馬 丹,馬 林,王君婷,郭林青,吳時璽,胡騰飛,李 萌
(鄭州輕工業大學,煙草生物技術重點實驗室,河南 鄭州 450001)
芋頭,也稱芋艿,天南星科植物的地下球莖[1],含豐富的黏性物質,其主要成分是黏多糖。芋頭多糖主要成分是由葡萄糖和甘露糖以β-糖苷鍵連接而成的雜多糖,具有良好的吸水性和保濕性,廣泛用于化妝品、食品、藥品、生物、材料等諸多領域[2-5]。近年來,中式卷煙產品煙氣干燥、辛辣甜潤感不夠等問題日益突出[6-7],植物多糖含有豐富的羥基,在改善中式卷煙的保潤性能和感官舒適度方面發揮了重要作用。岳海波[8]將魔芋多糖應用到卷煙保潤劑的配方中,得到了較好的物理保潤和感官保潤效果;孟冬玲等人[9]利用魔芋葡聚甘糖的多羥基化合物特性對其改性,并應用到卷煙保潤中,得到了比丙二醇有較好能力的保潤效果。
關于芋頭的研究目前主要集中于生物活性及食用方面,作為保潤劑的研究尚未見報道。趙國華等人[10]發現,芋頭多糖在適當劑量下可顯著提高體內T淋巴細胞和NK細胞的活性,增強人體的免疫能力。還有報道芋頭多糖對羥自由基具有較強的清除作用,且能抑制H2O2誘導的紅細胞氧化溶血[11]。在珠江流域,芋頭是人們餐桌上的菜肴,也有不少養生者提出芋頭能益脾胃、調中氣、化痰散結[12]。因此,芋頭是一種食療兼優的農產品。以芋頭作為研究對象,以水提醇沉的方法提取并純化多糖,以傳統的保潤劑丙二醇、丙三醇為對照,研究其吸濕保濕性能,以期為新型煙用保潤劑開發提供參考。
試驗所用芋頭為白芋,購于鄭州某市場;煙絲,吉林中煙提供的未加香加料配方煙絲;無水乙醇、三氯乙酸、氫氧化鈉、活性炭,均為分析純。
BS201S型分析天平,國華電器有限公司產品;KQ-5200DB型數控超聲儀,昆山市超聲儀器有限公司產品;Avanti J-26SXP型高速冷凍離心機,美國貝克曼庫爾特有限公司產品;DZKW-4型電熱恒溫水浴鍋,北京中興偉業儀器有限公司產品;RE-52AA型旋轉蒸發儀,鄭州凱鵬實驗儀器有限公司產品;ST-07B型打粉機,上海樹立儀器儀表有限公司產品。
1.2.1 芋頭多糖的提取條件優化
新鮮芋頭清洗去皮,完全干燥后打粉,過120目篩。取適量芋頭粉,考查料液比1∶20,1∶30,1∶40, 1∶50, 1∶60; 提取溫度 50, 60, 70, 80,90℃;提取時間1,2,3,4,5 h等3個因素對芋頭多糖提取率的影響。
試驗測定粗多糖采用苯酚-硫酸法。以葡萄糖為標準品,繪制其標準曲線。分別將2.0 mL蒸餾水(空白對照管)、芋頭多糖對照品溶液、葡萄糖對照品溶液和樣品溶液取于10 mL比色管中,加入質量分數5%苯酚1 mL,搖勻,迅速加入5.0 mL濃硫酸,立即混勻后迅速冷卻,再放于水浴鍋中沸水浴15 min,流水迅速冷卻。于波長480 nm處測定各個條件下提取液的吸光度,得到擬合曲線為Y=0.819 8X,R2=0.999。
計算公式為:

參考姜紹通等人[16]方法對粗多糖進行純化得到芋頭多糖1,2,3。
1.2.2 芋頭多糖的保潤效果
(1)不同濃度芋頭多糖保潤效果。將將純化芋頭多糖水溶液分別以0.05%,0.10%,0.15%均勻噴灑到煙絲(每份20 g) 表面,添加好的煙絲樣品置于恒溫恒濕箱中,溫度設定為22±1℃,RH=60%,平衡24 h,每組試驗3次重復。每份5 g置于稱量瓶內,記錄空稱量瓶和稱量瓶總質量,敞口置于RH=30%的硫酸干燥器中,每隔24 h測定1次質量。測量5 d后,將所有煙絲樣品敞口置于鼓風干燥箱中,按照烘箱法測定每組煙絲樣品的含水量,比較其失水能力的大小。
(2)純化多糖與傳統保潤劑保潤效果比較。將芋頭多糖、丙二醇、丙三醇以0.1%添加量均勻噴灑到煙絲表面,并以添加等量的蒸餾水作為空白對照組。測量失水能力方法與1.2.2(1) 一致。
2.1.1 料液比對多糖提取率的影響
固定其他條件不變,分析不同料液比對多糖提取率的影響。
料液比對多糖提取率的影響見圖1。

圖1 料液比對多糖提取率的影響
從圖1可以看出,在料液比為1∶20~1∶60時,隨著料液比的增大,芋頭多糖的提取率呈現逐漸增大趨勢。其中,當料液比在1∶20~1∶40時,芋頭多糖的提取率迅速增加至最大值;在料液比大于1∶40時,提取率增加緩慢,趨于不變。
2.1.2 提取溫度對芋頭多糖提取率的影響
固定其他條件不變,分析不同提取溫度對多糖提取率的影響。
提取溫度對芋頭多糖提取率的影響見圖2。

