自體疣包埋療法聯(lián)合ALA-PDT治療外陰部尖銳濕疣的療效分析

黃邦高 徐智慧 王彥彬 諸靖宇 李軍華

尖銳濕疣是由人乳頭瘤病毒（HPV）感染引起的一種常見的性傳播疾病。近年來(lái)，我國(guó)尖銳濕疣發(fā)病率逐年升高，占性傳播疾病的第3位[1]。自體疣包埋療法是一種免疫療法，通過(guò)自體疣包埋使疣體與機(jī)體免疫系統(tǒng)接觸，激發(fā)機(jī)體針對(duì)HPV的細(xì)胞免疫反應(yīng)，有利于機(jī)體打破對(duì)HPV的免疫耐受，降低尖銳濕疣復(fù)發(fā)率。光動(dòng)力療法是通過(guò)光敏劑特異性地積聚在病變組織，并結(jié)合相應(yīng)波長(zhǎng)的激光照射來(lái)激發(fā)光敏劑的光化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生多種活性氧，選擇性地殺傷生物細(xì)胞而達(dá)到治療目的。本研究對(duì)3組外陰部尖銳濕疣患者分別采用自體疣包埋療法聯(lián)合鹽酸氨基酮戊酸光動(dòng)力療法（ALA-PDT）、單純自體疣包埋療法、單純ALA-PDT治療，觀察并比較3組患者免疫系統(tǒng)變化及臨床療效，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 對(duì)象和方法

1.1 對(duì)象 選取90例會(huì)陰部尖銳濕疣患者為研究對(duì)象，其中杭州市第三人民醫(yī)院70例，浙江省人民醫(yī)院20例。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）皮損原發(fā)于會(huì)陰部皮膚；（2）經(jīng)HPV-DNA 檢測(cè)為尖銳濕疣；（3）無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；（4）簽署知情同意書。排除有嚴(yán)重光過(guò)敏反應(yīng)者。將90例患者按抽簽法隨機(jī)分成3組，每組30例，分別采用自體疣包埋療法聯(lián)合ALA-PDT（A組）、單純自體疣包埋療法（B組）、單純ALA-PDT（C組）治療。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批通過(guò)。

1.2 方法

1.2.1 主要材料及設(shè)備 0.25%氯霉素溶液（0.25g氯霉素針劑溶于100ml 0.9%氯化鈉溶液），外用ALA（118mg/瓶，上海復(fù)旦張江生物醫(yī)藥股份有限公司）；XD-635AB型光動(dòng)力激光治療儀（桂林市興達(dá)光電醫(yī)藥器械有限公司）。

1.2.2 自體疣包埋療法 患者新鮮疣體常規(guī)消毒、局麻，使用蚊式鉗夾住疣體基底部，手術(shù)刀切取約米粒大小的濕疣組織1個(gè)，壓迫止血。將分離的濕疣組織浸泡在0.25%氯霉素溶液中備用。患者左上臂三角肌區(qū)常規(guī)消毒、局麻，使用手術(shù)刀縱向切開皮膚1cm左右，深達(dá)淺筋膜。將浸泡在0.25%氯霉素溶液中的濕疣組織取出，用0.9%氯化鈉溶液沖洗后，小心置入切口，埋置于皮下組織，注意勿觸及上皮。縫合皮膚切口，局部用無(wú)菌紗布包扎。予抗生素口服3d，術(shù)后10d拆線。

1.2.3 ALA-PDT 使用滅菌0.9%氯化鈉溶液清洗皮損部位，新鮮配制的20%ALA均勻涂在皮損部位及其周圍2cm皮膚，塑料薄膜封包3h，使用波長(zhǎng)為635nm的光動(dòng)力激光治療儀照射，選擇最大輸出功率150mW，根據(jù)光斑大小及照射時(shí)間計(jì)算激光照射總能量，使其達(dá)60～100J/cm2。7～10d重復(fù)治療1次，共治療5次。

1.2.4 觀察指標(biāo) （1）治療前及治療1、3、6個(gè)月時(shí)外周血T淋巴細(xì)胞亞群（CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞）及血清免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）水平，計(jì)算 CD4+/CD8+。（2）治療后6個(gè)月HPV復(fù)發(fā)率：采用局部皮損HPV-DNA檢測(cè)及光敏試驗(yàn)檢查復(fù)發(fā)情況。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料用表示，兩組比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 尖銳濕疣患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群及血清免疫球蛋白水平與正常參考值比較 90例外陰部尖銳濕疣患者外周血CD4+T淋巴細(xì)胞百分比、CD4+/CD8+以及血清 IgG、IgA、IgM 水平分別為（30.86±5.42）%、1.12±0.21和（7.53±0.82）、（1.17±0.32）、（0.97±0.38）g/L，均低于正常參考值；CD8+T淋巴細(xì)胞百分比為（35.26±5.51）%，高于正常參考值。

