疏肝補腎法對肝郁腎虛型黃褐斑患者血SOD、MDA及總（-SH）水平的影響

李溫如 馬麗俐 陳志偉

黃褐斑是一種由多種因素誘發而出現于面部的色素沉著性皮膚病，屬中醫“面塵”、“黧黑斑”、“肝斑”等范疇。該病病因、發病機制尚不明確，主要與遺傳、內分泌因素及紫外線照射有關[1]。此外，氧化應激也參與黃褐斑的發病[2]。筆者運用疏肝補腎法治療女性肝郁腎虛型黃褐斑，取得較好療效[3]，同時檢測其血清超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、總巰基（-SH）的水平，探討疏肝補腎法對女性肝郁腎虛型黃褐斑患者氧化應激的影響，現報道如下。

1 臨床資料

1.1 一般資料 選取2014 年2 月—2015 年7 月于浙江省中醫院皮膚科門診就診的女性黃褐斑患者70例，中醫辨證分型為肝郁腎虛型，采用隨機數字表法分為中藥組和成藥組，各35 例。同期選取面部無黃褐斑等色素沉著性皮膚病的女性健康體檢志愿者30名為正常對照組。本研究經醫院倫理委員會審核通過，所有患者均簽署知情同意書。

1.2 診斷及中醫辨證分型標準 黃褐斑診斷參照中國中西醫結合學會皮膚性病專業委員會色素病學組《黃褐斑的臨床診斷和療效標準（2010 年版）》[4]：（1）面部淡褐色至深褐色、界限清楚的斑片，通常對稱性分布，無炎癥表現及鱗屑；（2）無明顯自覺癥狀；（3）女性多發，主要發生于青春期后；（4）病情可有季節性，常夏重冬輕；（5）排除其他疾?。ㄈ顼E部褐青色痣、Riehl 黑變病及色素性光化性扁平苔蘚等）引起的色素沉著。中醫診斷、辨證分型參照國家技術監督局1997 年版《中華人民共和國國家標準·中醫臨床診療術語證候部分》[5]中肝郁腎虛型的診斷：以脅脹作痛，情緒抑郁，耳鳴，腰膝酸軟等為常見證候。

1.3 納入標準 （1）符合上述診斷及中醫辨證分型標準；（2）女性，年齡20～50 歲；（3）近1 個月內未使用治療黃褐斑及影響內分泌的藥物；（4）依從性良好的患者。

1.4 排除標準 （1）口服避孕藥、妊娠、哺乳婦女；（2）年齡＜20 歲或＞50 歲；（3）男性黃褐斑患者；（4）由其他皮膚病引起的色素沉著；（5）合并有心、肝、腎、內分泌、造血系統等內科疾病。

2 方 法

2.1 治療方法 中藥組：予自擬方疏肝補腎湯：柴胡、當歸、炒枳殼、炒白芍各12g，川芎、丹皮、澤瀉各9g，熟地、山萸肉、女貞子各15g，淮山藥30g，甘草6g。臨癥加減：肝郁氣滯為主者，加郁金、香櫞各9g，白蒺藜6g，玫瑰花5g；肝腎不足者，加枸杞子9g，菟絲子、杜仲各12g；伴失眠者，加珍珠母（先煎）、夜交藤各15g，合歡花9g；褐斑日久色深者，加丹參、赤芍各9g，白僵蠶6g，白芷9g；月經不調、痛經者，加制香附9g，桃仁、紅花各6g，益母草15g，澤蘭12g。水煎服，1 天1 劑，分2 次溫服，每次250mL。成藥組：予六味地黃丸（仲景宛西制藥股份有限公司，規格：1.44g/丸，批號131237），8 丸/次，3 次/天，紅花逍遙膠囊（云南楚雄天利藥業有限公司，規格：0.4g/粒，批號20131127），4 粒/次，3 次/天。兩組患者均外用廣譜防曬霜（薇諾娜，SPF30，PA+++，外出前30min 適量均勻涂抹于面部，戶外活動時每2h 重復使用1 次）。4周為1 個療程，連續治療3 個療程。

2.2 觀察指標 血清SOD、MDA、（-SH）含量檢測，清晨采集兩組患者治療前后及正常對照組空腹靜脈血2mL，于離心機3000r/min 離心10min，取上層血清1mL 置于-20℃冰箱保存待測。酶標測試儀（美國伯樂公司，型號：iMark）檢測血清SOD、MDA 含量，全波長多功能酶標儀（美國賽默飛世爾科技公司，型號：Varioskan Flash）檢測總（-SH）含量。采用雙抗體夾心酶聯免疫分析法（ELISA）檢測血清SOD、MDA含量（試劑盒均購自上海酶聯生物科技有限公司，批號20160182932、2016018293），采 用 微 量 酶 標 法（MELIA）檢測總（-SH）含量（上海酶聯生物科技有限公司，批號2016011928），實驗操作嚴格按照說明書進行。

2.3 統計學方法 應用SPSS19.0 進行統計分析，計量資料以均數±標準差） 表示，采用t 檢驗，計數資料采用χ2檢驗，P＜0.05 差異有統計學意義，P＜0.01為差異有顯著統計學意義。

