楊雯雯, 魏 巍, 張 麗
(新疆醫科大學第二附屬醫院, 烏魯木齊 830063)
糖尿病是一組由多種病因引起的慢性高血糖為特征的代謝性疾病,是由于胰島素分泌和(或)作用缺陷引起。2017年國際糖尿病聯盟報告全球共有約4.25億例糖尿病患者,我國20~79歲人群中約有1.14億例糖尿病患者,位居世界第一[1]。糖尿病可累及全身各重要器官,其病死率逐年增加。糖尿病是由遺傳和環境因素的復合病因引起的臨床綜合征,但目前其病因和發病機制仍未完全闡明[2]。
細胞自噬是真核細胞內高度保守的周轉過程,近年來越來越多的研究闡述了細胞自噬參與了糖尿病及其并發癥的發生與發展[2-4]。自噬基因微管相關蛋白輕鏈3(LC3)是自噬的標志物,同Beclin-1、自噬相關蛋白7(Atg7)和P62一起參與了細胞自噬的過程。本文研究旨在通過動物實驗分析細胞自噬與糖尿病發生、發展的相關機制。
1.1 實驗動物及分組將6只無特定病原體(specific pathogen free,SPF)級雄性SD大鼠[6周,體質量(200±20.8) g]適應性喂養3 d,隨機分為正常組和模型組(隨機方法:采用隨機數字表,將6只大鼠從左至右排列,左起第1只大鼠對應隨機數字表第1個數字,以此類推;再將得到的6個數字從大到小排列,前3個數字對應的大鼠為正常組,后3個數字對應的大鼠為模型組)。
1.2 主要儀器及試劑
1.2.1 儀器 電泳儀(BIO-RAD公司,型號mini protean 3 cell),電轉儀(大連競邁科技有限公司,型號PS-9),酶標儀(賽默飛世爾科技有限公司,型號MK3),移液器(賽默飛世爾科技有限公司),水浴鍋(萊卡公司,型號HI1210),一體式化學發光成像儀(上海勤翔科學儀器有限公司,型號5300 Pro),所需儀器設備:冷凍切片機(萊卡公司,型號CM3050S);……