自體富血小板血漿注射改善眶周皮膚老化的臨床研究

羅夢瑤 李廣帥 劉中陽 張澤偉 程鳳娟

[摘要]目的：觀察皮下注射自體富血小板血漿（Autologous platelet-rich plasma，PRP）改善眶周皮膚老化的臨床療效。方法：將獲取的自體富血小板血漿（PRP）均勻注射（單次）至志愿者眶周皮下，使用VISIA圖像分析系統對治療前后不同階段的皮膚相關特征進行檢測，將所得分值進行對比分析，并計算其差異性。結果：治療前、治療后30d、60d皺紋、紋理、斑點檢測值比較，差異均有統計學意義（P<0.05）。治療后30d、60d毛孔檢測值與治療前比較，差異有統計學意義（P<0.05），但是治療后30d與60d比較，差異無統計學意義（P>0.05）。紫外線色斑檢測值治療前后比較，差異均無統計學意義（P>0.05）。結論：自體富血小板血漿（PRP）注射可以改善眶周皮膚老化狀態，提升皮膚年輕化，操作方便，值得臨床推廣。

[關鍵詞]自體富血小板血漿;皮下注射;眶周皮膚老化;臨床療效;VISIA圖像分析系統

[中圖分類號]R622? ? [文獻標志碼]A? ? [文章編號]1008-6455（2019）06-0094-03

Abstract： Objective? To observe the clinical effect of subcutaneous injection of autologous platelet-rich plasma （PRP） on periorbital skin aging. Methods? The obtained autologous platelet rich plasma （PRP） was uniformly injected （single time） into the periorbital subcutaneous area of the patients. VISIA complexion analysis system was used to detect the skin related characteristics at different stages before and after treatment. The test results were compared and analyzed， and the differences were calculated. Results? There were significant differences in wrinkles， textures and spots between 30 and 60 days after treatment and before treatment（P<0.05）. There were significant differences in pore detection values between before and after treatment at 30 and 60 days（P<0.05）. However， there was no significant difference between 30 days and 60 days after treatment（P>0.05）. There was no significant difference in ultraviolet spot detection before and after treatment（P>0.05）. Conclusion? PRP injection can improve periorbital skin aging， promote skin rejuvenation， and is easy to operate， which is worthy of clinical promotion.

Key words： platelet-rich plasma（PRP）; subcutaneous injection; periorbital skin aging; clinical effect; VISIA complexion analysis system

面部皮膚老化可分為光老化和自然老化，其臨床表現為皮膚變薄、彈性下降、萎縮松弛、細紋與色素沉著等。同時眶周及眼瞼部皮膚是全身皮膚中較為薄弱的部分容易出現細紋、色素沉著、松弛等表現[1]，常需進行多種治療。臨床上常用的抗衰老治療有肉毒素注射[2]、點陣激光[3]、強脈沖光[4]、微針注射膠原蛋白[5]、小分子透明質酸填充[6]、PPDO線埋植[7]等。近年來隨著再生醫學的發展，臨床研究發現自體富血小板血漿（Autologous platelet-rich plasma，PRP）能提供大量濃集的生長因子促進皮下膠原再生，從而延緩皮膚衰老，促進面部年輕化，但大部分研究僅采用臨床量表評估，缺乏更加客觀的評價指標，本實驗中對20例皮膚老化者行自體富血小板血漿注射后效果良好，并通過VISIA圖像分析系統在治療前后不同階段所獲數據進行比對分析，現將結果報道如下。

1? 資料和方法

1.1 一般資料：本組實驗選取健康志愿者20例納入免費治療，全部為女性，年齡39～50歲，平均年齡44.1歲，Fitzpatrick分型Ⅲ～Ⅳ型皮膚，Dr.Glogau皮膚老化分級法[8]Ⅱ級。臨床表現：不同程度的細紋，色斑，皮膚松弛毛細血管擴張等，志愿者均合并上述一種及兩種以上皮膚老化表現。納入標準：①平素體健，無高血壓、糖尿病，冠心病等系統性疾病，無傳染病、血液性疾病、精神性疾病、活動性疾病及嚴重的皮膚病，局部皮炎，皮膚潰瘍感染等;②實驗前靜脈血血小板計數位于（100～300）×109/L正常值之內;③采血前6個月未使用任何影響血小板及血液系統功能的藥品及保健品;④近1年未接受任何面部美容治療包括脂肪填充、肉毒素注射、透明質酸注射、微針注射，眼眶部整形外科手術等;⑤不在妊娠期、哺乳期、備孕期，無不良嗜好（如：吸煙、嗜酒、吸毒等）;⑥平素對護膚品無嚴重過敏史。醫師已經將治療過程及其可能存在的不良反應告知本人，均表示理解并同意全程參與治療，且簽署知情同意書。本實驗經倫理委員會研究并審核通過。

