血清sLOX-1在2型糖尿病合并OSAHS中的變化及與下肢血管病變的關系

白亞麗 范榕 趙雅寧 戈艷蕾 張馨

(華北理工大學，河北 唐山 063000)

凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體(LOX)-1是氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)在動脈粥樣硬化(AS)斑塊細胞表面的主要受體，參與AS斑塊形成及破裂。LOX-1在細胞表面大量表達后經蛋白酶水解釋放可溶性LOX(sLOX)-1，血清sLOX-1水平能夠反映LOX-1的表達水平〔1〕。近年來學者對sLOX-1在急性冠脈綜合征(ACS)、阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征(OSAHS)、2型糖尿病(T2DM)等中的變化進行了研究，發現血清sLOX-1的變化是ACS的獨立預測因子〔2～4〕。研究發現OSAHS與機體的糖代謝密切聯系，糖尿病(DM)合并OSAHS的患者血糖控制差〔5〕。OSAHS越嚴重，血糖控制越差，發生DM慢性并發癥的危險性也越高，但血清sLOX-1在DM合并OSAHS的患者中如何變化尚不清楚。下肢血管病變(PAD)是DM常見的大血管并發癥之一。本研究探討T2DM合并OSAHS患者血清sLOX-1水平的變化及與PAD形成的關系。

1 資料與方法

1.1研究對象 選取華北理工大學附屬醫院2015年3月至2016年10月就診的T2DM患者，行夜間連續7 h以上多導睡眠圖監測，依據OSAHS入選標準，篩選出T2DM伴OSAHS患者171例為觀察組，單純T2DM患者231例為對照組，兩組性別、年齡、DM病程、糖化血紅蛋白(HbA1c)、有無慢性病等方面差異無統計學意義(P>0.05)，見表1。納入標準：①經血糖監測符合世界衛生組織(WHO)1999年制定的T2DM診斷標準；②OSAHS患者符合中華醫學會呼吸病學分會睡眠呼吸障礙學組制定的OSAHS診治指南的診斷標準；③知情同意。排除標準：①急慢性感染性疾病、腫瘤及腫瘤術后；②服用鎮靜、助眠等神經、精神類藥物者；③嚴重心、肝、腎功能不全者；④妊娠期患者；⑤合并甲狀腺功能異常或有其他內分泌疾病。

表1 兩組一般資料比較

慢性病包括高血壓、高脂血癥

1.2PAD檢測 入組患者均于入院當日或次日采用德國西門子AcusonSequoia C512型彩色多普勒超聲診斷儀，7.5～11.0 MHz線陣探頭，患者分別采用俯臥位和仰臥位，檢測動脈包括雙側股淺動脈、脛后動脈及足背動脈。患者均由華北理工大學附屬醫院超聲診斷室同一位醫師負責且檢測前未被告知患者分組情況。PAD的診斷標準：將PAD的性質分為4種，并依據病變的嚴重程度評分，①血管內膜厚度：不厚(內膜增厚<1.0 mm)為0分，輕度增厚(內膜增厚1.0～1.2 mm)為1分，中重度增厚(內膜增厚>1.2 mm)為2分；②動脈硬化程度：正常為0分，輕度硬化(動脈內膜回聲強但未增厚，無斑塊)為1分，中重度硬化(輕度伴有斑塊或狹窄)為2分；③斑塊：正常(未發現斑塊)為0分，單發為1分，多發斑塊為2分，彌漫性斑塊為3分；④狹窄：無狹窄為0分，輕度狹窄(狹窄程度為30%～50%)為1分，中重度狹窄(狹窄程度為51%～75%)為2分，閉塞(無血流)為3分。含有1種及以上則可診斷為PAD，得分越高血管病變越重。

1.3多導睡眠監測 符合入組的T2DM患者入院后均采用YH1000多導睡眠儀(澳大利亞Compumedics公司)進行多導睡眠圖(PSG)監測，內容包括口鼻氣流、體位、胸腹呼吸運動、鼾聲、呼吸暫停低通氣指數(AHI)及最低血氧飽和度(LSaO2)等，監測當日患者禁飲酒、濃茶、咖啡，禁服用鎮靜催眠類藥物，2 w內無上呼吸道感染。所有研究對象需行整夜連續監測，時間不少于7 h。數據經睡眠分析軟件初步分析后由人工進一步糾正，最終由專業醫師確定監測結果。主要采集AHI及LSaO2為主要參考指標。

1.4血清sLOX-1水平監測 所有患者于入院后次日晨抽取空腹靜脈血2 ml，以3 000 r/min離心20 min，分離血清，取上清液放置于-80℃下保存待測。待標本收齊后解凍統一采用酶聯免疫吸附實驗(ELISA)測定，試劑盒由天津灝洋生物制品科技有限責任公司提供。本研究依照兩組患者血清sLOX-1的檢測結果按照P50分層：血清sLOX-1水平超過P50者為異常。

1.5血液生化指標檢測 所有患者于入院后次日清晨空腹(入院當日晚8點起禁飲食)抽取靜脈血，采用葡萄糖氧化酶法測定HbA1c水平。

1.6統計學方法 采用SPSS17.0軟件進行t檢驗，χ2檢驗，Pearson相關分析。

2 結 果

2.1兩組患者PAD檢出率、血清sLOX-1水平比較 觀察組PAD檢出率明顯高于對照組(P<0.00)；與對照組比較，觀察組患者血清sLOX-1水平顯著升高(P<0.001)，見表2。

