文│高衛東 姜明 沈德勝(浙江省平湖市畜牧獸醫局)
犬傳染性出血性腸炎,是由犬細小病毒引起的常見病,對犬類養殖影響巨大。筆者在2018年1月~12月期間,收集浙江省平湖市2家寵物診所來就診的,155條有犬傳染性出血性腸炎癥狀的犬的樣本。經犬細小病毒抗原快速檢測試紙診斷,確診為犬傳染性出血性腸炎的126病犬,采用犬細小病毒單克隆抗體進行治療,效果較好。
1.流行病學調查。在這155條犬中有藏獒、貴賓犬、可卡犬、博美犬、金毛犬、京吧犬、比熊犬、西施犬、德國牧羊犬、薩摩犬、蘇格蘭牧羊犬、泰迪犬及某些雜交犬。來就診的病犬大小不一,2~4月齡的幼犬為主。因為較小,大多犬沒有免疫,僅22例完全免疫。來就診的犬的癥狀多樣,見表1。

表1 155例病犬癥狀情況統計
2.臨床檢查。主要檢查病犬是否有體溫升高、食欲下降、嘔吐、腹瀉、血便,精神狀態異常,糞便和嘔吐物的顏色、性狀、氣味異常,呼吸頻率、呼吸音、皮膚彈性、可視黏膜色澤異常等。

臨床檢查中發現病犬會出現食欲廢絕和嘔吐,一周后排黃白色或灰白色稀糞,嚴重者(2~3天)呈噴射狀向外排出,逐漸變成惡臭的番茄汁樣或醬油樣的腥臭味糞便。繼而全身癥狀迅速惡化(嚴重呈昏迷狀態),口下垂。病初胃腸蠕動音升高,當有血便時胃腸蠕動音消失。病初心跳明顯加快160~200次/分鐘,即可疑似犬傳染性出血性腸炎。
3.實驗室檢查。根據流行病學調查和臨床檢查的結果來進行實驗室檢查。對懷疑病犬,采用犬細小病毒抗原快速檢測試紙化驗,確診該病。方法是用已沾濕生理鹽水的棉簽收集犬眼分泌物、鼻涕、唾液或血液,將棉簽浸入反應緩沖液中,使樣品與緩沖液充分混勻,取2~3滴上清液,滴入檢測樣品孔中,水平放置10分鐘后判斷結果。陰性結果在結果窗中只出現一根條帶;陽性結果在結果窗中出現兩根條帶(“T”和“C”),無論哪條先出現都表明陽性結果;如果在反應開始后紫色條帶看不見,結果可被認為是無效結果。
從表2可以看出,使用犬細小病毒抗原快速檢測試紙檢測的155條犬,其中126例為陽性,27例為陰性,2例為無效結果。但在檢測過程中有出現假陽性者和假陰性者,假陽性為8例,假陰性為2例。
診斷正確率=[檢測犬數-(假陽性數+假陰性數+無效結果數)]/檢測犬數=[155-(8+2+2)]/155=92.26%
1.特異性療法。在犬發病的早、中期,給病犬頸側部皮下注射犬細小病毒單克隆抗體,0.40毫升/千克體重,2次/天,視病情好轉情況連注2~5天。一般第1天、第2天用CPV單抗加血清,第3天、第4天用血清加犬白細胞干擾素, 第5天、第6天繼續用干擾素或免疫球蛋白,隨后停藥觀察、回訪。
2.對癥治療。采用止吐止血,抗菌消炎,防治脫水,糾正酸中毒的治療原則。止吐:使用愛茂兒。止血:使用止血敏??咕祝菏褂冒逼S青霉素粉針劑。防治脫水,糾正酸中毒:口服補液鹽(NaCl3.5克,NaHCO32.5克,KCl1.5克,葡萄糖20克,加水至100毫升)深部灌腸或任其自飲。抗病毒:使用利巴韋林。防治休克:危重病例為了改善微循環使用地塞米松。

