循環腫瘤細胞對非小細胞肺癌術后復發轉移的預測價值

吳曉明，劉淵源，陳家令

河南省胸科醫院胸外科，鄭州4500000

在人類所有惡性腫瘤中，肺癌的增長尤其迅速，已成為全球第一大腫瘤，發病率和病死率均居首位，成為嚴重的公共健康問題[1]。按病理分型，肺癌可分為非小細胞肺癌和小細胞肺癌，前者占85%左右[2]。由于肺癌早期癥狀缺乏特異性，多數患者確診時已處于中晚期，一般錯過了手術切除治療時機。研究表明，早期肺癌患者術后仍有近27%死于復發轉移[3]。因此，有效預測肺癌的復發轉移在其臨床治療中具有重要意義。腫瘤轉移是造成腫瘤患者死亡的主要原因，血液循環和淋巴循環是腫瘤轉移的主要途徑，腫瘤細胞進入血液循環或淋巴循環，即為循環腫瘤細胞，進而形成轉移灶。國內外研究結果表明，相較于影像學檢查和組織病理學檢查，循環腫瘤細胞檢測在評估惡性腫瘤中具有顯著優勢[4]。本研究分析了循環腫瘤細胞對非小細胞肺癌術后復發轉移的預測價值，現報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選擇2015年5月至2016年5月于河南省胸科醫院接受手術治療的120例非小細胞肺癌患者為研究對象。納入標準：①均經組織病理學檢查確診為非小細胞肺癌；②年齡≥18歲；③預計生存期＞3個月。排除標準：①合并嚴重肝腎功能異常的患者；②妊娠期患者；③合并糖尿病的患者；④合并其他惡性腫瘤的患者；⑤有移植器官的患者。120例患者中，男72例，女48例；年齡36～68歲，平均（48.8±9.6）歲；鱗癌82例，腺癌38例。本研究經醫院醫學倫理委員會審批通過，所有患者均對本研究知情并簽署知情同意書。

1.2 檢測方法

循環腫瘤細胞的檢測方法：①樣本采集。采集4 ml全血樣本，置于乙二胺四乙酸（ethylene diamine tetraacetic acid，EDTA）抗凝管中，上下顛倒充分混勻，置于4℃冰箱中保存。24 h內對樣本進行檢測。②富集樣本。采取密度梯度離心法對樣本進行富集，用商品化分離液將血液標本加入惰性梯度介質中進行離心沉降。根據樣本中細胞密度的差異，對離心后的各種細胞成分進行分層，由下向上依次為紅細胞、中性粒細胞、分離液、單個核細胞（包括循環腫瘤細胞）和血漿。使用Onco Quick帶有多孔篩的離心管盛裝樣本。③循環腫瘤細胞檢測。使用循環腫瘤細胞檢測分析系統對樣本中的循環腫瘤細胞數量進行統計。根據術后循環腫瘤細胞測量值將120例非小細胞肺癌患者分為兩組，測量值≥1為A組，測量值=0為B組。

1.3 觀察指標

比較術前和術后非小細胞肺癌患者的循環腫瘤細胞測量值及A組和B組患者的復發轉移率。觀察并比較復發轉移和未復發轉移患者的性別、年齡、手術時間、TNM分期、分化程度及術后循環腫瘤細胞測量值。分析非小細胞肺癌患者術后復發轉移的影響因素及其與復發轉移的相關性。

1.4 隨訪方法

所有患者均隨訪2年，統計患者的復發轉移情況，隨訪截止時間為2018年5月。隨訪方法為電話隨訪及門診隨訪。

1.5 統計學方法

采用SPSS 18.0軟件對數據進行統計分析，計量數據以均數±標準差（±s）表示，組間比較采用t檢驗；計數資料以例數和率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗。多因素分析采用Logistic回歸分析，相關性分析采用Pearson相關分析。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 術前和術后循環腫瘤細胞測量值的比較

術后120例非小細胞肺癌患者的循環腫瘤細胞測量值為（11.65±10.55）/ml，明顯低于術前的（33.25±32.85）/ml，差異有統計學意義（t=9.08，P＜0.01）。

2.2 A組和 B組患者復發轉移率的比較

根據術后循環腫瘤細胞測量值，A組75例（62.5%，75/120）患者，復發轉移率為64.0%（48/75）；B組45例（37.5%，45/120）患者，復發轉移率為35.6%（16/45）。B組患者的復發轉移率明顯低于A組，差異有統計學意義（χ2=9.68，P＜0.01）。

2.3 復發轉移和未復發轉移非小細胞肺癌患者臨床特征的比較

復發轉移和未復發轉移非小細胞肺癌患者的性別、年齡和手術時間比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）。復發轉移和未復發轉移非小細胞肺癌患者的TNM分期、分化程度和術后循環腫瘤細胞測量值比較，差異均有統計學意義（P＜0.05）。（表1）

