妊娠期高血壓患者內脂素、網膜素在胎盤組織中的表達及意義

黃蓉 王桃桃 祁文瑾

摘要：目的? 探討內脂素和網膜素在HDCP患者胎盤的表達情況及胎盤異質性對其表達的影響。方法? 以昆明醫科大學第一附屬醫院2015年7月～2016年7月產科住院分娩的53例合并妊娠期高血壓HDCP產婦作為研究對象，根據病情輕重分為GH組、MPE組、SPE組，統稱HDCP組，另選正常妊娠晚期婦女53例為對照組。采用酶聯免疫吸附法（ELISA）檢測兩組不同部位、不同層次胎盤組織中內脂素、網膜素含量并進行比較。結果? ①HDCP組胎盤組織中表達的內脂素（177.79±156.43）pg/ml高于對照組（116.89±99.63）pg/ml，統計學意義顯著（P<0.01）。②對照組和GH組胎盤網膜素水平分別為（393.69±223.35）ng/L、（389.55±272.14）ng/L，高于MPE組（323.58±180.33）ng/L及SPE組（242.91±202.64）ng/L， MPE組胎盤網膜素水平（323.58±180.33）ng/L高于SPE組（242.91±202.64）ng/L，差異均有統計學意義（P<0.05）。③胎盤組織中內脂素和網膜素的表達無相關關系。結論? HDCP患者胎盤組織中內脂素表達水平顯著升高而網膜素表達水平顯著降低，其可能與HDCP發生、發展相關;胎盤異質性對內脂素和網膜素的表達存在影響。

關鍵詞：妊娠期高血壓疾病;胎盤;內脂素;網膜素

中圖分類號：R714.2? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻標識碼：A? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2019.06.024

文章編號：1006-1959（2019）06-0075-04

Abstract：Objective? To investigate the expression of visfatin and retinal in placenta of HDCP patients and the effect of placental heterogeneity on its expression. Methods? From the first affiliated hospital of Kunming Medical University， from July 2015 to July 2016， 53 patients with gestational hypertension with HDCP were enrolled in the study. According to the severity of the disease， they were divided into GH group， MPE group and SPE group.Collectively referred to as the HDCP group， 53 women with normal late pregnancy were selected as the control group. Enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） was used to detect and compare visfatin and retinal content in placenta of different sites and different levels. Results? ①The visfatin （177.79±156.43） pg/ml expressed in the placenta of HDCP group was higher than that of the control group （116.89±99.63） pg/ml， which was statistically significant （P<0.01）. ②The levels of placental reticulum in the control group and GH group were （393.69±223.35） ng/L， （389.55±272.14） ng/L， higher than the MPE group （323.58±180.33） ng/L and the SPE group （242.91±202.64）ng/L，The level of placental reticulum in the MPE group （323.58±180.33） ng/L was higher than that in the SPE group （242.91±202.64） ng/L，the difference was statistically significant （P<0.05）.③There was no correlation between the expression of visfatin and retinal in the placental tissues. Conclusion? The expression of visfatin in placenta of patients with HDCP is significantly increased and the expression of retinal is significantly decreased， which may be related to the occurrence and development of HDCP. Placental heterogeneity has an effect on the expression of visfatin and retinoid.

Key words：Hypertensive disorder of pregnancy;Placenta;Visfatin;Retinoid

妊娠期高血壓疾病（hypertensive disorder of pregnancy，HDCP）是妊娠與高血壓并存的一組疾病，與母體圍生期發病率及圍產兒死亡率密切相關，但其發病機制尚不明確。據有關資料報道近幾年新發現的細胞因子：內脂素[1]（visfatin）和網膜素[2]（omentin）可能作用于HDCP的發生和發展，但具體機制及結論尚存爭議。本研究擬對HDCP患者胎盤組織內脂素、網膜素的含量變化進行測定，探討內脂素、網膜素是否參與HDCP發病及進展，明確二者是否可作為HDCP預測因子。

1對象與方法

1.1研究對象? 以昆明醫科大學第一附屬醫院2015年7月～2016 年7月住院分娩的53例合并妊娠期高血壓HDCP產婦作為研究對象，本研究經醫院倫理委員會審核批準，研究對象均知情同意。其中的根據病情輕重分為妊娠期高血壓（gestational hypertension，GH）組、輕度子癇前期（mild preeclampsia，MPE）組、重度子癇前期（severe preeclampsia，SPE）組，統稱HDCP組，因MPE組例數較少，結果分析時將MPE及SPE合為PE組進行分析。另選同期正常妊娠晚期婦女53例為對照組。

