中藥當歸多糖的研究進展

謝詩慧

摘? 要：當歸多糖為當歸飲片主要的藥理學活性成分，具有增強免疫、抗氧化、抗腫瘤、抗病毒和造血等多種生物學活性作用。該文主要綜述了當歸多糖的分離提取、純化鑒定、化學修飾及生物學活性研究，為當歸多糖在中藥領域的研究提供理論依據。

關鍵詞：當歸多糖;分離提取;純化鑒定;化學修飾;生物學活性

中圖分類號 S511文獻標識碼 A文章編號 1007-7731（2019）11-0027-3

Abstract：Angelica polysaccharide is the main pharmacological active ingredients of Angelica decoction tablets.And It has enhanced immunity，antioxidant，anti-tumor，anti-virus and hematopoietic and other biological active effects.This paper reviewed? extraction，purification，chemical modification and biological activity of? Angelica polysaccharide and provided a theoretical basis for the research of Angelica polysaccharide in traditional Chinese medicine.

Key words：Angelica polysaccharide;Extraction;Purification;Chemical modification;Biological activity

當歸是傘形科植物當歸[Angelica sinensis （Oliv.） Diels]的干燥根。當歸喜陰涼濕潤氣候，主要產于我國甘肅、云南、四川等地。當歸藥用最早始于《神農本草經》，中醫有“十方九歸”之說，是中醫使用頻率較高的中藥。當歸入肝、心、脾經，藥性甘、辛、溫，具有補血活血、調經止痛、潤燥滑腸等功效[1]。現代藥理研究表明，當歸具有提高免疫、抗腫瘤、造血、抗輻射損傷、抗氧化、鎮痛等多種生理功效[2]。其藥理學活性作用與其藥用成分密不可分，當歸的藥用化學成分主要分為精油和水溶性成分2大部分，精油以藁本內酯、別羅勒烯、苯酚、鄰甲苯酚等為主;水溶性成分主要包括多糖、丁二酸、煙酸、尿嘧啶、腺嘧啶和膽堿等[3]。當歸多糖為當歸飲片水溶性主要成分，具有增強免疫、抗氧化、抗腫瘤、抗輻射、保肝等多種生物學活性[4]。分離提純化的當歸多糖表面含有大量活性集團，這些活性集團可與某些化學試劑進行反應，對當歸多糖進行化學修飾，使當歸多糖的生物學活性作用得以改善或使當歸多糖產生新的生物學活性作用[5]。

1 當歸多糖的提取分離和純化

1.1 提取 當歸多糖為植物活性多糖，中草藥的根莖多含有大量的色素、低聚糖、脂類等物質，提取多糖時需要除去，脂類物質可溶于有機溶劑，因而中藥多糖的提取常用有機溶劑如乙醇、甲醇、乙醚等預先處理脫脂。劉云[6]在提取當歸多糖時曾用石油醚、乙醚除去當歸多糖中的脂類物質，再用85%的乙醇除去低聚糖等物質。預處理過的當歸經烘干后可用水煎醇沉法提取多糖，孫元琳等[7]使用水煎法提取當歸多糖，以反應溫度、時間和水料比例為3個控制條件，設計正交實驗提取當歸多糖，發現在浸提時間為2h、溫度控制在85℃、水料比為10∶1和浸提次數為2次的條件下，其所提取的當歸多糖得率為最佳;張家建[8]也采用控制反應時間、浸提水料比及浸提次數來提取當歸多糖，研究發現其提取的當歸多糖在水料比為8∶1、浸提次數為2次、反應時間為3h時的當歸多糖提取工藝為最佳，經醇沉后其當歸多糖得率為10.40%。當歸多糖為水溶性多糖，不溶于有機溶劑，水煎法提取的當歸多糖經過濃縮后需要用有機溶劑如乙醇醇沉，除去部分色素等雜質，張清勇等[9]用95%的乙醇醇沉當歸多糖，使醇濃度最終達到為80%為止，加入乙醇時需要緩慢加入，并邊加邊攪拌，利于醇沉充分。

1.2 去蛋白 當歸多糖的初步提取物內含大量雜質，需要進一步除雜，其中蛋白質為粗多糖中主要雜質，需要除去。Sevage法除蛋白不會破壞多糖有機物質就可除去多糖中的蛋白類雜質，目前被廣泛使用。如邱麗萍等[10]采用Sevage法除去當歸中的蛋白質，取當歸多糖加1倍水溶解，在分別加入Sevage試劑液，振蕩器上劇烈振蕩20min，2500r離心15min，棄沉淀，合并水相，重復上述步驟5次，既得去蛋白當歸多糖。

1.3 純化 去蛋白當歸可進一步純化，得到純度更高的當歸多糖。孫紅國等[11]對去蛋白當歸多糖進行了純化，首先使用DEAE-52纖維素柱分離純化當歸多糖，分別以蒸餾水、0.2moL·L-1、0.3moL·L-1、0.4moL·L-1、0.5moL·L-1的氯化鈉溶液做洗脫液，硫酸-苯酚法測各試管糖含量，合并糖含量高的試管樣液，再用SephadexG-100色譜柱進行柱層析;孫元琳等[12]對其提取的當歸多糖也進行了純化，用DEAE-SepharoseCL-6B柱（D2.6cm×30cm）層析，其洗脫液為0～1moL·L-1的氯化鈉溶液，硫酸-苯酚法測各試管糖含量，分別收集單一峰值的組的樣液，濃縮，再分別用SepharoseCL-6B柱（D1.6cm×100cm）層析，得純化當歸多糖。

