武漢市新生兒葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺失癥篩查分析

沈姍姍 胡睿 周斌 蔡文倩 胡晞江

華中科技大學同濟醫學院附屬武漢兒童醫院（武漢市婦幼保健院）（武漢430016）

葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（glucose-6-phosphata dehydrogenase deficiency，G6PD）缺乏癥是紅細胞酶缺乏引起溶血性貧血中最常見的一組X 連鎖不完全顯性的遺傳病。G6PD 缺乏癥地理分布廣泛，呈全球性多民族分布，全球罹患人數超過4 億［1］，我國是本病的高發區之一，尤其以我國的長江以南地區高發。G6PD 缺乏是引起新生兒高膽紅素血癥的重要原因，嚴重時損傷大腦，造成永久性的神經損害致使智力低下甚至死亡［2-3］。G6PD 缺乏癥為遺傳性疾病，暫無根治方法，發病后只能對癥處理，因此防重于治，開展新生兒G6PD 缺乏癥的篩查工作，能夠早期診斷和預防該病的發生，控制出生缺陷、提高人口素質。

武漢市處于華中長江流域，因為不是蠶豆病的傳統高發區，因此缺乏相關流行病學的研究，無相關統計分析數據。武漢兒童醫院（武漢婦幼保健院）新生兒疾病篩查室自1998年建立了武漢市的新生兒疾病篩查網絡系統，于2016年11月中旬開始進行武漢地區（涵蓋武漢十三個區）的新生兒G6PD缺乏癥篩查工作（武衛生計生通［2016］123 號）。本文統計自篩查工作開展以來至2018年11月武漢市新生兒的G6PD 篩查數據，分析武漢市G6PD 缺乏癥的發生情況。本研究可以為武漢地區G6PD缺乏癥的疾病防控提供參考依據，為優生優育提供指導作用，并且對G6PD 缺乏癥在中部地區的發病等流行病學數據做一個填充?，F報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象本研究選取2016年11月至2018年11月在武漢市新生兒疾病篩查中心進行新生兒疾病篩查的全市健康新生兒共計202 994例，男108 529例，女94 433例，性別不詳32例，包括我院出生和武漢市其他公立與私立醫院（其中2016年93 家醫院、2017年92 家醫院和2018年89 家）出生的活產新生兒，完整涵蓋武漢13個區的人群樣本，因此本文所選樣本可以代表武漢地區常住人群的G6PD 篩查情況。

1.2 研究方法

1.2.1 標本采集和遞送新生兒的G6PD 缺乏癥篩查標準：按《新生兒疾病篩查技術規范（2010年版）》要求，武漢市各醫院在新生兒出生72 h 并充分哺乳后采集足跟血，滴于專用采血S＆S903濾紙（型號FH-A-02）上，自然滲透兩面形成直徑≥8 mm的血斑4個，室溫中自然干燥后，置密封塑料袋內封口，放入2～8 ℃冰箱保存。于5個工作日內送至武漢兒童醫院（武漢市婦幼保?。┬律鷥杭膊『Y查中心進行G6PD 篩查，武漢市新生兒疾病篩查室負責對全市標本進行G6PD 篩查。

1.2.2 實驗室檢測采用廣州豐華時間分辨熒光免疫法以2.5 為參考值，樣本測定值＞2.5 為陰性，樣本測定值≤2.5 為可疑陽性，對篩查陽性患兒召回進行G6PD 基因測序。

1.2.3 質量控制本中心實驗室G6PD 篩查每塊反應板均采用雙標雙控制，每次試驗每板均做標準品和低值、高值質控，G6PD 檢測項目每年參加國家衛生和計劃生育委員會臨床檢驗中心新生兒疾病篩查實驗室室間質量評價，成績均為合格。

1.2.4 確診試驗將篩查陽性者進行電話召回，總共召回219例嬰兒統一采集靜脈血，進行G6PD基因13個外顯子全長測序進行突變類型鑒定。

1.3 統計學方法采用SPSS 17.0 統計學軟件對數據進行分析，發生率采用百分比（%）表示，組間比較采用了χ2檢驗；酶活力結果情況采用表示，組間采用t檢驗，P＜0.05 表示差異顯著，具有統計學意義。

2 結果

2.1 武漢市2016年11月至2018年11月新生兒G6PD 篩查情況202 994例新生兒足跟血G6PD缺乏癥采用時間免疫熒光法的陽性檢出率為0.18%（369/202 994），其中男嬰缺乏率為0.33%（353/108 529），女嬰缺乏率為0.02%（16/94 433），兩者差異有統計學意義（χ2=264.499，P=0.000），男嬰的G6PD缺乏率顯著高于女嬰。在G6PD 時間免疫熒光法檢出為陽性的新生兒中，男嬰G6PD 活性（1.41±0.55）U/gHb，女嬰G6PD 活性（1.77±0.58）U/gHb（t=2.522，P=0.012），男嬰酶活性顯著低于女嬰。通過電話召回篩查陽性患兒219例，抽取靜脈血進行基因檢測來驗證篩查效率。

