非小細胞肺癌患者血清鐵蛋白、胸苷激酶1、基質(zhì)金屬蛋白酶9表達及臨床價值探討

王總飛，劉先本，張瑞祥，劉士磊

(鄭州大學附屬腫瘤醫(yī)院胸外科，河南 鄭州 450008)

非小細胞肺癌(NSCLC)在肺癌中占4/5左右，早期癥狀無特異性，臨床確診時多處于中晚期，易侵襲或轉(zhuǎn)移，患者5年生存率不高[1]。早期診治NSCLC，對提高患者生存率，改善其生存質(zhì)量具有十分重要的意義。近年來腫瘤標記物在惡性腫瘤診斷、治療、預后評估中應用較多[2，3]，血清鐵蛋白(SF)為新型腫瘤標志物之一，其診斷肺癌敏感度較高。胸腺激酶1(STK1)屬于DNA修復酶，參與細胞增殖過程，被發(fā)現(xiàn)在實體腫瘤中高表達，且關于其對NSCLC化療效果評估的價值報道多[4，5]。基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)通過對細胞外基質(zhì)(ECM)降解以參與腫瘤生長、侵襲與轉(zhuǎn)移[6]。本研究探討血清SF、STK1、MMP-9在NSCLC患者中的表達及臨床意義，為臨床NSCLC治療提供重要參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料2016年2月至2018年2月我院收治的NSCLC患者80例(觀察組)，均通過病理學檢查證實，術前均無放化療干預，排除肝腎功能異常、免疫異常、合并其他惡性腫瘤等患者。其中男44例，女36例；年齡40～80歲[(56.38±3.29)歲]；病理分型：鱗癌52例，腺癌28例；TNM分期：I期30例，II期33例，III期17例；有吸煙史30例，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移26例。同期診治的肺部良性疾病患者65例(對照1組)，疾病類型：慢性阻塞性肺疾病(COPD)42例，肺炎18例，肺結(jié)核5例。其中男36例，女29例；年齡36～77歲[(55.84±3.35)歲]；有吸煙史22例。同期健康體檢正常人員50例(對照2組)，其中男25例，女25例；年齡37～76歲[(55.69±3.16)歲]；有吸煙史17例。三組性別、年齡、吸煙史比較差異均無統(tǒng)計學意義(P> 0.05)，有可比性。本次研究患者均自愿參與，并簽署知情同意書。

1.2 方法清晨空腹采集各組對象肘靜脈血4 ml，以每分鐘3000轉(zhuǎn)的速率(r=5 cm)離心5分鐘，血清分離后保存待測。通過酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測各組對象血清SF、MMP-9水平，試劑盒均購自上海江萊生物科技有限公司；免疫印跡增強化學發(fā)光法對血清STK1測定，化學發(fā)光成像分析儀及其配套試劑購自西安瑞邁分析儀器有限責任公司。

1.3 統(tǒng)計學方法采用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù)。計量資料行正態(tài)性和方差齊性檢驗，不符合正態(tài)分布則通過對數(shù)轉(zhuǎn)化后呈正態(tài)或近似正態(tài)分布，多組間行單因素方差分析，組內(nèi)兩兩比較行LSD-t檢驗；兩組間行獨立樣本t檢驗。Pearson相關性分析SF、MMP-9與STK1水平的關系。P< 0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 血清SF、MMP-9、STK1水平比較觀察組血清SF、MMP-9、STK1水平高于對照1組、對照2組(P< 0.05)；對照1組血清SF、SKT1水平高于對照2組(P< 0.05)，兩組血清MMP-9水平比較差異無統(tǒng)計學意義(P> 0.05)。見表1。

表1 三組血清SF、MMP-9、STK1水平比較

*與對照2組比較，P< 0.05；#與對照1組比較，P< 0.05

2.2 不同病理特征NSCLC患者血清SF、MMP-9、STK1水平比較鱗癌、III期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者血清SF、MMP-9、SKT1水平分別高于腺癌、I～II期、非淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者(P< 0.05)；>60歲患者血清MMP-9水平高于≤60歲患者(P< 0.05)。見表2。

表2 不同病理特征NSCLC患者血清SF、MMP-9、STK1水平比較

2.3 相關性分析NSCLC患者血清SF與MMP-9、STK1水平均呈正相關(r=0.580、0.612，P< 0.05)；血清MMP-9、STK1水平也呈正相關(r=0.563，P< 0.05)。

