黃緣閉殼龜的人工孵化試驗

黃 勇 賀勝利 郭良鑫 畢冠蘭 盧 靜

1.河南省信陽市水產技術推廣站，河南信陽 464031；2.河南省信陽市水產科學研究所，河南信陽 464031

黃緣閉殼龜（Cuora flavomarginata），別名黃緣盒龜，俗稱夾板龜、斷板龜、金頭龜、黃板龜等，主要分布于我國的大別山山區、皖南山區、臺灣島及日本琉球群島等地，為珍稀瀕危動物。由于生態環境的破壞和人類的大量捕捉，其野生資源非常貧乏，因此開展人工孵化是解決黃緣閉殼龜群體恢復和數量增加的有效措施。

1 材料與方法

1.1 人工孵化設備設施和準備

孵化房間面積為28 m2，具有良好的保濕保溫效果，內裝有空調、排氣扇、自動檢測溫濕度的設備。孵化箱為規格50 cm×50 cm×40 cm的底部及箱壁有通氣孔的泡沫箱若干個，孵化基質為直徑0.4～0.6 cm的膨化蛭石。房間內另配有溫度計、濕度計、淋水器、水桶等生產工具。

在產卵期開始前半個月，將孵化房間徹底清掃并采取全室噴灑二氧化氯的方式進行殺菌消毒，孵化箱用高錳酸鉀進行浸泡后曝曬，將孵化基質進行曝曬消毒，最大限度營造無菌環境。

1.2 人工孵化龜卵的來源

親龜來自2006年信陽本地山區的野生個體，人工飼養至今。龜體質健壯、體型飽滿、無病無傷、活潑好動，全部達到性成熟。龜齡為20～30齡，產卵12年以上，其中雌龜68只，平均重量為925 g/只；雄龜26只，平均重量為650 g/只。雄龜與雌龜在每年4月下旬至7月中旬分開飼養，待雌龜結束產卵后合并在一起飼養，雌雄親龜均自然交配，自然產卵。雌龜從2018年5月14日至7月19日所產龜卵為本次試驗材料。

1.3 黃緣閉殼龜親龜的飼養與管理

于2018年4月28日的晴天上午，將親龜從越冬池內移到消過毒的飼養池內，雌雄親龜分開飼養。龜池均建在環境安靜、背風向陽的地方，池長12 m，池寬5 m，池高0.6 m，池壁光滑，由水泥和磚塊建成，并附有防逃沿。池底平整，由泥土建成，呈緩坡狀，坡度10°左右。池內植有喬木和灌木，有常青落葉植被，占池內總面積的2/3。龜池建有龜休息區、產卵場、飲水洗澡區、活動區等不同的功能區，整個養殖區域模擬仿生態的自然環境建設。投喂嚴格按照“四定”的要求，用浙江產的“海昌”牌金龜料、鮮蝦、西紅柿、胡蘿卜、南瓜和珠海“康益達”牌龜鱉多蛋素等原料按照一定比例配比而成的餌料（1%～3%的日餌率），于每天15:00～17:00放入投飼盤內投喂，1 h左右吃完為宜。每天對飲水洗澡區進行清理，并及時注入新水，保證水質符合漁業養殖用水標準。每天早、中、晚對龜池巡視，觀察龜的攝食、交配、產卵等活動，保持良好的生態環境，防止敵害生物的入侵、龜的逃逸，檢查龜體有無病傷，及時發現疾病并準確診斷對癥下藥，認真做好生產日志記錄。親龜從2018年4月28日移出室外飼養至2018年11月15日進入越冬房冬眠，全年室外生產管理共計185 d。

1.4 龜卵的收集及人工孵化

黃緣閉殼龜的最適產卵氣溫是25～33℃，信陽地區為5月中旬至7月中旬，其中6月為產卵高峰期。在產卵開始前，先將產卵場中25 cm厚的細沙徹底翻動一遍，然后噴灑適量的水，使沙層的含水量保持在7%左右。黃緣閉殼龜通常在傍晚產卵，管理人員應每天傍晚時觀察雌龜的產卵情況，確定產卵位置。第2天清晨，在產卵場找到產卵窩后，輕輕扒開卵窩上的沙土，將龜卵小心取出輕放在盛卵器中，放置龜卵時要避免龜卵的滾動、撞擊、擠壓、陽光直射等。采卵結束后，整理好產卵場，做好產卵記錄。黃緣閉殼龜親龜從5月14日產卵開始至7月19日結束，共產卵89窩，收集龜卵232枚。

孵化前，在每個泡沫箱內裝入4 kg蛭石，并按照每千克蛭石淋入0.7 kg純凈水的比例調配好。當龜開始產卵時，每天09:00左右將收集到的龜卵放入孵化箱后，在箱體上用記號筆標注產卵日期、產卵池號、窩數、卵編號等。為了便于觀察龜卵的發育情況，2018年采用了半裸露孵化法進行孵化。人工操作時，將受精卵的動物極向上，沒有顯現受精的卵可隨意平放，輕輕覆上基質，使龜卵面的中央部分約1/6裸露在空氣中，然后蓋上箱蓋。在整個孵化過程中，孵化箱不采取任何加溫加濕措施，使龜卵在房間中正常孵化直至破殼出苗。