表2 155例病犬傳染性出血性腸炎的實驗室檢查結果
3.加強護理。改善飼養管理條件,把病犬隔離安置于干燥通風和安靜的環境中,減少應激因素的干擾,讓其充分休息。同時給予混有適量食鹽、葡萄糖、復合維生素B、維生素C的清潔飲水,讓病犬自由飲服,連用5天。在病犬的恢復期,為了調整胃腸功能,恢復食欲,可適當內服維生素C片、維生素B片、復合維生素B片及乳酸素菌片等,每日2~3次,連喂4天。當病犬有食欲時,給予一些稀軟食物,嚴防過食或給難消化食物,做到少食多餐,防止再度引起消化道損傷。

表3 126例病犬的治療結果
1.病犬的治療結果。126例傳染性出血性腸炎犬的治療結果見表3。
從表3可以看出,使用細小病毒單克隆抗體治療病犬治愈率高,達91.27%。
2.不同病程的病犬治療情況。
不同病程的病犬治療情況見表4。
從表4可以看出,早期病犬使用細小病毒單克隆抗體效果較好。隨病程延長,治愈率逐漸下降。
3.治愈犬注射細小病毒單克隆抗體后的康復時間。126例治愈犬注射細小病毒單克隆抗體后的康復時間見表5。
從表5可以看出,注射細小病毒單克隆抗體后,88.10%的治愈犬在注射細小病毒單克隆抗體4天內完全康復,說明經細小病毒單克隆抗體治療后,病犬療程較短。
筆者分析認為,2~8月齡,未接種疫苗的犬更易發生該病。嚴重的嘔吐,劇烈的腹瀉和迅速的脫水是該病的特征性癥狀。所以根據這155例病犬的流行病學調查和臨床癥狀檢查的結果,我們能夠迅速排除非該病的病例。然后再對余下的病例進行實驗室確診。
本次實驗室診斷我們用犬細小病毒快速檢測試紙進行診斷,診斷正確率高為92.26%。此處診斷正確率較高,因為犬細小病毒快速檢測試紙采用的是膠體金免疫檢測技術。免疫膠體金標記技術是應用于抗原抗體反應中的一種新型免疫標記技術。吸附機理是膠體金顆粒表面的負電荷與蛋白質的正電荷基團靜電吸附而形成牢固結合。因而可以與犬細小病毒抗原非共價結合,形成標記物。當這些標記物在相應的配體處大量聚集時,肉眼可見紅色或粉紅色斑點。在犬細小病毒快速檢測試紙的測試線(T線)處綁定了特異性的犬細小病毒抗體用來捕捉和檢測該抗原。這些能使犬細小病毒抗原快速檢測試紙以高準確度地識別犬細小病毒抗原。

表4 不同病程的病犬治療情況

表5 126例治愈犬注射細小病毒單克隆抗體后的康復時間
但在檢測過程中也有出現假陽性、假陰性和無效結果。假陽性是指病犬實際沒患該病,但用檢測試紙診斷時出現的是陽性結果;假陰性是指病犬實際患該病,但用檢測試紙診斷時出現的是陰性結果。
筆者分析認為,出現假陽性的原因:第一,可能由接種的減毒疫苗誘導所致(疫苗毒株在接種5~12天后能夠產生假陽性結果);第二,可能隱性感染引起,即帶毒但不出現臨床癥狀,出現假陰性和無效結果的原因是試紙存放時間太長(1年以上)或是試紙保管不恰當(例如受潮),且未注意存放在正常室溫條件下(例如冷藏)。
綜上所述,由于犬細小病毒快速檢測試紙應用的是免疫膠體金標記技術,所以用犬細小病毒快速檢測試紙診斷犬傳染性出血性腸炎準確、快速。
本次試驗的治愈率高為91.27%。由于注射犬細小病毒單克隆抗體來治療該病是特異性療法,其針對性強,所以治愈率高。細小病毒單克隆抗體能夠治療該病,主要是由于細小病毒單克隆抗體,可通過抑制病毒對宿主細胞的吸附或復制過程而中和病毒,同時補體可促進細小病毒單克隆抗體對病毒的中和作用,被中和的CPV與抗體形成抗原抗體復合物,可起到促進機體主動免疫的作用,從而達到治愈病犬的目的。
通過對癥治療可控制病情進一步發展惡化,防止繼發感染。通過加強護理,可減少消耗,保持體力,提高抗病力,有助于促進病犬康復。
綜上所述,由于注射犬細小病毒單克隆抗體能夠中和犬細小病毒抗原,提高機體主動免疫能力,所以其療效顯著。