表1 復發轉移和未復發轉移非小細胞肺癌患者臨床特征的比較

2.4 非小細胞肺癌患者術后復發轉移影響因素的多因素分析

以術后循環腫瘤細胞測量值、TNM分期、分化程度為自變量，以術后復發轉移為因變量進行Lo-gistic回歸分析，結果顯示，術后循環腫瘤細胞測量值≥5/ml、TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期和分化程度為中低分化均是非小細胞肺癌患者術后復發轉移的獨立危險因素（P＜0.01）。（表2）

表2 120例非小細胞肺癌患者術后復發轉移影響因素的多因素Logistic回歸分析

2.5 相關性分析

Pearson相關性分析結果顯示，非小細胞肺癌患者術后循環腫瘤細胞測量值、TNM分期與腫瘤復發轉移呈正相關（r=4.181、3.792，P＜0.05），分化程度與腫瘤復發轉移呈負相關（r=-3.374，P＜0.05）。

3 討論

研究表明，腫瘤細胞可通過血液和淋巴結轉移后形成轉移灶，手術治療后血液中的殘余腫瘤細胞可能是造成腫瘤復發轉移的重要因素[5]。非小細胞肺癌是肺癌最主要的類型，盡管近些年腫瘤防治水平明顯提高，但肺癌患者的5年生存率仍較低，術后復發轉移是造成患者死亡的主要原因。國內外的研究指出，與病理組織學檢查比較，液體活檢在疾病的診斷和預測中具有更明顯的優勢[6-8]。動態監測循環腫瘤細胞對惡性腫瘤患者的療效評估和復發預測具有重要的參考價值。循環腫瘤細胞檢測的樣本更容易獲取，且能夠反復取樣，因此在臨床上具有廣泛的應用前景[9]。

研究表明，健康人的血液中也有循環腫瘤細胞，數量為（0.05±0.26）/7.5 ml，而乳腺癌、直腸癌和前列腺癌患者外周血中循環腫瘤細胞檢出≥2/7.5 ml時，出現轉移的風險較大，由此可以看出循環腫瘤細胞可能在腫瘤的復發轉移過程中發揮重要作用[10]。本研究檢測了術前和術后非小細胞肺癌患者的循環腫瘤細胞數量，結果顯示，術后非小細胞肺癌患者的循環腫瘤細胞測量值明顯低于術前（P＜0.01）。在已有的報道中，直腸癌、卵巢癌、前列腺癌患者中也獲得同樣的結果[11]。循環腫瘤細胞是指惡性腫瘤從原發部位脫落進入血液循環，本研究結果表明，術后循環腫瘤細胞測量值≥1的患者的復發轉移率明顯高于循環腫瘤細胞測量值=0的患者，說明循環腫瘤細胞與非小細胞肺癌患者術后復發轉移具有一定的關系。本研究結果還表明，復發轉移和未復發轉移非小細胞肺癌患者的TNM分期、分化程度和術后循環腫瘤細胞測量值比較，差異均有統計學意義（P＜0.05）。林赟等[12]研究納入100例非小細胞肺癌患者，隨訪2年后，復發轉移53例，未復發轉移47例，復發轉移與未復發轉移患者的TNM分期、分化程度和循環腫瘤細胞測量值比較，差異均有統計學意義（P＜0.05），與本研究結果一致。TNM分期越高表示腫瘤進展速度越快，是術后復發轉移的危險因素。有研究指出，非小細胞肺癌的分化程度越低，腫瘤細胞的形態結構越差，與正常細胞的差異越大，惡性程度越高，分化程度低是非小細胞肺癌患者術后復發的危險因素[13]。本研究多因素Logistic回歸分析結果表明，術后循環腫瘤細胞測量值≥5/ml、TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期和分化程度為中低分化是非小細胞肺癌患者術后復發轉移的獨立危險因素（P＜0.01）。相關性分析結果表明，非小細胞肺癌患者術后循環腫瘤細胞測量值、TNM分期與腫瘤復發轉移均呈正相關，分化程度與腫瘤復發轉移呈負相關（P＜0.05）。循環腫瘤細胞是一種量化性指標，能夠幫助臨床醫師對患者的治療效果和預后做出判斷，從而制訂針對性的預防及治療策略。

綜上所述，非小細胞肺癌患者術后循環腫瘤細胞測量值明顯降低，且與腫瘤復發轉移呈正相關，對預后評估具有重要的指導價值。因此，可將循環腫瘤細胞測量值作為評估非小細胞肺癌患者術后復發轉移的重要參考依據。