1.2 儀器和材料：瑞士瑞珍PRP制備套裝Ⅲ型（Type Ⅲ RegenACR?-C Classic，RegenLab瑞士REGEN LAB SA公司，國食藥監械字2014第3661397號）;離心機（瑞珍LC-04C專用離心機，REGEN LAB SA公司），VISIA皮膚檢測儀（美國 CANFIELD）、佳能數碼相機、利多卡因乳膏（北京紫光制藥）、絡合碘、一次性無菌換藥包（山東威高潔瑞），三通轉換接頭（貝朗），無菌生理鹽水（四川科倫），醫用冰袋。

1.3 治療方法

1.3.1 檢測條件：20例女性志愿者在測試前均徹底潔面，室內休息30min后等待檢測。VISIA皮膚檢測儀（美國）檢測并記錄（正位、左右斜側45°）斑點、皺紋、紋理、毛孔，紫外線色斑共計5項指標得分值。

1.3.2 治療操作：①眶周涂抹利多卡因乳膏并保鮮膜封包1h;②自體富血小板血漿制備，本實驗中均采用瑞士瑞珍PRP制備套裝Ⅲ型（Type Ⅲ RegenACR?-C Classic），包含1個蝴蝶針頭，1個采血固定器，1支 RegenTHT 管（內含抗凝劑和分離凝膠），2個魯爾針管1ml和5ml，1個轉移針頭，3個30G針頭，1個27G針頭，1個長度80mm轉移用套管針頭，1個轉移用配件。首先使用套盒中采血針靜脈穿刺，采血管將自動采集所需體積的血液約8ml，然后放入瑞珍LC-04C專用離心機中進行離心（離心機參數設置：時間12min;離心力 3 100rpm），待離心機停止，靜置2min后將制備管從離心機中取出;反復倒置采血管，再次懸浮，細胞儲存在上層清液中，每支采血管可獲得約4.5ml PRP;利用轉換器導入1ml或5ml注射器中待用（見圖1）;③眶周區域富血小板血漿（PRP）注射：常規消毒鋪巾，采用退針注射技術，將套盒所帶30G長針頭與1ml注射器連接固定，針頭全長伸入皮下層，經皮可見針頭位置變化，退針注射，見局部皮下輕輕隆起即可（邊注射邊以鹽水紗布輕輕按壓止血）。注射途徑交織成網格狀均勻彌散分布。治療后以生理鹽水紗布濕敷，并以軟冰持續冷敷2h以上，24h后可洗臉，外用護膚品，日常注意防曬。

1.4 療效評價：應用VISIA皮膚檢測儀在治療后30d、60d對志愿者的左、右面頰和前正面進行檢測，檢測儀自動生成絕對分值（絕對分值代表了出現在選定區域的皮膚特征檢測值的面積和強度，分值越低則皮膚老化特征越低）與治療前進行對比并進行統計學處理。

1.5 統計學分析：選擇斑點、皺紋、紋理、毛孔、紫色斑共5項作為本次分析指標，采用SPSS 20.0軟件對計量資料進行重復方差分析和t檢驗，P<0.05認為差異有統計學意義，P<0.01代表有極顯著的統計學差異。

2? 結果

2.1 VISIA 檢測結果：治療前、治療后30d、60d皺紋、紋理、斑點檢測值比較，差異均有統計學意義（P<0.05）。治療后30d、60d毛孔檢測值與治療前比較，差異有統計學意義（P<0.05），但是治療后60d與30d比較，差異無統計學意義（P>0.05）。紫外線色斑檢測值治療前后比較，差異均無統計學意義（P>0.05）。見表1。典型病例見圖2～3。

2.2 不良反應情況：在所有接受治療的志愿者中，未見針眼感染。所有志愿者在治療后即刻至2h內紅腫明顯，后逐漸緩解，24h后部分志愿者針眼可見輕度瘀血，1周逐漸消退。在實驗觀察期間，均未見志愿者在治療后有皮下結節，皮膚炎癥等表現。同時，所有志愿者治療后即刻完成視覺模擬評分法（Visual analogue scale，VAS）評分[9]，所得平均值為5分。

