亞甲基四氫葉酸還原酶基因多態性與妊娠期高血壓疾病的關系研究

姚小鳳 徐少勇 張曉萍 薛潔好

廣東省清遠市婦幼保健院產科，廣東清遠 511500

妊娠期高血壓是妊娠期特有的疾病，近年來發病率正在逐年上升，嚴重危害了母嬰健康。患者在妊娠20周會出現高血壓、水腫等情況，輕者無明顯癥狀，可能出現血壓輕度的升高，伴隨水腫；嚴重的患者會出現頭痛，且惡心嘔吐，血壓明顯升高，蛋白尿增多[1]。可根據患者的病史、臨床表現等輔助檢查做出診斷，治療上需要保證患者足夠的休息狀態，密切觀察患者的生命體征，保證足夠的營養支持[2]。根據患者的情況適當采取降壓措施，必要可進行鎮靜處理，對于宮頸條件成熟的患者進行引產或剖宮產處理。目前就改疾病的病因尚未明確，但隨著生物技術的不斷發展，大量的研究表明，同型半胱氨酸與患者之間有一定的關系[3]。本文通過選取2016年7月～2017年7月妊娠期高血壓與同期無妊娠期高血壓患者，相互進行對比，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2016年7月～2017年7月收治于我院的無妊娠期高血壓患者64例為對照組，選擇同期妊娠期高血壓的患者54例為研究組。其中（1）研究組患者均經過臨床專業醫師與常規檢查；（2）兩組患者均無其他疾病影響術后預后；（3）無嚴重心血管疾病及肢體功能障礙患者；（4）病情穩定，意識清楚；（5）愿意參與本研究，簽署知情同意書。排除標準：（1）合并有嚴重肝腎疾病及精神疾病患者；（2）晚期乳腺癌及其他惡性腫瘤者；（3）溝通障礙、文盲、不愿配合者；（4）臨床資料不全者。對照組患者年齡19～35歲，平均（25.9±4.5）歲；孕周35～38周，平均（37.5±1.5）周；患者文化程度：小學文化12例，初中文化25例，高中及以上文化27例；研究組患者年齡20～34歲，平均（26.4±5.1）歲；孕周為35～38周，平均孕周（37.1±1.2）周；患者文化程度：小學文化9例，初中文化21例，高中及以上文化24例。本研究實施前已獲得醫學倫理委員會批準。兩組患者在年齡以文化水平等方面資料對比上，差異均無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

表1 兩組患者MTHFR基因C667T多態性比較[n（%）]

表2 兩組MTHFR基因與A1298C多態性比較[n（%）]

1.2 方法

兩組患者入院后均抽取空腹12h的外周靜脈血10mL，分別置于兩個試管中，并標明1號試管與2號試管。其中1號試管采用乙二胺四乙酸二鈉抗凝后，使用過注法對基因組DNA進行提取，而2號試管通過EDTA抗凝，充分搖勻后，3000r/min離心10min，將上層清液取出，放置于-80℃的超低溫冰箱中保存。使用熒光定量PCR技術，檢測MTHFR、C677T、A1298C的基因多態性。反應條件：95℃預變性 10min，60℃延伸 1min，92℃變性 15s，20個循環；60℃延伸 90s，89℃變性15s，30個循環。反應完成后讀取樣品孔中的終點熒光，使用軟件分析確定所有樣本的基因分型結果。

1.3 觀察指標

觀察兩組患者MTHFR基因C667T多態性；MTHFR基因與A1298C多態性。

1.4 統計學處理

采用SPSS18.0統計軟件，計量資料用（）表示，采用t檢驗，計數資料用百分比表示，采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者MTHFR基因C667T多態性比較

兩組患者在MTHFR基因頻率TT型、等位基因頻率C*、T#上差異無統計學意義（P＞0.05），但MTHFR基因頻率上CC型、CT型的明顯高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

2.2 兩組MTHFR基因與A1298C 多態性比較

兩組患者在MTHFR基因頻率的AA型、AC型、CC型、等位基因頻率A、C上差異無統計學意義（P＞ 0.05），見表 2。

3 討論

妊娠期高血壓作為臨床上發病較高的疾病之一，嚴重威脅了母嬰健康。目前關于該疾病的發病機制尚無明確的研究，給妊娠期高血壓的治療帶來了一定的困難[4]。目前雖然有較多的研究指出該病的發病問題，但尚無明確的解釋[5]。隨著分子生物技術的不斷發展，需要及時預測高血壓疾病的風險[6]。

妊娠期高血壓在臨床會出現產后出血且感染，合并其他心臟病等慢性疾病，均會對孕產婦造成死亡。有研究指出[7]，妊娠期高血壓發病會伴隨不同程度的同型半胱氨酸水平升高，能夠通過誘導細胞快速進入細胞分裂期達到繁殖的作用，促進并激活血小板聚集，進而對血管內皮造成一定傷害，導致患者抵抗高血壓等疾病能力下降[8]。臨床上妊娠期高血壓多在患者妊娠20周后發病，在生產后絕大部分患者的體征與癥狀均會消失，血液能夠恢復正常[9]。主要是由于母體相關代謝的變化，導致母體的血壓升高，但隨著胎兒的分娩，能夠使得相應的異常蛋白被母體分解，導致血壓不斷的下降[10]。本文通過選取同期妊娠期高血壓患者與妊娠期高血壓，兩組患者在MTHFR基因頻率TT型、等位基因頻率C*、T#上差異無統計學意義（P＞0.05），但MTHFR基因頻率上CC型、CT型的明顯高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），兩組患者在MTHFR基因頻率的AA型、AC型、CC型、等位基因頻率A、C上差異無統計學意義（P＞0.05）。因此可推測妊娠期高血壓疾病的發病與MTHFR基因多態性有有一定的關系，其中C667T點能夠作為臨床上較為常見的突變[11]。妊娠期高血壓作為突發性的高血壓綜合征，在晚期患者會出現腦蛋白與浮腫的情況，甚至導致母嬰出現死亡的情況[12]。且本文結果能夠說明MTHFR基因是導致妊娠期高血壓的重要因素，不同的位置會有一定的特異性，但不一定能夠引起疾病的出現。在臨床基因的研究中，隨著同型半胱氨酸的升高，會導致內皮細胞損傷，引起內皮功能出現紊亂[13]。在本次的研究結果中，能夠發現C667T多態性屬于妊娠期高血壓的危險指標，能夠將其作為診斷預后的標準，臨床中可通過該指標判斷發病的風險，及時采取有效的措施[14]。并在后期的治療中，將其作為治療是否有效的標準之一。隨著胎兒的長大，因基因異常所產生的異常蛋白的增加作用于母體，使之血壓升高，而隨著胎兒的分娩，胎盤的排出，胎兒異常基因所致的異常蛋白逐漸被母體分解代謝，母體血壓也隨之下降，胎兒基因的異常表達可能是產生妊娠期高血壓疾病的原因之一。因此，我們認為可以把胎兒基因作為一項重要的妊娠期高血壓疾病的預測，檢測父母雙方的基因型，或者通過妊娠早期的遺傳學檢測，確定胎兒的基因型，對可能發生的情況，從而進行早期預防[15]。

綜上所述，通過對懷疑有妊娠期高血壓的患者實施MTHFR基因C677T判斷，作為預后評價的重要標準，臨床診斷檢測工作得到有效的提升，對改善母嬰健康有重要的意義。