葉小萇
(廣東省深圳市光明區動植物檢驗檢測中心 518107)
豬圓環病毒病是由豬圓環病毒 (PCV)感染,其所致疾病已成為我國養豬業具有嚴重威脅的免疫抑制性疫病之一[1]。豬圓環病毒是繼豬繁殖與呼吸綜合征之后新發現的豬的重要傳染病[2]。豬是PCV 的主要宿主,其感染不僅會使豬群免疫力嚴重降低,而且會增強一些疾病的易感性,易誘發其他病原菌混合感染綜合征,導致發病豬只癥狀更加嚴重。該病主要癥狀為全身皮膚有紅色或紫色出血斑點,剖檢可見腎腫大、蒼白,有針尖大小出血點或壞死點。
生豬屠宰檢疫中,檢疫此病更依賴于宰后同步檢疫,宰前臨床巡檢往往被生豬的移動、身上的被毛等因素所干擾,難以清晰觀察豬圓環病毒病的主要臨床癥狀 (全身皮膚可見紅色或紫色血斑點)。
宰后的皮膚檢疫是以肉眼觀察為主,對于明顯的皮膚出血點容易看準檢出,但有時在皮膚癥狀不明顯時往往容易忽檢或誤檢。完整的視診方法應從上到下,從左到右,從背部到腹部來回巡視1~2 遍,特別要重視會陰部和四肢皮膚出現的紅紫色隆起的不規則斑塊,見圖1。
從多年屠宰檢疫實踐來看,在剖檢腎時可見其腫大、蒼白,有針尖大小出血點或壞死點。病理組織學變化為出血性壞死性皮炎和動脈炎及滲出性腎小球性腎炎和間質性腎炎,這種損傷是由免疫復合物在血管壁的沉積引起的,是Ⅲ型過敏反應的結果,并因而出現胸腔積液和水包積液[3]。在實際檢疫工作過程中,在觀察皮膚病變的同時也應重視剖檢臟器病變,以做到正確判斷,參見圖2。
對宰后檢疫初診為豬圓環2 型病毒病的病料進行實時熒光定量PCR 檢測,首先對采集的病料進行研磨,使用組織勻漿儀,添加PBS 液對組織病料進行研磨,相對傳統的手動研磨法耗時更短、組織濃度更高;再次對研磨液提取DNA,使用的全自動核酸提取儀購自美國賽默飛公司;采用磁珠法提取所需核酸,磁珠法相比傳統的試劑盒離心柱膜法特異性更強,提取的核酸濃度、純度更高,耗時更短;最后使用目前國內較成熟的核酸檢測試劑盒,避免煩瑣的引物和探針設計工作,利用熒光PCR 技術對病原目的基因進行擴增,此方法特異性強、高效、簡便,對于臨床樣品大通量的快速診斷具有重要意義。
實驗結果表明,與宰后檢疫初診符合率高達95.6%,腎臟、皮膚、淋巴結的檢出率較高。說明使用該方法可實現高靈敏性和高速的優勢結合,更高效率地擴增致病菌DNA,為豬圓環2型病毒的定性檢測提供了更好的保證,并為進一步研究豬圓環2 型病毒在各臟器中的分布提供依據,為實際檢疫工作指明方向。針對如此高的豬圓環2 型病毒檢出率,對檢出其他病原的病料同時進行豬圓環2 型病毒檢測發現,均有豬圓環2 型病毒的檢出。說明豬圓環2 型病毒以混合感染較為常見,參見圖3。

圖2 豬圓環病毒病豬腎臟出現的臨床癥狀

圖3 樣品檢測結果Ct 值≤35 且曲線有明顯指數增長期,判定為PCV-2 病毒陽性
2014~2018年在深圳某屠宰場共檢出236 例豬圓環病毒豬,占近5年檢出病害豬總數的31.4%。尤其是在2018年,豬圓環病毒豬數量急劇上升,高達145 例,占近5年總數的61.4%,主要來源于廣東和江西。根據調查發現,該病無明顯的季節性變化。該病在近幾年的急劇上升,經流行病學調查分析,流行趨勢異常的原因如下:一是近期產地氣候高濕,為其他疫病病原繁殖提供了有利條件,導致該病與其他病發生混合感染;二是因養殖場未全面開展自免工作,存在漏免、不免現象,導致病豬進入屠宰環節;三是流通環節對抗生素和飼料添加劑監管愈發嚴格,一些養殖場因未能找到合適的防治方案導致該病流行。見圖 4,圖 5。

圖4 深圳某屠宰場近5年檢出豬圓環病毒豬流行趨勢圖

圖5 2014~2018年豬圓環病毒豬占病豬總數比例
第一,應定期對生豬進行疫病監測,建立合理的免疫程序。但要注意對仔豬不要過早或過多的接種,以免仔豬發生免疫接種應激;第二,加強飼養管理,加強豬舍通風,建立科學的消毒制度,嚴格管控進出人員,豬群分區管理,不同來源和日齡的豬不得混養;第三,定期在飼料中添加抗生素類藥物如支原凈、金霉素、阿莫西林等,對預防本病或降低發病率有一定作用,這主要是因為抑制了豬群中的一些常見細菌性病原體,增強了豬群抵抗力[3]。如果早期發現疑似病豬,要隔離觀察或淘汰。
第一,到規模化養殖場購買生豬,與養殖場建立良好長效溝通機制,從源頭把好生豬質量關;第二,加強運輸管理,減少因運輸產生的各種應激因素;第三,嚴格落實滅鼠、消毒制度,進一步提升屠宰場待宰欄環境。
加強檢疫人員專業技術培訓,掌握該病臨床診斷要點;開展流行病學調查,做好追蹤溯源工作,及時將病豬產地信息反饋給源產地;督促企業建立科學消毒計劃,嚴格把控進出人員;普及豬圓環病毒病相關知識,做好疫情輿論工作。