3 討論

NSCLC患者預后與腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移密切相關，而腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移復雜，新生血管形成、免疫低下、腫瘤標志物等均可能導致腫瘤浸潤、轉(zhuǎn)移。SF屬于結(jié)合蛋白之一，為人體鐵儲備重要形式，人體各組織中SF有所表達，特別是骨髓、肝臟及脾臟。有研究表明SF與惡性腫瘤發(fā)生有關[7]。范國華等[8]研究發(fā)現(xiàn)相比肺良性病變，肺癌患者血清SF水平明顯高，且與肺癌患者病理類型、腫瘤直徑、分化程度、臨床分期可能有關。認為血清SF可能參與肺癌發(fā)生、發(fā)展過程。同時該學者提出SF不穩(wěn)定一說，假陽性率較高。對此需聯(lián)合其他指標或檢查手段進一步診斷。周晶等[9]研究發(fā)現(xiàn)SF對NSCLC診斷敏感度、特異度分別為62.86%、86.00%，聯(lián)合C反應蛋白(CRP)、癌胚抗原(CEA)檢測NSCLC的敏感度、特異度分別為87.14%、51.00%。可見SF聯(lián)合CRP、CEA能顯著提高NSCLC診斷敏感度，但不會提高其特異度。本研究結(jié)果顯示相比肺部良性疾病、健康人員，NSCLC患者血清SF水平顯著高，提示NSCLC患者多出現(xiàn)鐵超載現(xiàn)象。分析其原因：相關致癌理化因子對人體鐵代謝影響，減少鐵排出量，人體內(nèi)鐵儲備增多，此時抽血檢測血清SF升高；同時炎癥等對SF有一定的誘導作用，這是肺部良性疾病患者SF比健康人員高的原因之一。同時本研究發(fā)現(xiàn)NSCLC不同病理分型、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否患者血清SF水平存在顯著差異，提示血清SF明顯上升可能傾向鱗癌，且其顯著表達與NSCLC分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關。

細胞基膜、細胞基質(zhì)被認為是腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移的天然屏障，腫瘤細胞通過之且往遠處轉(zhuǎn)移，這個過程中誘導機體形成蛋白酶類，對細胞基質(zhì)降解。相關報道發(fā)現(xiàn)，NSCLC患者血清MMP-9水平與腫瘤浸潤、轉(zhuǎn)移密切相關，可作為NSCLC預后預測重要指標[10]。MMP-9為MMPs家族成員之一，其相對分子質(zhì)量大，它被激活后對I、V、IV、VII、X型細胞外基質(zhì)(如膠原蛋白、纖維黏連蛋白等)有不同程度的降解作用，促使腫瘤細胞易穿過基底膜浸潤結(jié)締組織基質(zhì)，進而促腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移。徐曉艷等[11]研究發(fā)現(xiàn)NSCLC組織MMP-9陽性表達率高，且其表達和患者年齡、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關。本研究結(jié)果顯示相比肺部良性疾病患者、健康人員，NSCLC患者血清MMP-9水平顯著高，與梁乃超[12]報道一致。本研究還發(fā)現(xiàn)血清MMP-9水平可能與NSCLC患者年齡、病理分型、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關。MMP-9通過對基底膜、細胞外基質(zhì)降解以促腫瘤細胞往周邊組織侵襲[13]。

STK1被證實在多種實體腫瘤中高表達。目前關于STK1與NSCLC的研究以化療效果評估為主[14]。黃仁飛等[15]對59例NSCLC患者化療4周期不同療效患者STK1水平測定，發(fā)現(xiàn)化療4周期后STK1陽性率比化療前明顯降低，且化療有效者明顯比無效者低。認為STK1水平監(jiān)測能有效評估NSCLC患者化療效果。本研究結(jié)果顯示NSCLC患者血清STK1水平相比肺部良性疾病、健康人員顯著高，這可能與STK1參與細胞周期調(diào)控有關。有文獻發(fā)現(xiàn)，STK1與腫瘤細胞轉(zhuǎn)化有關，能讓S期調(diào)控異常，G/S期時STK1水平持續(xù)上升，M期時其水平最高[16]。本研究還發(fā)現(xiàn)血清STK1水平可能與NSCLC患者病理分型、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關。另外，本研究還發(fā)現(xiàn)NSCLC患者血清SF、MMP-9與STK1水平均正相關。提示血清SF、MMP-9、STK1協(xié)同促腫瘤生長、浸潤及轉(zhuǎn)移。

綜上，血清SF、MMP-9、STK1水平在NSCLC患者中高表達，且其水平與腫瘤病理分型、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關。血清SF、MMP-9、STK1可能協(xié)同參與NSCLC發(fā)生、侵襲及轉(zhuǎn)移。