在孵化過程中，不得隨意翻動受精卵，否則會造成胚胎死亡。室內空氣干燥時，及時向空氣中噴灑水霧，使室內的濕度在孵化期內始終保持在75%～95%。每天早、晚各巡視1次，檢查濕度、溫度、空氣流通性、受精卵發育、破殼出苗等情況，及時清除霉變、壞死及未受精的卵，防止蛇、鼠等敵害生物的危害，并做好孵化記錄。

1.5 稚龜的收集

受精卵發育到第六胚胎期時，胎體各器官基本發育成形，對于外界刺激開始有反應，即將破殼時，稚龜用喙輕啄蛋殼，啄出小洞再逐漸擴大，經過1～2 d可破殼而出。破殼后，稚龜會迅速鉆入蛭石中。第2天取出稚龜，放入20 g/m3的高錳酸鉀溶液中浸泡10 min，隨后將清洗過的稚龜，按照50只/m2的密度放入消過毒的稚龜飼養箱中進行飼養管理。對于少量卵黃囊吸收不徹底的稚龜，放入無菌器具中，1～3 d后卵黃囊可自行吸收干凈。

2 結果與分析

黃緣閉殼龜個體雌龜68只，雄龜26只，產卵期為2018年5月14日至2018年7月18日，孵化從2018年5月14日開始到2018年9月28日結束。孵化期內，孵化室內空氣平均濕度為83.6%，空氣平均溫度為29.1℃，龜卵孵化的有效積溫為2 062～2 308（℃·d）。黃緣閉殼龜親龜產卵及受精孵化情況見表1。

表1 黃緣閉殼龜親龜產卵及受精孵化情況

3 討論

3.1 親龜產卵率分析

本次試驗中，68只黃緣閉殼龜雌龜共產卵232枚，每只雌龜年平均產卵3.41枚，年產1～3次，每次1～4枚，說明其自身的產卵量并不是很大，這除了與自身的遺傳產卵因子有決定性的關系外，還與親龜的培育情況、生產管理等其他因子有關。因此，可以從以下幾個方面來提高黃緣閉殼龜的產卵量：①養殖場應選在安靜、向陽、避風、有良好的水源地、交通便利、用電方便的地方，養殖區域模擬野外仿生態的生存環境；②在人工養殖中，可在飼料配比中加入促進產卵和生長的添加劑，投喂鮮活蚯蚓、青蝦、果蔬等，保證食物的多樣、營養、均衡，滿足其生理需求，提高卵子的數量及質量；③黃緣閉殼龜的卵泡在卵巢中發育不是同步的，卵的大小差別大，卵分1～3次產出。當冬眠結束后，可提升養殖環境的溫度，保證其進食良好，快速恢復體質，使龜達到產卵狀態，延長產卵期，增加龜產卵頻次。

3.2 龜卵受精率分析

本次試驗雌龜共產卵232枚，受精卵171枚，受精率為73.71%，受精率較低，有幾個方面的原因：一是黃緣閉殼龜自身的背部隆起較高，雄龜在交配時不易和雌龜充分接觸，身體常因失去平衡而從雌龜背上滑下，并且雄龜的射精與雌龜的排卵不同步；二是雄龜與雌龜的配比是1∶2.6，雄龜數量過少；三是這批親龜人工飼養時間較長，已達10年以上，由于環境、飼料等生態因子不盡合理，造成了雄龜精子活力的下降，從而影響了龜卵受精率。綜上，我們可采取以下措施來提高受精率：①合理搭配雄龜和雌龜的配比，調整雄雌比例為1∶1左右，提高交配率。同時，保證龜池內個體的穩定性，不要隨意引進新龜。②加強雄龜的培育。營造良好的仿生態環境，合理投喂全價飼料，做好疾病的診治和預防，保證雄龜擁有健壯的體質。③親龜交配后，將雌龜、雄龜分開飼養，或將性成熟的雌龜與上一年性成熟的未交配的雄龜進行交配。

3.3 人工孵化率分析

本次試驗受精卵共171枚，孵化出苗151只，孵化率為88.3%，仍有提高的空間。孵化過程中，出現了弱精蛋發育停止、炸裂蛋、提前破殼、不破殼和受精卵霉變等現象，對孵化率造成了一定的影響。發生這些現象有以下幾個原因：一是雄龜的體質不夠強壯，精子活力不強，致使卵子出現不受精或弱精現象；二是受精卵在室內自然孵化，較易受外界溫度、濕度等因子變化的影響；三是工作人員的生產管理操作不夠規范，造成受精卵的受傷、滾動、破損、細菌感染等情況的發生。因此，提高孵化率應從以下幾個方面著手：①培育優質的親龜。通過提供適宜的仿生態環境、營養全面的飼料供給、精細化的管理來保證動物生長生存的福利需求，增強親龜體質。②龜卵的孵化過程中，溫度和濕度是2個關鍵因素。室內可安裝控溫加熱裝置和濕度控制裝置，根據龜卵胚胎發育期對溫度、濕度的不同要求，人為地加以精準控制，使溫度穩定在23～33℃，基質的含水量在60%～80%之間，空氣的相對濕度在75%～95%之間，同時保持室內相對通風，這些措施有利于胚胎的正常發育。③做好孵化時的日常管理。每天早晚巡查1次，孵化過程中不要翻動受精卵，保持適宜的溫度和濕度，及時清除霉變或壞死的卵，防止蛇、鼠、螞蟻等敵害生物的危害，并做好日常孵化記錄。