1.2納入與排除標準

1.2.1納入標準? 所有對象均不吸煙、飲酒，飲食和生活習慣無特殊，HDCP診斷及分組嚴格參照《婦產科學》第八版[3]及中華醫學會婦產科學分會《妊娠期高血壓疾病診治指南（2015）》[4]。

1.2.2排除標準? 所有對象均排除妊娠期其它合并癥和并發癥，且隨訪至產后12周，排外慢性高血壓合并妊娠。

1.3方法

1.3.1標本采集? 在胎盤娩出30 min內，避開肉眼可見的纖維化、梗死及鈣化區，以臍帶附著部胎盤即為中心部（center，C），胎盤邊緣處即為邊緣部（boarder，B），兩者連線中點即為中間部（middle，M），取1 cm×1 cm×3 cm大小胎盤組織各 1 塊，并將這 3 塊胎盤組織按照母體面層（maternal，M）、絨毛層（villus，V）和胎兒面層（fetal，F）分為上、中、下三層，即：近臍帶胎兒面（CF）、近臍帶絨毛層（CV）、近臍帶母體面（CM）、臍帶與邊緣中間胎兒面（MF）、臍帶與邊緣中間絨毛層（MV）、臍帶與邊緣中間母體面（MM）、邊緣胎兒面（FF）、邊緣絨毛層（FV）、邊緣母體面（FM）。無菌鹽水反復沖洗，濾紙吸干。分別放入滅菌無酶凍存管中，放置于液氮中速凍24 h，去除并轉入-80 ℃冰箱中保存待測。實驗前解凍剪碎胎盤組織，用微量電動組織勻漿儀勻漿，按500 μl PBS（pH=7.4）/g比例稀釋，低溫高速離心機離心20 min（3000 r/min），離心后收集上清液待檢測。

1.3.2指標測定? ELISA檢測妊娠婦女胎盤組織內脂素和網膜素含量，ELISA試劑盒均購自美國R&D公司，操作均嚴格按說明書進行。

1.3.3臨床資料收集? 收集研究對象的年齡、孕次、產次、孕前身高及體質量、入院時身高及體質量，分別計算孕前BMI和產前BMI。

1.4統計學方法? 采用SPSS 21.0軟件進行統計學處理，所有測定計量資料數據以（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗，多組間比較采用單因素方差分析，相關性分析采用Pearson相關分析法。統計檢驗均為雙側概率檢驗（α=0.05），P<0.05為差異有統計學意義，P<0.01表示統計學意義顯著。

2結果

2.1產婦一般資料比較? 經統計學分析顯示HDCP組及對照組年齡、孕產次、孕前BMI比較，差異無統計學意義（P>0.05）;HDCP組產前BMI顯著高于對照組，孕周小于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05），見表1。

2.2各組妊娠婦女胎盤組織內脂素、網膜素含量比較? HDCP組胎盤組織內脂素含量高于對照組，統計學意義顯著（P<0.01）。GH組、MPE組、SPE組胎盤組織中內脂素水平均高于對照組，統計學意義顯著（P<0.01），而GH組、MPE組、SPE組之間胎盤內脂素水平比較，差異無統計學意義（P>0.05）;對照組胎盤組織網膜素含量高于HDCP組，統計學意義顯著（P<0.01）。對照組胎盤組織網膜素水平高于GH組，但差異無統計學意義（P>0.05）;對照組和GH組胎盤網膜素水平高于MPE組及SPE組，MPE組胎盤網膜素水平高于SPE組，差異均有統計學意義（P<0.05）。各組患者胎盤組織中內脂素、網膜素含量見表2。HDCP各組及對照組胎盤組織內脂素、網膜素含量見表3。

2.3內脂素和網膜素在胎盤不同位置、不同層次表達的比較? 因MPE組例數較少，現將MPE及SPE合為PE組進行分析。結果顯示：① HDCP組胎盤組織中CF、CM、MM、BM內脂素含量高于對照組;進一步分析顯示：PE組胎盤組織中CF、CV、CM、MV、MM、

BF、BV、BM內脂素含量高于對照組（P<0.05）;但GH與PE組之間內脂素含量比較，差異無統計學意義（P>0.05）。②HDCP組胎盤組織中CV、BF、BV網膜素含量低于對照組;PE組胎盤組織中CF、CV、CM、MM、BF、BV、BM網膜素含量低于對照組（P<0.05）;其中CV、CM、BF、BV、BM網膜素含量低于GH組（P<0.05）;GH和對照組間網膜素含量比較，差異無統計學意義（P>0.05）。③同一患者胎盤不同位置，不同層次內脂素、網膜素的含量不同，但差異無統計學意義（P>0.05）見表4。

2.4胎盤組織中表達的內脂素和網膜素相關關系? 對照組及HDCP組胎盤組織中內脂素和網膜素含量相關關系如圖1，統計分析結果表明胎盤組織中表達的內脂素和網膜素無相關關系（P>0.05）。

