氦氖激光治療對大皰性類天皰瘡皮損CXCR5和ICOS的影響及療效相關性分析

武瑞霞 高濤

[摘要]目的：探討氦氖激光治療對大皰性類天皰瘡皮損CXCR5、ICOS的影響及與療效的關系。方法：選取2012年1月-2018年8月于筆者醫院診治的84例大皰性類天皰瘡患者為研究對象，采用隨機數字法分為對照組和實驗組，每組42例。兩組均給予糖皮質激素系統治療，實驗組在此基礎上給予氦氖激光治療，對比兩組治療前后泡液中CXCR5、ICOS表達水平及臨床療效。結果：治療前兩組CXCR5、ICOS含量比較差異無統計學意義（P>0.05）;與治療前比較，治療后2周、4周和6周皰液CXCR5、ICOS含量明顯降低，且實驗組明顯低于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05）。與對照組比較，實驗組無新皰長出時間、皮損面基本無滲出時間和愈合時間均顯著縮短，總有效率顯著升高，差異均具有統計學意義（P<0.05）。治療有效者治療前皰液中CXCR5和ICOS含量顯著低于無效者，差異有統計學意義（P<0.05）。結論：糖皮質激素聯合氦氖激光治療大皰性類天皰瘡可有效提高療效，這可能與皰液中CXCR5和ICOS表達水平相關。

[關鍵詞]大皰性類天皰瘡;CXCR5;ICOS;氦氖激光;療效;皮損

[中圖分類號]R753.1? ? [文獻標志碼]A? ? [文章編號]1008-6455（2019）08-0056-03

大皰性類天皰瘡是一種以紅斑和水皰為主的慢性獲得性自身免疫性大皰病，多見于60歲以上老人，女性略多于男性[1]。嚴重影響患者的生活質量，嚴重者甚至可危及生命健康[2-3]。此外，面部、結膜及口腔黏膜也是疾病的好發部位之一，對患者容貌造成較大影響。加快皮損愈合是提高患者生活質量，降低死亡率的關鍵。近年來，激光技術發展迅速，氦氖激光波長為632.8nm，是低強度激光的代表，在皮損治療中應用廣泛[4]。協同刺激因子（Inducible co-stimulator，ICOS）和趨化因子受體5（CXC chemokine receptor 5，CXCR5）是濾泡輔助性T細胞（Follicular helper T cells，Tfh）重要表面分子之一，參與某些自身免疫性疾病發病機制，但關于其與大皰性類天皰瘡相關性的研究較少[5-6]。本研究選取筆者醫院診治的84例大皰性類天皰瘡患者為研究對象，分析氦氖激光治療對皮損CXCR5、ICOS的影響，并探討其與療效的關系。

1? 資料和方法

1.1 一般資料：選取2012年1月-2018年8月于筆者醫院診治的84例大皰性類天皰瘡患者，采用隨機數字法分為對照組和實驗組。其中對照組42例，男20例，女22例;平均年齡（60.45±3.92）歲;平均病程（26.45±2.84）個月;自身免疫性大皰性皮膚病嚴重程度評分（autoimmune herpes skin disorder intensity score，ABSIS）[7]：（75.16±5.78）分;皮損嚴重程度：輕度8例，中度25例，重度9例。實驗組42例，男21例，女21例;平均年齡（61.31±3.85）歲;平均病程（27.31±3.04）個月;ABSIS評分：（76.31±6.21）分;皮損嚴重程度：輕度7例，中度24例，重度11例。兩組患者性別、年齡、病程、ABSIS評分比較，差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 納入及排除標準：納入標準：①臨床表現及相關檢查符合中國醫師協會皮膚科醫師分會自身免疫性疾病亞專業委員制定的大皰性類天皰瘡診療標準[8];②近3個月未接受其它任何治療者;③自愿簽署知情同意書。排除標準：①合并其它皰病者;②合并其它皮膚疾病者;③合并腫瘤者;④伴精神疾病或家族史者。本研究已通過倫理委員會批準。

1.3 方法

1.3.1 治療方法：對照組：給予常規糖皮質激素治療，本院主要采用潑尼松（浙江仙琚制藥股份有限公司制，規格：5mg/片，生產批號：111018/140516/170425），其中輕度皮損者首劑予0.4mg/kg/d，中度皮損者首劑予0.5mg/kg/d，重度皮損者首劑0.75mg/kg/d。實驗組在此基礎上予以氦氖激光（JH30A氦氖激光治療儀，上海晟昶光電技術有限公司）局部照射皮損處，每處照射15～20min，若皮損面積較大者可考慮分點分片進行照射，除此之外，兩組還需給予補鉀、補鈣及胃腸道保護等。兩組均連續治療8周。

1.3.2 標本留取方法：皰液標本取自患者未感染水皰處，后將其以3 000r/min離心5min，保留上清液，-80℃保存，待檢測。

1.3.3 檢查方法：用酶聯免疫實驗中雙抗體夾心法檢測兩組治療前和治療后2周、4周及6周皰液中CXCR5、ICOS含量，具體步驟參照相關說明書進行，主要原理：①酶標板上包被CXCR5和ICOS單抗;②添加各濃度標準品和樣品與單抗充分結合;③添加二抗，即生物素抗人CXCR5/ICOS抗體;④終止，酶標儀450nm處檢測相應OD值，并計算其濃度。

