張雪梅 曹院章 祁俊娟 許東保
(北京市朝陽區動物疫病預防控制中心 100018)
隨著北京市朝陽區城鄉經濟社會一體化新格局的發展,城市、村鎮各類要素相互滲透、相互融合,經濟、觀賞、伴侶、實驗、表演等各類動物與人們的生活更加貼近、關系更加密切,加強動物疫病檢疫凈化工作,防止重大動物疫病和人畜共患病傳播對于維護公共衛生安全具有重大意義[1]。本區動物疫病預防控制中心承擔全區重大動物疫病防控工作重任,近幾年,通過采取科學措施,有效防止馬傳染性貧血疫病的傳入和流行,確保本區重大馬術國際賽事的順利舉辦,保障本區馬場的無疫安全。
馬傳染性貧血病毒主要臨床特征包括出血、黃疸、心臟衰竭、浮腫、消瘦、反復發熱及貧血。馬屬動物均易感,其中馬易感性最強,驢、騾次之。該病一旦發生,很難消滅,嚴重威脅我國乃至世界養馬業的安全,我國將其列為二類動物疫病。
2012年9月26 日區動物疫病預防控制中心對蟹島跑馬場進行馬傳貧病檢疫凈化時發現,該場一匹 “康2 號” 馬疑似馬傳貧陽性,10月9日經市疫控中心化驗室復檢,確診為馬傳貧陽性。康2 號馬匹毛色為黑紅色,年齡 7 歲,屬普通馬。跑馬場負責人稱此馬于2012年4月從康西草原購入。到達馬場后7d 隔離后無異常關入馬舍,之后一兩個月內偶爾出現不愛吃食,精神狀態不好,發熱,再后來病馬表現為體溫升高、精神沉郁、后軀無力、食欲減少等癥狀。
馬傳染性貧血病情復雜,慢性型更甚,應根據該病的流行病學、臨床診斷及生物學分析等結果進行綜合分析。在診斷時,具備馬傳貧流行特點、臨床癥狀、病理變化,做出初步診斷,再通過實驗室診斷技術進行確診。對于 “康2 號” 馬在秋防過程中初步診斷已表現出疑似馬傳貧陽性,需進一步實驗室確證。實驗室檢測馬傳染性貧血的方法有瓊脂凝膠免疫擴散試驗 (AGID)、馬傳貧酶聯免疫吸附試驗 (ELISA) 和馬傳貧病原分離鑒定。
本區馬屬動物分布較廣、馬場較多,馬傳染性貧血病疫情一旦發生影響極大。本單位作為區縣級疫病預防控制中心,肩負防治動物疫病和人畜共患病的重任。每年都要對轄區內的所有馬匹進行春季和秋季兩次疫病凈化。本實驗室采用的檢測方法為瓊脂凝膠免疫擴散試驗。
在此著重介紹瓊脂凝膠免疫擴散。反應板的制備:溶化1%~1.2%的瓊脂糖,在無菌操作臺里將溶化的瓊脂糖倒在無菌瓊脂板上,制成厚度約3~4mm 厚的瓊脂糖凝膠板,待冷卻后用打孔器打成梅花形的孔、封板,封板溫度以板底不燙手為宜。檢測:將抗原加在中間孔,抗體分別加入外周三孔中,樣品加在另三孔(如圖1),抗原、抗體和樣品在瓊脂板上相互擴散,在瓊脂中呈現不透明的白色沉淀線或無沉淀線產生。
下面3 張圖為反應后的結果:圖1:3 份樣品均為陰性;圖2:3 份樣品均為陽性,此圖也是 “康2 號” 馬檢測后的結果。