3討論

妊娠期高血壓疾病是一種病因不明的病理妊娠，常發生于妊娠20周以后，以全身小血管痙攣、內皮細胞受損及局部缺血為特征，臨床表現為高血壓、蛋白尿，伴或不伴水腫，肝腎功能異常，嚴重者可出現抽搐、昏迷，甚至死亡，嚴重影響母嬰健康，是孕產婦和圍產兒病死率升高的主要原因[3，4]。本研究發現HDCP組和對照組孕產婦年齡、孕產次、孕前BMI之間無顯著差異，而HDCP組婦女孕期體重增長高于對照組，分娩孕周小于對照組，提示孕期體重增長過多可能增加罹患HDCP的風險，導致分娩孕周提前，說明孕期良好體重控制對預防HDCP發生，改善胎兒結局具有積極意義，與國內外研究結果一致[5，6]。

內脂素是內臟脂肪組織分泌的一種特異性脂肪因子，本研究中HDCP患者中各組胎盤組織中內脂素含量均顯著高于對照組（P<0.01），此結果與Alberico S等、Montico M等的研究結果一致[7，8]，表明胎盤組織高水平的內脂素可能與HDCP的發生、發展有關，究其原因可能為：①內脂素能增加hs-CRP、TNF-α及IL-6等表達，導致血管調節因子失衡，引起血管內皮細胞受損;②內脂素可激活胰島素受體并具有胰島素模擬作用，引起血脂代謝異常及胰島素抵抗（insulin resistance，IR）加重，導致HDCP的發病;③內脂素可作為血管平滑肌細胞的生長因子，促進主動脈平滑肌細胞增殖，從而導致高血壓的形成[9]。研究還發現GH組、MPE組、SPE組胎盤組織中內脂素的表達差異無統計學意義，表明內脂素在胎盤組織中的表達情況與HDCP的病情嚴重程度無相關關系。

網膜素是一種表達于網膜脂肪組織的一種特異性因子，本研究發現，HDCP組網膜素在胎盤組織的表達顯著低于對照組，且網膜素在胎盤中的表達在GH組、MPE組、SPE組逐漸遞減，表明網膜素在胎盤中的表達與HDCP患者的病情呈負相關關系。究其原因可能是：①網膜素可用于檢測血管內皮功能是否存在異常，具有抗炎和舒張血管的作用[10];②網膜素可抑制 TNF-α誘發的 VCAM表達，主要機制為減少血管平滑肌細胞合成過氧化物及降低血管壁上淋巴細胞的粘附聚集[11];③網膜素能改善其胰島素抵抗，增加肝糖攝取，刺激肌肉脂肪酸氧化[12]。總之，網膜素可能通過抑制血管炎癥、舒張血管及改善胰島素抵抗作用于HDCP的疾病進展。本研究還發現HDCP組胎盤組織中網膜素低于對照組（P<0.01），但胎盤組織中網膜素的表達在對照組和GH組中無顯著差異，表明HDCP組胎盤網膜素含量明顯低于正常組主要是由PE組的降低造成的，提示HDCP病情只有發展到某一程度，胎盤網膜素含量才會出現顯著降低。網膜素含量的測定可作為預測HDCP發生及病情發展程度的指標。

胎盤是胎兒和母體間進行物質交換的場所。有學者將妊娠期高血壓疾病稱之為“胎盤病”，因其在胎盤娩出后常很快緩解或可自愈。胎盤主要由囊胚外圍的滋養外胚層細胞發育而成，由間質滋養層細胞（i EVTs）侵入子宮蛻膜直至子宮肌層的上1/3，保證母胎界面血流灌注，為宮內胎兒生長發育提供必需營養物質[13]。本研究結果顯示對照組、GH組、PE組患者胎盤不同位置，不同層次內脂素、網膜素的表達存在差異，母體面胎盤組織中內脂素含量顯著高于對照組，而PE組患者除CF外，近臍帶組及胎盤邊緣組各點網膜素含量顯著低于GH組和對照組。提示胎盤異質性對內脂素和網膜素的表達存在影響，可能與子宮螺旋動脈重鑄不全、胎盤淺著床及胎盤不同部位脂代謝存在差異相關[14]。對照組和HDCP組胎盤組織中表達的內脂素和網膜素無相關關系，分析二者可能經過不同機制作用于脂代謝影響HDCP的發生與發展，但其確切機制需進一步大樣本數據研究證實。且因本次研究MPE組實驗例數較少，若分析兩者于胎盤表達水平差異是否與疾病嚴重程度相關，還需大量分組實驗研究。

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收稿日期：2019-1-17;修回日期：2019-1-28

編輯/肖婷婷