2.2 3組患者治療前后外周血T淋巴細(xì)胞亞群及血清免疫球蛋白水平變化 與治療前比較，治療后1、3、6個(gè)月時(shí)3組患者外周血CD4+T淋巴細(xì)胞百分比、CD4+/CD8+以及血清IgG、IgA、IgM水平均明顯升高，CD8+T淋巴細(xì)胞百分比明顯下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。A組患者治療后1、3、6個(gè)月CD4+T淋巴細(xì)胞百分比、CD4+/CD8+以及血清IgG、IgA、IgM水平均高于B、C組，CD8+T淋巴細(xì)胞百分比均低于B、C組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）；B組患者治療后1、3、6個(gè)月外周血CD4+T淋巴細(xì)胞百分比、CD4+/CD8+以及血清IgG、IgA水平均高于C組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），見表 1。

表1 3組患者治療前后外周血T淋巴細(xì)胞亞群及血清免疫球蛋白水平變化

2.3 3組患者治療后6個(gè)月HPV復(fù)發(fā)率比較 經(jīng)治療后，所有患者去除疣體。A組患者治療后6個(gè)月HPV復(fù)發(fā)率為0，低于B組的10.0%和C組的16.7%，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。

3 討論

尖銳濕疣是臨床上常見的性傳播疾病，具有傳染性強(qiáng)、復(fù)發(fā)率高等特點(diǎn)[2]。加上患者感染HPV后，機(jī)體免疫功能出現(xiàn)紊亂，會(huì)導(dǎo)致尖銳濕疣的病情延長(zhǎng)，增加治愈難度[3]。因此，選擇合適的治療方法具有重要意義。自體疣包埋療法是一種主動(dòng)免疫療法，將含有大量HPV顆粒的疣組織移植于患者皮下組織，疣體分解后，緩慢釋放大量HPV抗原，刺激機(jī)體產(chǎn)生針對(duì)HPV的特異性免疫反應(yīng)，增強(qiáng)患者的免疫功能[4]。Usman等[5]從血清免疫球蛋白水平及T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)等方面進(jìn)行評(píng)價(jià)，發(fā)現(xiàn)自體疣包埋療法能增強(qiáng)尖銳濕疣患者的機(jī)體細(xì)胞免疫及體液免疫功能。ALA-PDT是一種安全、有效的新型治療方法。外源性ALA能被疣體及周圍受HPV感染的組織選擇性地吸收，經(jīng)特定波長(zhǎng)紅光照射后發(fā)生光敏反應(yīng)，產(chǎn)生活性氧而殺死受感染的細(xì)胞，對(duì)周圍正常組織損傷輕微[6]。此外，ALA-PDT對(duì)尖銳濕疣的效果也可能與誘導(dǎo)機(jī)體局部產(chǎn)生免疫反應(yīng)有關(guān)[7-8]。

相關(guān)研究表明，尖銳濕疣患者機(jī)體細(xì)胞免疫及體液免疫功能受到抑制[9-10]。而CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、CD4+/CD8+及免疫球蛋白是衡量細(xì)胞免疫及體液免疫功能的主要指標(biāo)。本研究采用3種療法治療外陰部尖銳濕疣，觀察并比較3組患者治療前后外周血CD4+T淋巴細(xì)胞百分比、CD8+T淋巴細(xì)胞百分比、CD4+/CD8+以及血清IgG、IgA、IgM水平，結(jié)果顯示自體疣包埋療法聯(lián)合ALA-PDT治療外陰部尖銳濕疣的患者，其細(xì)胞免疫及體液免疫功能較單純自體疣包埋療法及單純ALA-PDT治療的患者均明顯增強(qiáng)；且單純自體疣包埋療法的療效優(yōu)于單純ALA-PDT。進(jìn)一步比較術(shù)后6個(gè)月HPV復(fù)發(fā)率，結(jié)果顯示自體疣包埋療法聯(lián)合ALAPDT治療組明顯低于其他兩組。這說(shuō)明自體疣包埋療法聯(lián)合ALA-PDT治療外陰部尖銳濕疣能提高患者機(jī)體細(xì)胞免疫及體液免疫功能，并降低HPV復(fù)發(fā)率，其療效優(yōu)于單一療法。

綜上所述，自體疣包埋療法聯(lián)合ALA-PDT治療外陰部尖銳濕疣的療效明顯，能增強(qiáng)患者機(jī)體免疫功能，降低HPV復(fù)發(fā)率，可作為臨床上治療外陰部尖銳濕疣的首選方案。