1.4 觀察指標：比較兩組治療前、治療后2周、4周及6周皰液中CXCR5、ICOS含量變化;比較兩組皮損控制時間（從入組開始計算，無新皰長出時間、皮損面基本無滲出時間和愈合時間）;比較兩組治療效果（痊愈、顯效、好轉和無效）。

1.5 療效評判標準：參考中國醫師協會皮膚科醫師分會自身免疫性疾病亞專業委員制定的大皰性類天皰瘡診療標準，痊愈：皮損面完全干燥、結痂，且癥狀消失者;顯效：以上標準達到2/3，癥狀明顯減輕者;好轉：以上標準達1/2，癥狀稍減輕者;無效是指以上標準不足1/2，癥狀無明顯好轉者。其中痊愈、顯效及好轉均認為有效。

1.6 統計學分析：本研究所有數據均用SPSS 20.0統計學軟件進行分析，計量資料用均數±標準差描述，用t檢驗進行比較;計數資料用構成比表示，用卡方檢驗進行比較;以P<0.05表示差異有統計學意義。

2? 結果

2.1 兩組治療前后皰液CXCR5、ICOS含量變化比較：治療前兩組CXCR5、ICOS含量比較，差異無統計學意義（P>0.05）;與治療前比較，治療后2周、4周和6周皰液CXCR5、ICOS含量明顯降低，且實驗組明顯低于對照組，差異均具有統計學意義（P<0.05），見表1。

2.2 兩組破損控制時間比較：與對照組比較，實驗組無新皰長出時間、皮損面基本無滲出時間和愈合時間均明顯縮短，差異均有統計學意義（P<0.05），見表2。

2.3 兩組患者臨床療效比較：與對照組比較，實驗組總有效率明顯升高，且差異有統計學意義（P<0.05）。見表3。

2.4 CXCR5、ICOS含量與療效的關系：治療有效者治療前皰液中CXCR5和ICOS含量明顯低于無效者，差異有統計學意義（P<0.05）。見表4。

3? 討論

迄今為止，大皰性類天皰瘡診斷主要依靠臨床表現、皮膚組織病理和血循環抗體等，有創，且敏感性及特異性相對較低，對患者和臨床工作者均不利[9-10]。因此尋找特異性好且創傷小的有效指標十分關鍵。濾泡輔助性T細胞（Follicular helper T cell，Tfh）是一種介導初始B細胞及記憶B細胞活化的特殊CD4陽性T淋巴細胞，在自身免疫性疾病中占有重要地位，與干燥綜合征、類風濕關節炎及重癥肌無力等疾病密切相關[11]。近年，隨研究不斷深入發現：CXCR5作為趨化因子受體，對Tfh細胞在淋巴濾泡中的重新定位中至關重要，是其產生及發展的重要表面標志物之一;血清CXCR5最容易被測量，已在部分自身免疫性疾病的血清檢測中得到廣泛應用[12-13]。ICOS屬于CD28家族，可在Tfh細胞表面高表達，與抗原提呈細胞表面配體ICOSL結合，以調節Tfh細胞產生、維持及功能[14-15]，姜蔚蔚[16]等通過對3例大皰性類天皰瘡伴惡性腫瘤研究報道大皰性類天皰瘡皰液中CXCR5和ICOS含量與其發病有一定相關性，仍須增加樣本量繼續探討，但對CXCR5、ICOS含量與大皰性類天皰瘡臨床療效之間的關系尚不清楚。氦氖激光不僅可促進血管擴張，加快血液循環、成纖維細胞增殖、皮損周圍組織再生，還具有抑制細菌生長、消炎止痛等作用，最終促進皮損愈合;王利霞[17]等通過對69例天皰瘡、大皰性類天皰瘡患者進行氦氖激光聯合治療肯定了氦氖激光對大皰性類天皰瘡皮損治療的有效性，但對其與皰液中CXCR5和ICOS含量的相關性尚不清楚。

本研究用ELISA檢測兩組患者治療前后皰液中CXCR5和ICOS含量，發現治療后兩組含量均明顯降低，提示糖皮質激素常規治療和氦氖激光治療均可降低CXCR5和ICOS含量，而實驗組CXCR5和ICOS含量明顯低于對照組，提示氦氖激光聯合治療對CXCR5和ICOS含量的影響強于糖皮質激素常規治療。本研究還發現氦氖激光聯合治療組無新皰長出時間、皮損面無滲出時間和愈合時間均明顯短于對照組，且實驗組總有效率明顯高于對照組，顯示了聯合治療的必要性。比較分析有效者和無效者治療前皰液中CXCR5和ICOS含量，發現治療有效者治療前皰液中CXCR5和ICOS含量明顯低于無效者，提示CXCR5和ICOS含量檢測對大皰性類天皰瘡療效評估具有一定價值，含量越高，療效越差，治療期間可作出適當調整，以實現個體化治療目的。

研究認為，氦氖激光聯合治療大皰性類天皰瘡可有效提高療效，可能與皰液中CXCR5和ICOS表達水平相關，但具體機制有待進一步探討。

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[收稿日期]2018-12-30

本文引用格式：武瑞霞，高濤.氦氖激光治療對大皰性類天皰瘡皮損CXCR5和ICOS的影響及療效相關性分析[J].中國美容醫學，2019，28（8）：56-59.