鉤狀石斛莖、葉低極性成分GC-MS對比分析

楊 丹 莫 緒 蔣南洋 程忠泉

桂林師范高等專科學校化學與藥學系，廣西 桂林 541199

石斛屬(Dendrobium)植物具有抗腫瘤、抗衰老、增強人體免疫力和擴張血管等作用，含有生物堿、菲類、聯芐類、倍半萜類、香豆素、多糖、甾體及揮發油等多種成分[1-3]。鉤狀石斛(Dendrobiumaduncum)分布于廣西、湖南、廣東、海南、貴州、云南等地，生于海拔 700～1 000 m山地林樹干上，具有滋陰、清熱、益胃、生津等功效，主治口干煩渴、熱病傷津、食欲不振、病后虛熱等[4]，含羥基反式肉桂酸三十烷基酯、aduncin、dengibsinin、dengibsin、4-羥基-3-甲氧基苯甲酸等化合物[5]。為進一步研究鉤狀石斛化學成分，筆者對采于廣西百色的該植物莖、葉的低極性成分進行了氣質聯用對比分析。現報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料 鉤狀石斛于2016年9月采自廣西百色，經黃圣卓博土鑒定為蘭科石斛屬植物鉤狀石斛(DendrobiumaduncumLindl)。植物樣本存放于桂林師范高等專科學校化學與藥學系博士科研室。18 kg新鮮樣品經自然晾干，分離莖(2.5 kg)、葉(1.5 kg)后，粉碎留樣。

1.2 方法

1.2.1 色譜條件 氣相色譜-質譜聯用(安捷倫7890 A-5975 C)，毛細管柱HP-5MS (30 m × 0.32 mm × 0.25 μm)，進樣口250 ℃，不分流進樣。離子源：230 ℃，升溫程序：50 ℃保持2 min；15S℃/min升至140 ℃，保持4 min；15 ℃/min升至300 ℃，保持18 min。質譜條件:EI源，電離電壓70 eV，離子源溫度200 ℃，掃描范圍20 ～ 500 amu，質譜庫NIST27和NIST147。

1.2.2 樣品前處理方法 取鉤狀石斛莖(葉)粉碎后樣品各100 g，95 %乙醇提取3 h，提取液濃縮回收溶劑，浸膏懸浮于水，乙醚萃取兩次，每次30 mL，乙醚層用無水碳酸鈉干燥，濃縮得浸膏用1 mL正己烷溶解，溶液經0.45 μm微孔濾膜過濾作為樣品供試液。

1.2.3 樣品定性、定量分析方法 對得到的總離子流圖中各峰進行質譜掃描，得到相應各峰質譜圖，與Nist 27、Nist 147數據庫標準物質質譜圖進行對比分析，確認鉤狀石斛莖、葉各低極性成分，用峰面積歸一化法計算出各組分相對百分含量。

2 結果與討論

鉤狀石斛莖中低極性成分GC-MS分析，檢出的各成分與Nist 27、Nist 147數據庫標準物質質譜圖進行對比分析，鑒定了34個化合物，總含量占總檢出峰的98.73 %(總離子流圖如圖1所示，化學成分見表1)。其中飽和脂肪烴6種，含量總計9.86 %，含量較多的有十八烷(3.21 %)、二十烷(2.44 %)；羧酸及脂18種，含量總計75.81 %，含量較多的有十五烷酸(6.95 %)、棕櫚酸(21.3 %)、棕櫚酸乙酯(6.91 %)、(Z，Z)-亞油酸(7.63 %)、2-十八碳二烯酸乙酯(6.74 %)、棕櫚酸-2-羥基-1-(羥甲基)乙酯(4.36 %)；另外含芳香烴類(4.74 %)、甾醇類(6.26 %)。

表1 鉤狀石斛莖、葉低極性化學成分對比

序號 鉤狀石斛莖 鉤狀石斛葉 保留時間/min化合物名稱相對含量/%保留時間/min化合物名稱相對含量/%13.499 52-己酮1.522 33.492-己酮1.102 9213.122 63',5'-二甲氧基苯乙酮1.112 75.212-酮-八甲基-環四硅氧烷0.559 5313.535 4十五烷0.651 95.77十氫-4,8,8-三甲基-9-亞甲基-[1S-(1α,3β,4α,8aβ)] -1,4-氫呋喃-2-酮1.393 1414.498 7月桂酸0.725 56.1242,6-二(1,1-二甲基乙基)-2,5-環己二烯-1,4-二酮0.978 6514.980 3十六烷0.971 812.0024,4,5,7,8-五甲基-二氫香豆素2.188 9616.110 7十七烷1.01513.113二十烷0.711 2716.376 1肉豆蔻酸甲酯1.429 513.319十二烷基三甲基溴化銨1.849 9816.759 5肉豆蔻酸1.796 413.5362,4-二(1,1-二甲基乙基)苯酚0.540 7917.054 3十八烷4.042 613.624二叔丁基對甲酚7.519 81017.467 22-甲氧基-4-乙烯基苯酚2.861 613.7911-甲基-2 - 1 - [(2-丙烯氧基)乙氧基]-異丙醇0.458 41117.673 6十五烷酸6.953 713.881 -(2 -(2 -甲氧基- 1 -甲基乙氧基)-1-甲基乙氧基-2 -丙醇1.029 3

續表1

表1 鉤狀石斛莖、葉低極性化學成分對比

鉤狀石斛葉中低極性成分鑒定46個化合物，總含量占總檢出峰的89.14 %(總離子流圖如圖2所示，化學成分見表1)，已鑒定的成分中，烷烴及其酸酯類18種，含量共計(36.67 %)，含量較多的有棕櫚酸(13.22 %)、棕櫚酸甲酯(3.41 %)、硬脂酸(4.2 %)；芳香烴類共計7種，含量總計16.98 %，含量較多的是二叔丁基對甲酚(7.52 %)；甾醇類4種(6.93 %)。

3 小結

通過對鉤狀石斛莖、葉中低極性成分的GC-MS對比分析，發現鉤狀石斛莖、葉中有15種相同的成分，分別為2-己酮、十六烷、十七烷、肉豆蔻酸甲酯、肉豆蔻酸、十八烷、2-甲氧基-4-乙烯基苯酚、十五烷酸、棕櫚酸、棕櫚酸乙酯、十七酸、葉綠醇、二十烷、豆甾醇、γ-谷甾醇。15種相同成分分別占莖、葉總檢出峰數的44.12%、27.78%，相對百分含量分別占莖、葉的58.33 %、33.51 %。

石斛屬植物是著名常用中藥，國內外進行了大量的研究與開發，市場需要量也越來越大，導致石斛屬植物野生資源日漸枯竭，如鐵皮石斛等名貴品種已成為日益稀少的瀕危植物。通過對鉤狀石斛莖、葉中低極性部分GC-MS對比分析，以期提高整株植物的藥用價值和經濟效益，對充分利用石斛屬植物資源提供理論依據。