表2 兩組PAD檢出率、血清sLOX-1水平比較

2.2觀察組患者AHI、LSaO2與血清sLOX-1水平的相關性分析 觀察組AHI與血清sLOX-1含量呈正相關(r=0.791,P=0.000)，LSaO2與患者血清sLOX-1含量呈負相關(r=-0.705,P=0.000)。

2.3觀察組內不同水平sLOX-1患者PAD發生率的比較 sLOX-1異常組PAD檢出率〔n=81,67例(60.9%)〕顯著高于正常組〔n=90,43例(39.1%)〕(χ2=8.475,P=0.004)。

2.4觀察組PAD單因素分析 觀察組患者依據有無PAD分為PAD組和無PAD組，兩組在DM病程、HbA1c、OSAHS病情方面，差異有統計學意義(P<0.01) ，見表3。

表3 觀察組PAD單因素分析〔n(%)〕

2.5觀察組PAD多因素分析 觀察組內以是否有PAD(有=1，無=0)為因變量，以DM病程、HbA1c、AHI、LSaO2、sLOX-1為自變量進行Logistic回歸分析，多因素分析結果顯示：DM病程、AHI、LSaO2、sLOX-1為OSAHS合并T2DM PAD的影響因素，見表4。

表4 觀察組PAD多因素分析

3 討 論

LOX-1最早在內皮細胞中表達，后來又發現在巨噬細胞、軟骨細胞、平滑肌細胞中也有表達，具有結合、內吞、降解ox-LDL的功能〔6,7〕。近年來有研究顯示sLOX-1與OSAHS也具有一定相關性。Xu等〔8〕研究結果發現OSAHS患者血清sLOX-1水平顯著高于對照組，且升高程度與OSAHS的嚴重程度密切相關。也有學者指出〔9〕重度OSAHS男性血清中的sLOX-1 表達水平升高，在經過氣道正壓通氣(CPAP)治療1個月后，患者sLOX-1 水平顯著下降。這表明，sLOX-1可能成為評價OSAHS嚴重程度和預后的新型指標。本研究結果提示血清sLOX-1水平在合并OSAHS后顯著升高，且隨著OSAHS病情加重，血清sLOX-1水平越高。OSAHS引起DM患者血清sLOX-1升高的機制可能為：①間歇低氧：OSAHS患者慢性間歇性低氧激發氧化應激反應可誘導急性期蛋白基因及相關細胞因子的表達增加，進而誘導LOX-1的上調〔10〕。②炎癥反應：OSAHS屬于炎癥性疾病，研究發現IL-6水平的升高可刺激LOX-1的表達上調〔11〕。③交感神經興奮：OSAHS反復的低氧/復氧可導致交感神經興奮，研究顯示〔12〕交感神經興奮可通過誘導血管緊張素Ⅱ的表達引起sLOX-1的釋放。此外本研究還說明OSAHS加重了DM患者PAD的發生，可能與血清sLOX-1的升高有關。

PAD是T2DM患者致死、致殘的重要原因，其病理基礎是AS〔13〕，氧化應激、炎癥反應、胰島素抵抗在AS發生、發展中發揮重要作用。本研究結果可得出血清sLOX-1水平與OSAHS病情呈正相關關系，當OSAHS病情越嚴重，血清sLOX-1水平越高，患者下肢血管病變越嚴重。本研究多因素分析結果說明血清sLOX-1參與了OSAHS合并T2DM患者血管病變的發生發展過程。機制可能為：被轉運到血管內皮細胞的ox-LDL一方面可抑制血管內皮細胞的活性功能，促進單核細胞和血小板活化，加速單核細胞向血管內皮細胞黏附和聚集，促進泡沫細胞形成，觸發AS〔14〕；另一方面，LOX-1還可介導ox-LDL促進血管平滑肌細胞增殖和遷移，誘導細胞凋亡，加速動脈硬化的進程〔15〕。此外，本研究多因素分析顯示，長期的高糖刺激不僅導致胰島β細胞功能進行性下降，同時患者炎癥水平、糖脂代謝紊亂程度也不斷加重，因此下肢動脈硬化的發生率也隨之增高。間歇低氧可導致機體氧化應激反應增強，脂質過氧化，細胞黏附因子表達增強，導致單核細胞與內皮細胞黏附、聚集，引發血管內皮損傷；此外頻繁低氧還導致炎性因子水平增高，引發炎癥反應，導致大量單核巨噬細胞向血管內膜浸潤，促進動脈硬化及血栓形成。本研究中HbA1c僅在單因素分析中有統計學差異，但并未進入多因素回歸模型，考慮與樣本量較少有關。

綜上，OSAHS加重T2DM患者PAD的程度，因此對于就診的T2DM患者若懷疑合并OSAHS疾病應及早進行篩查，以便及時給予有效干預，從而改善DM患者預后及血管并發癥的嚴重程度。檢測OSAHS合并T2DM患者血清sLOX-1水平對患者的PAD程度具有警示作用。