孤獨癥兒童血清中腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子和S100B蛋白的檢測及意義

馬菲， 任亮， 陳素環(huán)

兒童孤獨癥是一種以社會交往缺陷、語言交流障礙、狹窄的興趣范圍及重復刻板行為為特征的廣泛性神經(jīng)發(fā)育障礙性疾病。目前全球孤獨癥患病率約為1/68，且呈現(xiàn)逐年上升的趨勢[1]。自從20世紀40年代首次報道兒童孤獨癥以來，經(jīng)過七十余年的探索，人們已經(jīng)明確了兒童孤獨癥主要的行為特征和診斷標準，但其病因至今未明，同時也缺乏特效的治療藥物。

腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(brain derived neurotrophic factors，BDNF)是腦內分布最廣的神經(jīng)營養(yǎng)因子，主要分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，以皮質區(qū)和海馬區(qū)含量為最高。BDNF主要參與中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)元的生長、發(fā)育、分化、再生以及修復，維持成熟神經(jīng)元功能，防止神經(jīng)元壞死及凋亡[2]。S100B來自S100蛋白家族，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的少突膠質細胞、星形膠質細胞等神經(jīng)膠質細胞呈現(xiàn)高表達。S100B蛋白可與炎性細胞、神經(jīng)細胞、少突膠質細胞等結合，發(fā)揮細胞內、外的調節(jié)功能，參與炎癥相關的趨化活性、神經(jīng)營養(yǎng)作用、生血管效應等諸多作用[3]。本研究通過對孤獨癥兒童血清中BDNF和S100B蛋白進行測定，旨在探討其與孤獨癥發(fā)病是否存在相關性。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2016年3月至2017年9月在漯河市殘疾人康復中心參與訓練的孤獨癥患兒35例為研究對象，作為觀察組，其中男22例，女13例；年齡1.5～6.0歲，平均(4.3±0.5)歲；輕度孤獨癥24例，重度孤獨癥11例。同期在漯河市公立幼兒園募集無神經(jīng)、精神疾病史及家族史的健康兒童40例作為對照組，其中男25例，女15例；年齡1.3～6.1歲，平均(4.4±0.6)歲。兩組兒童在性別、年齡方面比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 診斷標準 參照《精神疾病診斷和統(tǒng)計手冊》第5版(DSM-Ⅴ)中兒童孤獨癥的診斷標準；依據(jù)兒童期孤獨癥評定量表對孤獨癥兒童病情進行分級[4]。

1.3 納入標準 (1)符合兒童孤獨癥的診斷標準；(2)年齡1～7歲；(3)患兒家屬知情同意。

1.4 排除標準 (1)患有其他精神疾病或發(fā)育異常，如小兒腦性癱瘓等；(2)治療期間采用藥物治療者；(3)伴心肺等嚴重疾患及其他急慢性傳染病者。

1.5 研究方法 所有兒童均于早晨8點空腹采集肘靜脈血3.0 mL，常溫靜置后以3 000 r/min離心15 min，分離出血清，將溶血標本剔除后-20 ℃保存。血清中BDNF、S100B蛋白的檢測按照說明書的要求，采用酶聯(lián)免疫吸附法進行。

2 結果

2.1 兩組血清中BDNF及S100B蛋白的測定結果 見表1。

表1 兩組血清中BDNF及S100B蛋白的測定結果

注：與對照組比較，at=2.61，P<0.05。

表1結果表明，觀察組血清中BNDF水平顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。兩組血清中S100B蛋白水平比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

2.2 不同病情孤獨癥兒童血清中BDNF及S100B蛋白的比較 見表2。

表2 不同病情孤獨癥兒童血清中BDNF及S100B蛋白的比較

注：與對照組比較，aP<0.05。

表2結果表明，三組血清中BDNF水平比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。其中輕度孤獨癥組血清中BDNF高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；重度孤獨癥組與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；輕、重度孤獨癥組之間比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。三組血清中S100B蛋白水平比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

