淺談藥品微生物檢驗(yàn)工作中的方法學(xué)驗(yàn)證

張雪

【摘要】目的：分析研究幾種藥品微生物限度檢查方法。方法：選擇8種中成藥參芎膠囊、益母草膠囊、血栓心脈寧膠囊、牛黃解毒片、羚羊感冒片、雙黃連片、骨筋丸膠囊、云芝肝泰顆粒，使用5種陽性對(duì)照菌回收率試驗(yàn)，測(cè)定中成藥成分中是否有抑菌成分。結(jié)果：回收率試驗(yàn)結(jié)果顯示：參芎膠囊、益母草膠囊、羚羊感冒片的回收率達(dá)到70%以上，說明其無抑菌作用;牛黃解毒片、雙黃連片、云芝肝泰顆粒有一定的抑菌作用，可通過培養(yǎng)基稀釋法對(duì)其抑菌作用進(jìn)行消除;血栓心脈寧膠囊、骨筋丸膠囊的抑菌作用較強(qiáng)，需要通過薄膜過濾法將抑菌作用消除。結(jié)論：常規(guī)法對(duì)參芎膠囊、益母草膠囊和羚羊感冒片可進(jìn)行微生物限度檢查，牛黃解毒片、雙黃連片、云芝肝泰顆粒能夠利用培養(yǎng)基稀釋法開展微生物限度檢查;血栓心脈寧膠囊、骨筋丸膠囊可使用薄膜過濾法進(jìn)行微生物限度檢查。

【關(guān)鍵詞】微生物;藥品;微生物限度檢查;薄膜過濾法

【中圖分類號(hào)】R248.3【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】2095-6851（2019）06-230-01

在藥品檢查時(shí)，對(duì)含有抑菌成分的中成藥給予微生物限定檢查，需要將其消除抑菌活性[1]。隨著2005年版藥典的實(shí)施，在標(biāo)準(zhǔn)審核工作及監(jiān)督檢查工作中，越來越重視了微生物檢驗(yàn)方法[2]。但是由于供試品的抑菌成分干擾，會(huì)導(dǎo)致很多樣品的陽性試驗(yàn)結(jié)果為陰性，引起真實(shí)結(jié)果失真[3]。尤其在中成藥檢查的過程中，缺乏對(duì)具體微生物限度檢查方法。本研究對(duì)8種中成藥微生物限度檢查方法進(jìn)行了驗(yàn)證，如下：

1 材料與方法

1.1 材料 選擇8種中成藥參芎膠囊、益母草膠囊、血栓心脈寧膠囊、牛黃解毒片、羚羊感冒片、雙黃連片、骨筋丸膠囊、云芝肝泰顆粒。

參芎膠囊：陜西健民制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字B20020851。益母草膠囊：沈陽永大制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字Z20053022。血栓心脈寧膠囊：吉林一正藥業(yè)集團(tuán)有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字Z22022536。牛黃解毒片：廣東生命一號(hào)藥業(yè)有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字Z44022761。羚羊感冒片：天津天士力（遼寧）制藥有限責(zé)任公司，國(guó)藥準(zhǔn)字Z21020333。雙黃連片：陜西白鹿制藥股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字Z10960036。骨筋丸膠囊：哈藥集團(tuán)三精千鶴制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字Z20063516。云芝肝泰顆粒：神威藥業(yè)集團(tuán)有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字Z13020773。

1.2 方法

試驗(yàn)所用菌株包括：金黃色葡萄球菌;大腸埃希菌;白色念珠菌;枯草芽孢桿菌;黑曲霉菌。

制備菌液：金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌;大腸埃希菌均在35℃下培養(yǎng)18h，加水稀釋至含菌濃度為50～100個(gè)/ml;白色念珠菌在25℃下培養(yǎng)1～2d，使用生理鹽水稀釋為50～100個(gè)/ml;黑曲霉菌在25℃下培養(yǎng)一周，加水3～5ml，洗去孢子，用吸管吸出菌液，放置在無菌試管，稀釋為50～100個(gè)/ml。

使用不同微生物限度檢驗(yàn)方法進(jìn)行檢測(cè)。常規(guī)法：使用1：10供試液1ml，加入到瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)菌計(jì)數(shù)[4]。培養(yǎng)基稀釋法：選擇每1ml供試液（1：10稀釋液）等量注入5皿，每皿為0.2ml供試液，并進(jìn)行回收試驗(yàn)。薄膜過濾法：取1：10供試液共10ml，放置在滅菌試管中，離心取上清液1ml，加入薄膜過濾器，沖洗，加菌液1ml后放置在瓊脂平板[5]。

2 結(jié)果

常規(guī)法回收率試驗(yàn)結(jié)果顯示：參芎膠囊、益母草膠囊、羚羊感冒片的回收率達(dá)到70%以上，說明其無抑菌作用，見表1

3 討論

幾乎所有的藥品均需要在安全性檢查后才能應(yīng)用在臨床中，而微生物檢查是其中常規(guī)且重要的部分[6]。2005年在中華人民共和國(guó)藥典規(guī)定藥品進(jìn)行微生物限度檢驗(yàn)或者無菌檢驗(yàn)法測(cè)定時(shí)，需要進(jìn)行檢驗(yàn)方法的驗(yàn)證，以確認(rèn)何種方法適合藥品檢查[7]。

本研究對(duì)8種中成藥進(jìn)行了微生物限度方法學(xué)的驗(yàn)證，結(jié)果顯示常規(guī)法對(duì)參芎膠囊、益母草膠囊和羚羊感冒片可進(jìn)行微生物限度檢查，牛黃解毒片、雙黃連片、云芝肝泰顆粒能夠利用培養(yǎng)基稀釋法方法開展微生物限度檢查;血栓心脈寧膠囊、骨筋丸膠囊可使用薄膜過濾法進(jìn)行微生物限度檢查。

參考文獻(xiàn)：

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