圖2 提取溫度對芋頭多糖提取率的影響
由圖2可知,隨著提取溫度的升高,芋頭多糖的提取率逐漸增大,其中50~60℃時提取率增加最快,隨后提取溫度增加,多糖提取率均勻增加。
2.1.3 提取時間對芋頭多糖提取率的影響
固定其他條件不變,分析不同提取時間對多糖提取率的影響。
提取時間對芋頭多糖提取率的影響見圖3。

圖3 提取時間對芋頭多糖提取率的影響
由圖3可知,在料液比、提取溫度相同的情況下,隨著提取時間的增加,芋頭多糖提取率先增加而后略有降低。在提取時間1~3 h迅速增加至19.85%,隨后芋頭多糖提取率趨于不變,略微降低至19.42%。
2.1.4 芋頭多糖提取的正交優化
在單因素試驗基礎上,以料液比、提取溫度、提取時間為影響因素進行L9(34)正交試驗優化,以芋頭多糖提取率為指標,考查綜合因素對其影響,確定最佳芋頭多糖提取工藝參數。
試驗因素與水平正交設計見表1,正交試驗結果分析見表2,方差分析見表3。

表1 試驗因素與水平正交設計

表2 正交試驗結果分析

表3 方差分析
由表2正交試驗結果分析可知,在料液比(A)、提取溫度(B)、提取時間(C) 影響因素中,A因素極差R最大,是芋頭提取因素中的主要影響因素,其最優水平為A3;其次是提取時間(C),最優水平為C3;影響因素最小的是提取溫度(B),最優水平為B3,此結果與表3方差分析結果一致。為進一步驗證正交試驗結果的可靠性與真實性,按照最佳提取條件進行3次重復試驗,芋頭多糖得率分別為25.34%,25.31%,25.31%,平均得率為25.32%,說明此條件下試驗具有可重復性。綜上所述,提取的最優條件是A3B3C3,也就是料液比1∶40,提取溫度70℃,提取時間5 h。
將純化得到的3種多糖(1,2,3) 分別以0.05%,0.10%,0.15%添加量添加到煙絲中,考查芋頭多糖不同添加量的保潤效果,得到5 d各組煙絲樣品每24 h的失水率。
煙絲樣品失水質量百分比見表4。
從表4可以看出,隨著時間增加添加了芋頭多糖的煙絲失水比例逐漸減小;隨著芋頭多糖添加量的增加,煙絲失水比例先減少后增加,在添加量為0.1%時,煙絲失水比例小于芋頭多糖1和3,說明芋頭多糖2保潤效果更好。

表4 煙絲樣品失水質量百分比/%
將芋頭多糖(1,2,3)、丙二醇、丙三醇和蒸餾水以0.1%添加量分別添加到煙絲中,比較其保潤效果,得到5 d各組煙絲樣品每24 h的失水率。
煙絲樣品失水質量百分比見表5。
從表5可以看出,添加了不同保潤劑的煙絲5 d后的失水比例均低于空白對照組14.11%;添加了芋頭多糖作為保潤劑的煙絲比傳統的保潤劑甘油、丙二醇失水比例小,表明芋頭多糖具有較好的保潤效果。

表5 煙絲樣品失水質量百分比/%
選取廉價易得的芋頭作為試驗材料,應用水法提取多糖,不同料液比、提取溫度、提取時間對多糖的提取率都有較為明顯的影響,并且在這些影響因素中,料液比的影響最大,最佳為1∶40;其次為提取時間,最佳為5 h;提取溫度的影響最小,最佳為70℃,在最佳提取條件下,芋頭多糖的提取率為25.32%。王瑜和楊秀芳等人[11,13]研究了料液比、提取時間、提取溫度對新鮮芋頭多糖的影響,3個因素對多糖提取率的影響主次程度結果與試驗完全一致,但由于試驗研究對象為芋頭干粉,與新鮮芋頭相比諸多的物理性質在處理過程中發生變化,所以最佳提取條件的結果不完全一致。劉萍等人[14]研究了不同體積分數乙醇對水溶性芋頭多糖的影響,其結果表明提取溫度、提取時間對其結果影響較顯著與試驗結果有出入,可能是因為不同體積分數乙醇和其他因素之間有交互作用,使各因素對提取率的影響有所不同。
多糖含有豐富的羥基和氫鍵,可通過與水分子形成氫鍵減少水分的揮發或捕集空氣中的水分,從而保持含水率的相對穩定。研究結果顯示,當芋頭多糖在煙絲中添加量為0.1%時,煙絲失水率低于添加丙二醇組和丙三醇組,具有較好的保潤效果。此外,芋頭中含有多種微量元素,能增強人體的免疫功能,可作為防治癌瘤的常用藥膳主食,具有良好的保健效果。與趙國華[15]研究相似,姜紹通等人[16]發現芋頭多糖可以提高小鼠巨噬細胞的吞噬能力,提高其免疫能力。我國芋頭資源豐富,將芋頭多糖作為保潤劑具有提取成本低、性能好和安全性等優點,有望作為新型保潤劑用于煙草加工。