2 當歸多糖的鑒定

當歸多糖為大分子有機化合物，具有其獨特的空間結構，近年來人們利用現代科學技術對當歸多糖的結構進行了深入分析。比如，陳汝賢等[13]利用高效凝膠色譜法分析其提取的X-C-3-Ⅱ當歸多糖的相對分子質量為1.0×105Da，利用氣相色譜法檢測其各單糖組成及其比例，發現其提取的當歸多糖主要由葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、鼠李糖和半乳糖醛酸按照56∶22.1∶18.9∶1.9∶1.1的摩爾比組成;孫元琳等[14-15]對其提取的當歸多糖進行結構分析發現：其提取得當歸多糖（W-ASP-3）主要由Rha、Ara、Man、Glc和Gal按照物質的量之比為1∶5.6∶0.2∶0.5∶13.3的比例構成，GalpA和Rhap位于多糖分子的主鏈上，由1→4-D-GalpA相連的半乳糖醛酸聚糖是其主要組成，由α-（1→4）-GalpA通過O4位與α-（1→2）-和α-（1→2，4）-Rhap O2位交替連接所形成的重復單元[→4）-α-GalpA（1→2）-Rhap-（1→]構成具有較高分支的富含中性糖側鏈的鼠李半乳糖醛酸聚糖。

3 當歸多糖的化學修飾

當歸多糖為植物活性多糖，其表面含有大量的活性集團，易于化學修飾。秦韜[5]運用硝酸-亞希酸鈉法對當歸多糖進行了硒化修飾，通過正交實驗，控制反應溫度、時間和亞硒酸鈉的用量設計硒化修飾9種硒多糖，并對硒化修飾的當歸多糖進行了紅外光譜法檢測試驗，結果表明，硒化修飾的當歸多糖除了具有糖的特征吸收峰外，還含有硒酸脂鍵的振動吸收峰值，提示硒化黨參多糖中存在硒酸酯。說明硒化修飾成功，且硒以有機化學鍵的形式鏈接到當歸多糖表面，形成有機硒多糖。同時，對硒化當歸多糖抗氧化和增強免疫活性作用進行比較研究，發現硒化當歸多糖其抗氧化和增強免疫活性作用均強于當歸多糖。張帆等[16]利用氯磺酸-吡啶法硫酸化當歸多糖，通過響應面法控制氯磺酸-吡啶比例、反應溫度和時間硫酸化修飾當歸多糖，發現氯磺酸-吡啶比例對硫酸化修飾的影響最大。田蘇陽等[17]對其提取的當歸多糖進行了乙酰化、磷酸化、羧甲基化和硫酸化修飾，并分別用紅外光譜法檢測各修飾當歸多糖修飾效果，均發現當歸多糖的化學修飾成功。

4 當歸多糖的生物學活性作用

4.1 增強免疫力 劉永琦等[18]制造了大鼠鎘中毒模型，給予大鼠當歸多糖灌胃治療，通過觀察當歸多糖對鎘中毒的大鼠胸脾指數、脾淋巴細胞的轉化功能、NK細胞的殺傷活性和血清IL-2含量等指標來檢測當歸多糖免疫增強功效，結果顯示，當歸多糖可增加胸脾指數，顯著提高脾淋巴細胞的轉化能力、NK細胞殺傷能力和血清IL-2含量作用，得出當歸多糖具有增強免疫功能和促進大鼠體內鎘代謝功效的作用;Tao Qin等[19]研究發現，硒化修飾的當歸多糖對雞的免疫增強作用，硒化當歸多糖可顯著性促進雞血淋巴細胞的增殖作用和細胞分泌IL-6和IFN-γ細胞因子，提高雞血清新城疫抗體效價水平。

4.2 抗氧化 劉波等[20]通過飼料添加飼喂點帶石斑魚當歸多糖，42d測定血液及肝脾臟中CuZn-SOD、Mn-SOD和CAT酶活性，同時對其抗氧化相關基因CuZn-SOD、Mn-SOD和CAT進行了實時熒光定量PCR測定，結果表明，當歸多糖可顯著降低血液中3種酶活性，顯著提高肝胰臟中3種酶活性，顯著提高3種酶基因表達量，從而得出了當歸多糖具有提高點帶石斑魚抗氧化能力作用。Chao Zhuang等[21]發現當歸多糖可以抑制雙氧水對小鼠軟骨細胞的損傷，促進細胞分泌抗氧化酶修復細胞損傷，同時對細胞具有抗炎抗其凋亡的作用。

4.3 抗腫瘤 任峰等[22]通過體外試驗測定了當歸多糖對人肝癌細胞HepG2表達的影響，RT-PCR和Western印跡結果均顯示當歸多糖對人的肝癌細胞HepG2的表達具有顯著性地抑制作用，得出了當歸多糖具有抗腫瘤細胞生長作用。Zhang Yu等[23]體外試驗發現，當歸多糖對Hep G 2和MCF-7細胞具有顯著性的抑制生長作用。

4.4 其他生物學活性 當歸多糖除了具有增強免疫、抗氧化和抗腫瘤生物學活性作用外，還具有其他多種生物學活性作用。如松弛支氣管平滑肌起到消炎平喘作用、降低痛域鎮痛作用、減輕肝細胞損傷的保肝作用、保護缺血細胞損傷作用、降血糖和抑制抑郁等生物學活性作用[4]。

5 展望

當歸多糖具有多種生物學活性作用，在食品、醫療、保健、動物生產等領域得到了有效的應用，具有廣泛的發展應用前景。當前，對當歸多糖的研究已較為深入，但在當歸多糖的藥代動力學、對機體靶向性的研究等方面仍較為缺乏。因此，今后要對當歸多糖開展更深層次的開發研究，進一步開拓當歸多糖的應用范圍。

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（責編：張宏民