3? 討論

保持皮膚健康和年輕化，是人類社會長期追求的目標。隨著醫學水平的發展，越來越多的技術得以用來改善面部皮膚老化這一難題。眶周以眼部為中心，老化明顯，但其抗衰治療措施也因其皮膚薄弱和解剖位置受到限制，近年來學者一直在探索更為安全的治療方式。自體富血小板血漿自上世紀90年代以來廣泛應用于創傷愈合[10]，之后在其他醫學領域也有大量的臨床證據[11]。現有的國內外文獻報道其含有多種生長因子，能誘導蛋白再生的過程，從而促進細胞和基質增殖，膠原形成，實現對人體組織的修復[12]，而被廣泛應用于醫學美容領域[13]。傳統獲取自體富血小板血漿（PRP）的方法較多，因轉速和離心時間不同，致使獲取的濃度和穩定性存在差異[14]。目前國內外市場已經開發了幾種血小板制備套盒[15]，本實驗中使用瑞士瑞珍PRP制備套裝Ⅲ型提取技術，利用其專利分離凝膠，經過一次離心，即可獲取自體富血小板血漿，操作簡單快捷，便于臨床推廣應用。離心后分為3層，最上層黃色澄清液體為自體富血小板血漿（PRP），中間層上緣為細胞沉淀層、中間層為分離膠層，最底層為紅細胞層（見圖1）。本次研究中觀察到30d、60d后皺紋VISIA檢測值較治療前均有統計學差異，VISIA檢測截圖比較可見皺紋數量逐漸減少，深度變淺，皮膚勻質性即紋理均有提高，皮膚細小皺紋變化明顯，即自體富血小板血漿可以通過促進成纖維細胞、原母細胞增殖和膠原生成來增加真皮彈性[16]和厚度，治療皺紋。同時它能刺激透明質酸的合成[17]，增強皮膚保濕能力，提高皮膚光澤度，改善色素沉著[18]。但在本次研究中治療前后志愿者紫外線色斑檢測值比較，差異無統計學意義，可能與樣本量及治療次數較少，且實驗期間正值夏季，可能與志愿者防曬不嚴格有關，未來有待進一步研究。

VISIA圖像分析系統[19]是皮膚科、整形美容外科和護膚品行業應用最廣泛的成像分析設備。其使用標準的白熾燈、紫外線（UV）和交叉偏振光，生成一系列的高分辨率圖像，對志愿者的左、右面頰及正面進行檢測，共檢測斑點，皺紋 ，紋理，毛孔，紫外線，棕色，紅色區域、紫色斑（卟啉）8項生理指標，檢測系統自動生成分值（特征計數、百分位數）作為分析指標，提供客觀數據，便于統計學處理，較傳統的醫師量表分析更加準確。在本研究中則選取色斑、皺紋、紋理、毛孔、紫色斑為主要檢測指標，是參考皮膚老化分級[8]和主要特征為依據。但VISIA并非最佳檢測儀器，有研究也表明ANTERA 3D? CS[13]在檢測皺紋及毛孔等項目時，優勢更為明顯。

本實驗研究的局限性在于參與人數較少，沒有對照組，隨訪時間相對較短。筆者建議應當在更大樣本量的臨床試驗中重復這項研究的概念，理想的方法是反復多次注射，在更長的皮膚代謝周期中觀察自體富血小板血漿（PRP）對改善眶周皮膚老化的作用，同時志愿者接受多項無創面部檢測，如CK皮膚鏡、ANTERA 3D? CS[20]等綜合分析。此外，還需要更多的研究來闡明每次治療面部不同區域所需的最佳劑量、注射次數、時間間隔、以及治療的長期有效性等。綜上所述，與其他皮膚修復療法相比，自體富血小板血漿（PRP）皮下注射是一種有效的可以促進組織再生的治療方法，相比人工合成的填充劑其來源于自體組織，無免疫反應，再生能力強，安全性更高等優勢。提取技術操作簡單，希望在未來能有大樣本數據支持其在面部年輕化的臨床作用，為抗衰治療提供更多方案。

（作者貢獻聲明：感謝程鳳娟實驗操作;劉中陽、張澤偉數據整理、統計學分析;李廣帥教授研究指導、論文修改、經費支持。）

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[收稿日期]2018-12-25

本文引用格式：羅夢瑤，李廣帥，劉中陽，等.自體富血小板血漿注射改善眶周皮膚老化的臨床研究[J].中國美容醫學，2019，28（6）：94-98.