術瑞吉對預防術后腹腔粘連的效果觀察

王久成,于世明,喬茂強,范宏剛

(東北農業大學動物醫學學院,黑龍江 哈爾濱 150030)

隨著人們生活需求的改變,越來越多的伴侶動物走進了人們的生活,伴侶動物的診療行業也得到了快速的發展,但是在伴侶動物手術過程中快速有效止血和防止術后粘連一直都是急需解決的問題,特別是沒有明顯出血點的大面積組織廣泛的滲血和腹腔術后導致的腹腔粘連。市面上常見的止血材料和防粘連材料包括沸石、殼聚糖、膠原蛋白和纖維素基等,都是應用于人。大多數只有單一的止血功能或者防粘連功能,而且價格昂貴,有些材料在止血的同時還導致粘連的發生。到目前為止,應用于伴侶動物的止血材料的相關報道少之又少,此方面仍處于空白階段。術瑞吉生物流體膜是由羧甲基纖維素鈉和海藻酸鈉組成的天然復合材料,解決了使用單一材料時的不足。適用于組織的廣泛滲血,同時起到預防粘連的作用。本研究建立腸粘連模型[1]。將術瑞吉生物流體膜應用于該模型,并與其他材料作對比,驗證其止血、預防粘連的效果。為其在伴侶動物的臨床應用中提供試驗依據。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 健康實驗犬30只,雌雄各半,年齡12～14月齡,體重5.5±0.5 kg,由哈爾濱市青喜養殖場提供,檢疫合格符合實驗動物要求,均無凝血異常,在相同環境下飼養2周無異常情況進行試驗。

1.2 設備、藥品和試劑 Datex呼吸監護儀S/5、TGL-16B普通離心機、DK-S22恒溫水浴鍋、Matrx小動物專用吸入麻醉機等。

異氟烷(深圳市瑞沃德生命科技有限公司,批號20170201)；丙泊酚注射液(四川國瑞藥業有限責任公司,批號20170524)；術瑞吉生物流體膜(哈爾濱礎潤醫療器械有限責任公司)；Seprafilm(美國強生(Johnson&Johnson)公司,批號20170415)；強脯氨酸試劑盒(南京建成生物工程研究所；批號20171008)等。

1.3 方法

1.3.1 術瑞吉預防犬腹腔粘連試驗 將12只實驗犬隨機分成3組,每組4只。A組為空白組,B組為Seprafilm組,C組為術瑞吉組。

參照Ellis法制備腸粘連模型[2],于犬腹中線臍部開始做一3 cm切口打開腹腔,創口周圍干紗布隔離,牽拉出盲腸置于紗布上5 min,使盲腸漿膜干燥,用干紗布摩擦盲腸漿膜層,使漿膜層破損,形成點狀出血面,創面約1 cm寬、2 cm長。A組紗布按壓,直至沒有滲血為止。B組將Seprafilm放置于盲腸創面。C組涂抹術瑞吉生物流體膜,直至沒有滲血為止。術后關閉腹腔。

1.3.2 粘連程度評定分級 于術后7 d,將各組犬麻醉后進行剖腹探查,記錄腹腔粘連情況,參照胡建敏分級方法,進行粘連評分[3],如表1。并取粘連部位組織,用于病理組織學檢測和羥脯氨酸測定。

表1 腹腔粘連分級標準

1.3.3 組織病理學觀察 取腸管創面組織,進行病理切片制作和觀察。

1.3.4 組織羥脯氨酸測定 取腸管創面組織,進行羥脯氨酸測定。

1.4 統計學處理 應用SPSS18.0軟件進行統計學分析,數據以均數±標準差(ˉx±SD)表示,采用單因素方差分析以及 Post Hoc Tests多重比較檢驗LSD和S-N-K法,P＜0.05為差異顯著。

2 結果

2.1 術后第7天粘連程度分級 由表2和中插彩版圖1可知,各組均有粘連發生,但無梗阻、腸擴張。A組粘連嚴重,均與腸管、腸系膜粘連,其中1例與胰腺粘連。C組和B組腸管漿膜創傷恢復良好,痕跡不明顯,只有部分犬腸管與大網膜少量粘連,未與其他臟器粘連。C組和B組粘連評分均低于A組,具有顯著性差異(P＜0.05)。

圖1 各組粘連情況

表2 術后各組腹腔粘連分級結果 (n=4)

