實時熒光定量PCR技術檢測妊娠晚期GBS感染的臨床價值分析△

蕭君明 尹青霞 黃婉婷

(中山市橫欄醫院檢驗科 中山 528478)

B型鏈球菌(GBS)為條件致病菌，寄生在機體泌尿生殖道與下消化道，是新生兒與孕產婦感染的主要細菌之一[1]。孕婦感染GBS后易出現宮內感染、胎膜早破等，經垂直傳播引起新生兒腦膜炎、敗血癥等，危害性極大。細菌培養法是診斷GBS的金標準，因孕婦生殖道中存在多種細菌，培養基會抑制GBS生長，易出現漏診，且耗時長，易貽誤治療時機[2]。實時熒光定量PCR檢測具有敏感度高、檢測時間短等優勢，可快速、準確的獲得GBS結果，逐漸被應用于GBS篩查中。本研究旨在分析實時熒光定量PCR技術檢測妊娠晚期GBS感染的臨床價值，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2018年1月～12月在我院產檢的200例單胎初產婦，年齡23～38歲，平均年齡(32.21±2.21)歲；孕周35～37周，平均孕周(36.01±0.22)周。納入標準：取樣本前未接受局部或全身使用抗生素，并未使用過洗液與過栓劑；無妊娠合并甲狀腺疾病或糖尿病；簽署知情同意書；心、腎等重要器官正常。排除標準：陰道分泌物涂片太少或太厚，染色、固定不良；合并滴蟲性陰道炎、外陰陰道假絲酵母菌病、衣原體感染、粘液濃性宮頸炎等其他陰道感染。

1.2 方法

先將外陰分泌物擦去，用無菌窺器將陰道暴露，將無菌拭子插入陰道下1/3處，旋轉1周采集陰道分泌物，取2份樣本。將陰道拭子接種血瓊脂平皿，并在35℃、10%CO2環境下孵育24～48h。使用普通細菌培養法和實時熒光定量PCR法檢測GBS，嚴格按照試劑盒說明書實施操作。陰道分泌物中有一項檢出GBS即為攜帶者。

1.3 觀察指標

(1)記錄入組孕婦GBS攜帶情況；(2)分析細菌培養法與實時熒光定量PCR法檢測GBS陽性率；(3)觀察GBS陽性與陰性者母嬰妊娠結局。

1.4 統計學方法

采用SPSS21.0統計軟件，n(%)表示計數資料，行χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 孕婦GBS攜帶情況

200例孕婦GBS攜帶率為10.50%(21/200)。

2.2 細菌培養法與實時熒光定量PCR法檢測GBS陽性率

實時熒光定量PCR法檢測GBS陽性率明顯高于細菌培養法，差異有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 細菌培養法與實時熒光定量PCR法檢測GBS攜帶情況對比[n(%)]

檢測方式例數陽性陰性細菌培養法2008(4.00)192(96.00)實時熒光定量PCR法20021(10.50)179(89.50)χ26.283P0.012

2.3 妊娠結局

2.3.1孕婦不良妊娠發生情況

GBS陽性組孕婦不良妊娠總發生率高于GBS陰性組，差異有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 GBS陽性組與陰性組產婦不良妊娠對比[n(%)]

組別胎兒窘迫宮內感染早產胎膜早破產后出血合計GBS陽性組(n=21)2(9.52)3(14.29)2(9.52)3(14.29)2(9.52)12(57.14)GBS陰性組(n=179)10(5.59)6(3.35)6(3.35)9(5.03)7(3.91)38(21.23)χ20.0542.9940.6041.4510.38112.929P0.4720.0840.4370.2280.5370.000

2.3.2新生兒出生情況

GBS陽性組新生兒不良結局發生率高于GBS陰性組，差異有統計學意義(P<0.05)，見表3。

表3 GBS陽性組與陰性組新生兒出生情況對比[n(%)]

組別新生兒窒息新生兒感染新生兒低體質量肺炎合計GBS陽性組(n=21)1(4.77)3(14.29)3(14.29)2(9.52)9(42.86)GBS陰性組(n=179)2(1.12)8(4.47)6(3.35)7(3.91)23(12.85)χ21.6901.8522.9940.38110.459P0.1940.1740.0840.5370.001

3 討論

妊娠期體內孕激素與雌激素水平升高、陰道pH值改變、糖原含量增加、免疫功能低下等會誘發陰道菌群失調，增加GBS繁殖風險[3]。GBS是一種革蘭陽性兼性厭氧球菌，正常部位生長的GBS可逆行至胎盤，經炎癥細胞吞噬作用分泌蛋白水解酶，降解胎膜蛋白，侵襲胎膜，誘發胎膜早破，并可經母嬰垂直傳播，引起陰道感染、子宮內感染等[4～5]。本研究中，GBS陽性組孕婦不良妊娠總發生率、新生兒不良結局發生率高于GBS陰性組，提示GBS感染會增加母嬰不良妊娠結局的發生。因此，早期準確診斷，指導臨床實施干預措施意義重大。

細菌培養法是臨床篩查GBS的常用手段，但其具有敏感度差、耗時長、干擾多、陽性率低、重復性差等優缺點，臨床應用受到一定的限制。本研究中，200例孕婦GBS攜帶率為10.50%(21/200)，實時熒光定量PCR法檢測GBS陽性率明顯高于細菌培養法，提示實時熒光定量PCR可有效檢測GBS感染，利于臨床早期實施措施干預，提高母嬰結局。實時熒光定量PCR技術具有敏感度高、準確度高等優勢，可在10～100min內獲得檢測結果，可動態反映病毒突變、復制情況，預測抗病毒治療效果，與傳統PCR檢測相比，無需通過PCR后處理，操作簡單便捷，可避免人為判斷，結果更客觀[6]。

綜上所述，妊娠晚期GBS感染會增加宮內感染、胎膜早破、新生兒感染等不良結局的發生，實時熒光定量PCR可快速準確篩查GBS，指導臨床早期預防性使用抗生素治療，對改善母嬰分娩結局起到關鍵性作用。