 locus mutation in the additive model （S = -0.146， P < 0.05）.? Conclusion The mutations of rs3825018， rs505802 and rs524023 in URAT1 gene may not affect the susceptibility of Uygur HUA. The risk of HUA may be reduced to some extent by carrying rs505802 mutation in Uygur women.

[Key words] Human urate transporter 1 gene; Single nucleotide polymorphism; Uyghur; Hyperuricemia

任何原因引起體內尿酸水平增高超過一定界限時即被定義為高尿酸血癥（HUA）[1]。其中，尿酸排泄障礙被認為是引起HUA的主要原因，而腎臟在尿酸排泄過程中起著至關重要的作用[2]。人尿酸鹽轉運子1（URAT1）基因由SLC22A12基因編碼，在腎臟近曲小管表達，在腎臟對尿酸的重吸收過程中發(fā)揮作用[3-4]。本研究擬探討URAT1基因3個位點多態(tài)性對HUA易感性的影響及其與一般生化指標間的交互作用，以期為維吾爾族HUA的防治提供新思路。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2014年11月～2016年12月在新疆烏魯木齊市某附屬醫(yī)院健康管理中心參加健康體檢的維吾爾族2340例作為研究對象。納入標準：①年齡20～70歲;②三代直系親屬均為維吾爾族。排除標準：①有惡性腫瘤、血液疾病、感染及自身免疫性疾病等;②近期服用降尿酸藥物。將尿酸水平男性> 417 μmol/L（7 mg/dL），女性>357 μmol/L（6 mg/dL）的研究對象納入HUA組，反之納入對照組[5]?；颊呔橥獠⒑炇鹬橥鈺?，本研究經醫(yī)學倫理委員會審批同意。

1.2 研究方法

1.2.1 資料收集? 記錄研究對象的一般信息及病史，并測量一般身體指標（身高、體重、腰臀圍、血壓）。抽取其禁食12 h后的外周靜脈血5 mL，充分抗凝后等量分裝成2份。取出其中一份，采用低速離心機，3500 r/h常溫離心3 min，分離血清，用日立7600全自動生化分析儀測定血清尿酸（SUA）、肌酐（Cr）、葡萄糖、總膽固醇（TC）和三酰甘油（TG）等生化指標;另一份凍存于-20℃冰箱，備用。定義①肥胖：體重指數（BMI）≥28 kg/m2，②高血壓：血壓≥140/90 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa），③高血糖：空腹血糖（GLU）≥6.1 mmol/L或已確診為糖尿病的患者，④高膽固醇血癥：總膽固醇≥5.18 mmol/L，⑤高甘油三酯血癥：三酰甘油≥1.70 mmol/L，⑥慢性腎臟?。耗I小球濾過率（eGFR）<60 mL/（min·1.73m2）。

1.2.2 基因多態(tài)性檢測? 采用全自動核酸提取儀，并按操作說明（磁珠法）提取全血DNA;采用瓊脂糖凝膠電泳法檢測所提取獲得地DNA的純度及濃度。查閱NCBI數據庫并結合Premier Primer 5.0軟件設計相應的引物（rs3825018：F（正向引物）：AAATTCAGCTTTCC-

CGGGAGGT，R（反向引物）：TACTCAAGGGGCCCA-

GAAGAGG;rs505802：F（正向引物）：GCCTAAGGGT-

GAGCCTGGAGAC，R（反向引物）：GGGCTCTGCACCT-TGAGTCATC;rs524023：F（正向引物）：GGGCTCTGC-AGGAGGCATAGAT，R（反向引物）：CTCTGTGTGGGC-TTGGGTCACT），使用多重基因點突變快速檢測技術對篩選出的URAT1基因三個SNP位點進行分型檢測。

1.3 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 20.0統(tǒng)計學軟件進行數據分析，符合正態(tài)分布計量資料采用均數±標準差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗;不符合正態(tài)分布的改用中位數（M）或四分位數間距（P25，P75）表示，兩組間比較采用非參數檢驗（秩和檢驗）。計數資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P < 0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 臨床指標比較

本研究共納入2340名維吾爾族作為研究對象，其中986例HUA患者為HUA組（男589例，女397例）和同期健康體檢者1354例為對照組（男794例，女560例）。兩組性別分布差異無統(tǒng)計學意義（χ2 = 0.28，P > 0.05）。兩組年齡、BMI、收縮壓（SBP）、舒張壓（DBP）、SUA、GLU、血尿素氮（BUN）、Cr、eGFR、TG和TC臨床測量指標比較，差異有高度統(tǒng)計學意義（P < 0.01）。