2.2 粘連組織病理組織學觀察 各組腸壁粘連組織切片如中插彩版圖2,A組盲腸漿膜層與粘連組織連接緊密,有大量的膠原纖維,粘連組織中新生毛細血管明顯增多。C組和B組盲腸漿膜層增厚,膠原纖維較少,有少量的新生毛細血管。

圖2 腸壁粘連組織H.E.染色 (×200)

2.3 腸粘連創面組織Hyp水平 由表3可知,手術后第7天取創面粘連組織(未粘連者取創面組織)測定Hyp含量,結果發現B組和C組的腸壁Hyp含量明顯低于A組腸壁Hyp含量,有顯著性差異(P＜0.05)。

表3 腸粘連組織Hyp結果 (n=4)

3 討論

目前國內外研究的纖維蛋白膠、多孔沸石、醫用膠等都不適用于這種沒有明顯出血點的彌漫性滲血,而且有些醫用敷料使用后還會導致粘連的發生[4]。空腔臟器損傷或者手術時同樣會出現沒有明顯出血點的彌漫性滲血,且其術后創面炎癥反應、纖維蛋白的滲出,常常導致腹腔粘連。Pados G等人在相關研究中報道,90%的開腹手術會導致腹腔粘連,外科手術后,93% ～97%的患者發生腹腔粘連,腹腔粘連形成后可能不會表現出臨床癥狀,但是仍有很大一部分會繼發腸梗阻、慢性腹腔疼痛等。

本試驗采用的術瑞吉生物流體膜是一種天然復合植物材料。由羧甲基纖維素鈉和海藻酸鈉組成的等滲液體；羧甲基纖維素鈉和海藻酸鈉均可粘附在創面,避免創面與其他組織接觸發生粘連；同時其降解產物可以抑制炎性反應,保護肉芽組織,促進傷口愈合[5-6]。羧甲基纖維素具有良好的水溶性,溶于水后形成的溶膠具有一定黏度(與海藻酸鈉混合使用時,彌補了海藻酸鈉粘附力不足的情況),可加速血液凝固[7]。吳立各等人在實驗研究中發現,羧甲基纖維素可以明顯減輕腹腔術后的粘連程度,8 d后可被降解吸收[8]。同時纖維素類對血小板和血紅蛋白等有良好的吸附作用,有利于形成血栓,促進止血[9]。另外,纖維素基類的止血材料溶解后可以釋放出負離子,激活凝血系統從而加快止血[10]。同時,流體膜可以維持傷口周圍的濕潤環境,促進創面愈合,抑制炎癥反應,減少后期瘢痕的形成,并與周圍組織隔離,減少粘連的發生。

術后粘連的形成是腹腔手術中最常見的并發癥之一,粘連可以看成體內瘢痕的形成,組織在受損后需要進行修復和重塑。當手術或感染引起腹膜或腹腔漿膜損傷時,創面會發生炎癥反應,分泌多種生物活性物質。創面的機械損傷、腹膜炎癥、血凝塊的形成等,都會引起炎性反應和纖維漿液滲出,同時激活凝血系統,導致纖維蛋白沉積并凝固,而術后纖溶系統失衡,不能及時溶解纖維蛋白,就形成永久性粘連。

本試驗參考Ellis法制作犬腸粘連模型,該方法具有操作簡單、造模成功率高、對組織損傷小等優點。本試驗粘連分級結果表明,A組均與腸管或胰腺發生粘連,B組和C組部分與大網膜或腸系膜粘連,粘連較輕。證明術瑞吉生物流體膜具有一定的防粘連作用。通過對病理切片分析結果表明：A組纖維組織增生明顯,新生毛細血管豐富,有明顯的粘連帶。B組和C組盲腸漿膜層增厚,新生血管較少,未出現粘連帶,創面有纖維增生。說明術瑞吉生物流體膜沒有影響創面自身的愈合過程,有一定的防粘連作用。通過對創面組織Hyp含量分析結果表明：C組Hyp含量明顯低于A組但高于B組,與粘連評分結果和組織切片結果相符。試驗結果與lvarsson M L.等人的研究結果相吻合[11]。再次證明術瑞吉具有預防粘連的作用。因此,該試驗證明了術瑞吉生物流體膜在犬腸粘連模型術后具有一定的防粘連作用。