3 討論

隨著研究的逐步深入，人們對孤獨癥的行為特征及診斷手段取得了重要共識，2013年美國出版的《精神疾病診斷與統(tǒng)計手冊》第5版(DSM-Ⅴ)將孤獨癥譜系障礙歸類為神經(jīng)發(fā)育障礙范疇，但對于該疾病的發(fā)病機制尚不明確，同時也缺乏特效的治療藥物。目前多數(shù)學者多認為孤獨癥是遺傳因素和環(huán)境因素共同作用的結果。有數(shù)據(jù)表明，嚴重空氣污染地區(qū)的孕婦產下孤獨癥患兒的風險是低污染區(qū)孕婦的2倍，這說明空氣污染(如柴油顆粒、汞、鉛、錳、二氯甲烷及復合金屬等污染)可能是是導致孤獨癥的外部因素，而更多研究則傾向于基因功能異常即遺傳因素可能才是導致孤獨癥的主要因素[1]。

自1989年被成功克隆后，人們發(fā)現(xiàn)BDNF與多種神經(jīng)系統(tǒng)疾病的發(fā)生、發(fā)展及治療密切相關[5]。如Shinizu等[6]通過研究發(fā)現(xiàn)，正常人及治療后抑郁癥患者血清BDNF值明顯高于未經(jīng)治療的抑郁癥患者，而更多的研究表明，BDNF的調節(jié)可以參與多種有關抑郁癥行為現(xiàn)象[7]。在阿爾茨海默病患者中，BDNF的表達在海馬及部分皮質層明顯降低[8]，多項研究顯示BDNF在阿爾茨海默病死亡患者及部分老年患者大腦中的表達低于健康人群[9]。本研究對孤獨癥患兒及對照組兒童血清中BDNF進行了測定，結果顯示觀察組血清BDNF水平顯著高于對照組，而在對病情分級后有只有輕度孤獨癥患兒血清BDNF顯著高于對照組兒童，而重度孤獨癥患兒血清BDNF與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義，提示BDNF在孤獨癥病因及病情探索中具有一定的意義。本研究輕度孤獨癥患兒血清中BDNF高于重度患兒，可能是由于孤獨癥患兒腦功能受損后，血清中BDNF表達上調，說明至少在孤獨癥未達到嚴重程度時BDNF的影響，而表達上調到一定階段后，受某種機制影響可能限制了BDNF的表達。

血液中S100B蛋白的水平與顱腦損傷及修復的關系及其在臨床研究多有報道[10]。筆者曾經(jīng)的研究工作亦表明，腦損傷過程及修復與血液中S100B蛋白水平具有相關性，檢測腦脊液或(和)血清中S100B蛋白水平可以作為腦組織損傷的指標之一[11]。Al-Ayadhi等[12]報道了孤獨癥兒童血清中S100B蛋白水平與孤獨癥病情程度缺乏相關性。本研究未測出孤獨癥兒童血清中S100B蛋白水平與孤獨癥病情程度之間的相關性，同時也未得出S100B蛋白在孤獨癥兒童與對照組之間的統(tǒng)計學差異，這可能與孤獨癥病例的樣本數(shù)、類型等諸多因素有關。介于S100B蛋白已經(jīng)作為一種特異性標志物，應用于臨床腦組織損傷及相關疾病的診斷、治療檢測、疾病預后評估等工作，因此S100B蛋白水平與孤獨癥的相關性尚需進一步研究探索。

綜上所述，本研究顯示孤獨癥兒童血清中BDNF水平顯著高于對照組兒童，其中輕度孤獨癥兒童明顯高于對照組兒童，而重度孤獨癥兒童與對照兒童差異無顯著性，提示BDNF與孤獨癥患病發(fā)生、發(fā)展密切相關，但同時可能還受其他因素的影響。本研究中未發(fā)現(xiàn)S100B蛋白水平在孤獨癥患兒及正常兒童之間的差異，也未發(fā)現(xiàn)孤獨癥患兒血清BDNF和S100B蛋白水平在不同病情之間的差異，說明還需要開展進一步的研究工作。