2.2 可疑陽性的基因檢出情況通過對219例G6PD 活性篩查陽性標本進行G6PD 基因全長測序分析，共檢出182例標本攜帶G6PD 基因致病突變位點，陽性確診率為83.1%（182/219）。

2.3 武漢地區與其他地區G6PD 缺乏癥發生情況比較本次武漢市檢出的G6PD 發生率明顯低于我國南方如兩廣、云貴，四川、福建等高發地區，與上海持平，但略高于河北、山東地區等北方地區，略低于江浙和湖北省臨近的江西、湖南等省市。見表1。

表1 武漢市新生兒G6PD 缺乏癥篩查發生率和其他城市、地區比較Tab.1 Comparisons of the prevalence of the G6PD deficiency in wuhan and other cities of China

3 討論

G6PD 缺乏癥為一種遺傳性溶血性疾病，發病的臨床表現與一般溶血性貧血大致相同，分為新生兒黃疸、蠶豆病、藥物性溶血、感染性溶血、非球形細胞溶血性貧血等臨床類型［17］。G6PD 活性低下的新生兒更容易發生新生兒黃疸，這是由于G6PD 缺乏的新生兒在失去母源性抗氧化保護后，處理H2O2的酶不成熟，而新生兒器官還未發育完善，在感染或者藥物等誘因存在的情況下，體內發生溶血，肝臟不能及時將間接膽紅素轉變為直接膽紅素排出體外，造成血中間接膽紅素濃度急劇升高透過血腦屏障，嚴重損傷腦細胞，導致核黃疸，造成智力低下［18-19］。此病目前尚無有效的治療措施，預防為最重要的干預手段，患兒如果避免患病因素，可能終生不發病。因此，對新生兒進行G6PD 活性的早期篩查和診斷，能夠有效的避免G6PD 缺陷所引起的一系列疾病的產生，更高效的保護患兒的健康。

世界上G6PD 缺乏癥患兒主要分布在非洲、中東、亞洲的熱帶和亞熱帶地區，我國是G6PD 缺乏癥的高發地區，并呈現“南高北低”的分布特點，長江流域以南多常見，其中以海南、廣西、廣東、云南、貴州、四川、香港和臺灣等地區較高發，且有諸多研究報道，隨著緯度北移，發生率呈現逐漸下降趨勢，長江以北省市較少報道。湖北省地處華中長江流域，但目前卻沒有G6PD 缺乏癥發生情況的相關報道。2016年湖北省內武漢市（包括下轄13個區）率先開展G6PD 缺乏癥篩查工作，該工作由武漢市新生兒疾病篩查中心承擔并運營武漢市新生兒遺傳代謝疾病監督管理網絡平臺，本文就武漢市的檢出情況做了統計分析，結果顯示武漢市的G6PD 缺乏癥發生率為0.18%（369/202994），與地處同一緯度的上海市檢出率相同（0.18%），遠低于我國華南、西南等G6PD 缺乏癥的高發地區，明顯高于長江以北的城市如：河北廊坊檢出率0.05%，陜西省寶雞市的檢出率0.02%及山東省檢出率0.00%～0.02%。而與湖北交界的湖南和江西，G6PD 缺乏癥的檢出率分別為0.39%和1.20%，這與G6PD 缺乏癥的“南高北低”分布特點相一致。在本次研究中，武漢地區男性檢出率為0.33%（353/108 529），女性檢出率為0.02%（16/94 433），男性發病率顯著高于女性（χ2=264.499，P=0.000），并且G6PD缺乏癥的男性患兒的酶活力顯著低于女性患兒［男（1.41±0.55）U/gHb，女（1.71±0.58）U/gHb；t=2.522，P=0.012］。這些結果也符合X 染色體連鎖不完全顯性遺傳方式，因為男性只有一條X染色體，男性表現型多為酶活性顯著缺乏，女性有兩條X 染色體，表型以輕度缺陷（雜合子）多見，因此導致男女表型差異較大［20-21］。通過對召回的219例初篩陽性患兒進行G6PD 基因測序，共檢出182例攜帶G6PD 致病突變位點，即初篩的檢測效率達83.1%，這些結果也表明時間分辨免疫熒光法是一種準確性高、適合大規模的G6PD 標本篩查的方法，可以應用這種方法推廣至湖北省的G6PD篩查。

G6PD 缺乏癥篩查是先天性G6PD 缺乏癥三級預防的重要且有效的方法，我國新生兒遺傳代謝性疾病篩查起步較晚，2008年國家首次將G6PD 缺乏癥納入常規篩查范圍，南方高發地區篩查起步較早、模式完善［22］；發病率較低的北方篩查尚未完全建立，大規模的篩查數據較少。然而隨著經濟的發展，南北人口的流動與通婚及定居的變遷，以及人民生活水平的提高，在全國范圍內開展新生兒篩查具有重要意義。隨著全國各地的外來人口不斷流入，南北人群交流日益頻繁，只有新生兒篩查工作的全面覆蓋，才能了解本省G6PD 缺乏癥的發病情況，為提高本省出生人口健康而努力。