圖3:3 份樣品為可疑樣品。標準陽性血清孔與抗原孔之間的沉淀線末端,似乎向毗鄰受檢血清孔內側偏彎,不易判斷時,可將抗原稀釋2倍、4 倍、6 倍、8 倍進行重新測試,并最終判定結果。觀察時間可延至5d。判定結果時,應從不同折光角度仔細觀察平皿上抗原孔與受檢血清孔之間有無沉淀線。這樣的血清應判為可疑,要重新采集同一匹馬的血清進行重復檢測,最終結合臨床癥狀、病理變化和實驗結果綜合判定。經診斷檢疫確定的陽性馬,應堅決撲殺。
馬傳貧病被國家列為二類動物疫病[2],根據 《中華人民共和國動物防疫法》 規定:發生二類動物疫病時,縣級以上地方人民政府根據需要組織有關部門和單位采取隔離、撲殺、銷毀、消毒、無害化處理等相關措施。疫控中心2012年10月16日上午10 點會同金盞鄉農服中心,按照 《馬傳染性貧血防治技術規范》 規定,將陽性馬在不放血的條件下進行撲殺,撲殺的陽性動物、排泄物等按照國標 《GB 16548-2006 病害動物和病害動物產品生物安全處理規程》 進行深埋。疫控中心給蟹島跑馬場發放了消毒藥品并提出以下要求。
(1)金盞鄉農服中心監督指導蟹島跑馬場對全場進行徹底消毒。
(2)對深埋的動物尸體做好看護工作。
(3)加強重大動物疫病防控的宣傳。
(4)進出境的動物要做好報檢報驗。
(5)發現異常情況按程序立即上報。
從2013年本中心對全區的馬場進行統計調查,并制作了養殖臺賬。在馬場推行官方登記制度,如 《北京動物(動物產品)產地檢疫登記記錄》 《動物防疫消毒記錄》 《無害化處理記錄》 等。建立馬匹 《健康免疫檔案》,并現場指導填寫。為有效預防控制動物疫病,維護公共衛生安全,根據 《動物防疫條件審查辦法》,對馬場進行審查,對符合要求的單位發放《動物防疫條件合格證》。
從2013年初開始,組織開展了本區馬屬動物存欄及流行病學調查,將轄區內役用馬、觀賞用、騎乘用、比賽用等馬屬動物分類造冊,了解掌握馬屬動物存欄和疫病發生情況。本區目前共有馬場17 家,比賽及騎乘用馬832 匹,跨省市流動較為頻繁,另外,每年要舉辦40 余次的國際、國內馬術比賽和馬戲表演,外埠馬匹進入本區較頻繁,針對引進馬匹建立個體檔案,活動區域范圍。如表1、表2 所示。

表1 馬屬動物活動區

表2 馬匹個體檔案
本區負責動物檢疫工作,按照北京市動物疫病預防控制中心關于動物疫病檢疫凈化的要求,組織開展春秋兩次集中動物檢疫凈化工作和全年常態化馬屬動物檢疫凈化工作。
對調出移動的馬匹要開具產地檢疫證明。動物檢疫部門人員應到現場,查看馬場檔案資料和 《馬匹健康免疫證明》,對馬匹進行臨床檢查,只有臨床健康,檢疫和免疫均在有效期,開具 《動物檢疫合格證明》。

表3 本單位近幾年來的檢測結果(單位:匹)
查看馬匹的 《動物檢疫合格證明》和《運載工具消毒證明》 是否有效,檢疫證明是否有公路檢疫站的簽章。對新進馬匹進行隔離一個半月,并進行馬傳染性貧血和馬鼻疽檢測,結果為陰性的方允許混群飼養。如檢疫發現馬傳貧或馬鼻疽陽性,應當立即對病馬進行隔離,撲殺、消毒等措施。
消毒工作是動物防疫工作的重點,為防止動物疫病的發生、傳播,本區為蟹島跑馬場配備了消毒工具和消毒藥品。如菌毒克、二氧化硫、聚維酮碘等,確保徹底消滅傳染源。
對馬場以及旅游騎乘馬活動區域,加強馬鼻疽、馬傳染性貧血等馬屬動物疫病防控。按照中心下移,關口前移的方針,區級動物防疫部門負責防疫條件的審核、疫病的檢疫凈化、流行病學的調查、馬匹進出檢疫出證、發生疫情時的處置、法律法規和疫病防控知識的宣傳培訓等。鄉級動物防疫部門協助上級部門做好轄區內馬場的日常監督管理,掌握基礎數據,落實各項防疫措施,充分發揮村級防疫員的作用,加強日常的巡視,發現異常情況及時上報。
結合國際通行做法和北京市實際情況,將馬傳染病防控區分為核心控制區和免疫緩沖(保護)區,建立馬屬動物隔離場所,采取 “檔案管理” 的工作方式,完善了工作記錄和備賽馬匹的基礎數據調查,實行 “日檢” 制度,加強日常消毒工作,召集駐場人員和志愿者成立疾病診斷小組、應急處置小組、消毒小組和運輸小組,保障應急處理的每個環節均能夠有效落實。對賽時馬匹比賽、賽后馬匹安全返程實施了全過程監管,有力保障了世界汗血馬協會特別大會暨中國馬文化節的各項活動順利進行。
雖然馬傳貧在北京市已經達到消滅標準。但為了有效防止馬匹疫病的傳入、發生和傳播,保障各項馬術比賽和演出的順利舉辦,促進馬術業發展,維護公共衛生安全,作為動物疫病預防控制中心,加強馬場各項防疫措施并落實到位是非常必要的。