2.2 等位基因與基因型頻率分布

對照組URAT1基因rs3825018、rs505802和rs52-4023位點基因型頻率符合HWE平衡檢驗（χ2 = 0.08，P = 0.96;χ2 = 1.00，P = 0.61;χ2 = 0.57，P = 0.75）。統(tǒng)計分析發(fā)現，兩組間rs3825018、rs505802和rs524023位點等位基因及基因型頻率分布比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P > 0.05）。見表1。

2.3 遺傳模型中URAT1基因突變與HUA的關聯分析

無論是否調整年齡和性別，rs3825018、rs505802和rs524023三個多態(tài)性位點在三個遺傳模型（加性模型、顯性模型和隱性模型）中均與維吾爾族HUA無顯著相關性（95%CI跨越1）。

2.4 URAT1基因多態(tài)性與HUA的交互作用分析

選擇是否為HUA患者為因變量，進行多因素Logistic回歸。分析發(fā)現，年齡（OR = 1.01，95%CI：1.00～1.02）、高血壓（OR = 1.42，95%CI：1.15～1.76）、高甘油三酯血癥（OR = 1.27，95%CI：1.07～1.50）和高膽固醇血癥（OR = 1.24，95%CI：1.03～1.50）為維吾爾族HUA的危險因素。選取以上變量分別與URAT1基因三個位點進行交互作用分析，結果表明，維吾爾族女性攜帶rs505802位點突變在相加模型中存在負交互作用（S = -0.146，P < 0.05），會在一定程度上降低發(fā)生HUA的風險。

3 討論

近年來，隨著經濟的飛速發(fā)展，人們生活方式發(fā)生改變，HUA的患病率呈逐年上升趨勢，流行病學調查資料顯示，我國HUA的患病率在8.4%～25.0%[6-7]。本課題組[8-9]前期調查新疆維吾爾族HUA的患病率時發(fā)現，新疆維吾爾族HUA的患病率約為8%。眾多研究[10-15]表明，無癥狀HUA和肥胖、高血壓、糖尿病、冠狀動脈粥樣硬化等代謝性疾病及心腦血管疾病間互為因果，且是痛風發(fā)生發(fā)展的前提條件。本研究結果顯示，HUA組BMI、SBP、DBP、SUA、GLU、BUN、Cr、eGFR、TG和TC等一般生化指標的水平顯著高于對照組，差異有高度統(tǒng)計學意義（P < 0.01），與大多數研究[8-9]結果相同。

尿酸在體內的代謝要依次經歷腎臟對其的濾過及重吸收。有研究表明，URAT1基因在腎臟調控尿酸的重吸收過程中發(fā)揮作用，其被譽為高特異性、電中性的尿酸鹽及陰離子交換器[16]。URAT1基因位于染色體11q13，含有10個外顯子、9個內含子及12個跨膜結構域，全長2642 bp，編碼區(qū)總長1659 bp，可編碼555個氨基酸的蛋白質，是一種膜轉運蛋白。其包含2種剪切體-剪切體a（含有553個氨基酸）和剪切體b（含有332個氨基酸），相對于a而言，剪切體b缺失了221個氨基酸，推測這種特殊結構可能影響腎小管對尿酸的重吸收[17]。已有研究表明[18]，URAT1基因rs7929627、rs75786299、rs3825017、rs11602903和rs121907892位點多態(tài)性與機體內的尿酸水平密切相關。

本研究結果提示，URAT1基因三個所選位點等位基因及基因型頻率在兩組間分布差異均無統(tǒng)計學意義（P > 0.05），同時，在三個遺傳模型中也均與維吾爾族HUA無顯著相關性（95%CI跨越1），與韓琳等[19]2012年的研究結果相悖。究其原因，可能與本研究所選URAT1基因三個位點均存在于內含子區(qū)，突變不能有效導致功能改變相關。但本研究經交互作用分析發(fā)現，維吾爾族女性攜帶rs505802位點突變在相加模型中存在負交互作用（S = -0.146，P < 0.05），提示URAT1基因rs505802位點突變可能會在一定程度上降低維吾爾族女性發(fā)生HUA的風險。本研究所選URAT1基因三個多態(tài)性位點目前的研究尚少，因此，此結論還需進一步驗證。

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（收稿日期：2018-05-22? 本文編輯：王? ?蕾）