3 結 果

3.1 兩組黃褐斑患者及正常對照組一般資料比較中藥組35 例，年齡26～48 歲，平均（39.80±4.88）歲；病程0.5～20 年，平均（4.24±3.95）年；根據皮損部位進行分型：蝶型27 例，面上型6 例，泛發型2 例。成藥組35 例，年齡23～50 歲，平均（39.89±6.83）歲；病程0.1～20 年，平均（4.08±4.15）年；蝶型28 例，面上型5 例，泛發型2 例。正常對照組30 名，年齡20～50歲，平均（38.07±3.84）歲。三組一般資料比較，差異均無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

3.2 兩組治療前后及正常對照組血SOD、MDA、總（-SH）含量比較 治療前，兩組黃褐斑患者SOD、總（-SH）均低于正常對照組，MDA 均高于正常對照組（P 均＜0.01）；兩組間比較，血清SOD、MDA、總（-SH）含量差異無統計學意義（P 均＞0.05）。治療后，中藥組、成藥組患者SOD、總（-SH）含量較治療前明顯升高，MDA 顯著降低（P 均＜0.01）；且中藥組上述指標改善較成藥組更明顯（P 均＜0.05），見表1。

表1 兩組黃褐斑患者治療前后及正常對照組血SOD、MDA、總（-SH）含量比較（

表1 兩組黃褐斑患者治療前后及正常對照組血SOD、MDA、總（-SH）含量比較（

注：與正常對照組比較，*P＜0.01；與同組治療前比較，△P＜0.01；與成藥組治療后比較，▲P＜0.05；SOD：超氧化物歧化酶；MDA：丙二醛；總（-SH）：總巰基；中藥組：自擬疏肝補腎湯，成藥組：六味地黃丸+紅花逍遙膠囊

組別中藥組治療前治療后成藥組治療前治療后正常對照組例數35 SOD（U/mL）MDA（nmol/mL）總（-SH）（μmol/L）60.54±10.69*67.82±9.04△▲5.73±1.40*3.98±0.94△▲407.01±93.24*493.64±82.80△▲35 30 57.69±4.61*61.10±5.07△73.15±10.09 6.11±1.16*5.24±1.19△4.41±1.37 384.70±61.63*417.16±63.25△510.47±70.46

3.3 不良反應 兩組患者治療期間均未出現嚴重不良反應。

4討 論

研究發現，自由基增加及其代謝產物參與黃褐斑的發病[2，6-7]?？寡趸到y中，SOD、過氧化氫酶（CAT）和谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）是細胞內的主要抗氧化酶，巰基（-SH）是還原型谷胱甘肽（GSH）的活性基團，這些物質的含量常用來評價氧化/抗氧化系統的功能。細胞膜上的脂質過氧化物（LPO）容易分解產生MDA，促進脂褐素即色素的生成，當LPO、自由基增多，SOD、CAT、GSH-Px、（-SH）等抗氧化劑含量或活性降低，不能有效發揮協同作用清除MDA等氧化產物，自由基堆積，氧化/抗氧化系統失衡，導致酪氨酸酶活化，黑素細胞功能活躍，黑素生成增加，引起皮膚色素沉著。Havva 等[6]檢測55 例黃褐斑患者血清Cu/Zn-SOD 和GSH-Px 的酶活性、MDA、NO、蛋白羰基水平，結果顯示患者Cu/Zn-SOD 和GSH-Px 酶活性增高，但明顯低于正常對照組、MDA、NO 高于對照組，蛋白羰基水平低于對照組，張慧[7]檢測90 例黃褐斑患者血清SOD、MDA、GSH-Px、晚期氧化蛋白產物（AOPP），結果顯示黃褐斑患者氧自由基和TLRs/MYD88 水平與患者病情和治療效果密切相關，以上研究均表明黃褐斑患者體內存在氧化應激損傷。本研究對兩組黃褐斑患者及正常對照組血清SOD、MDA、總（-SH）含量進行檢測，SOD、總（-SH）含量明顯低于正常對照組，MDA 含量顯著高于正常對照組，表明黃褐斑患者體內存在氧化/抗氧化失衡，與上述研究結果相符，提示皮膚色素代謝障礙與氧化應激損傷有關。

藥理研究證實，甘草、川芎、澤瀉、當歸可抑制酪氨酸酶活性，減少黑素細胞增殖，川芎、當歸對酪氨酸酶活性有雙向調節作用，山茱萸、枳殼、白芍等均對酪氨酸酶有不同程度的抑制作用，山萸肉、當歸對多巴自動氧化生成黑素具有顯著抑制作用[8-10]。李根林等[11]研究表明，丹皮、地黃、當歸均有不同程度的體外清除自由基能力。本研究結果顯示，疏肝補腎湯治療后患者血清SOD、總（-SH）含量均明顯升高，MDA含量明顯降低，表明疏肝補腎法可能通過增加SOD、總（-SH）含量，改善患者的氧化應激狀態，加速清除MDA 等氧自由基代謝產物來調節黑素代謝。