北京31例20～25歲健康在校女大學(xué)生面部主觀皮膚類型與皮膚微生物的關(guān)系

鄭玉梅 吳文海 宋麗雅 何聰芬

北京工商大學(xué)理學(xué)院 北京市植物資源研究開發(fā)重點實驗室 100048

皮膚作為人體與外界環(huán)境接觸的主要屏障，寄居著大量的細(xì)菌、真菌和病毒［1］，這些微生物主要通過與宿主先天免疫系統(tǒng)相互作用來維持自身平衡［2-3］，并參與皮膚屏障功能構(gòu)建［1］。微生物種類和群落組成在皮膚表面呈現(xiàn)多樣化，會受皮膚生理特征的影響，具有很大的個體差異性和時間穩(wěn)定性［4-10］。常見皮膚分型系統(tǒng)有 Fitzpatrick 分型［11］、Baumann皮膚分型［12］和主觀皮膚分型［13］，其中主觀皮膚分型是指針對自身皮膚特點的主觀判斷，一般分為干性、混合性、油性和中性皮膚，與皮膚水分含量、油脂分泌量等客觀生理指標(biāo)有一定的對應(yīng)關(guān)系，尤其是年齡＜25 歲的人群［14］。本研究采用高通量測序技術(shù)研究20 ～25歲健康女性面部皮膚的細(xì)菌和真菌多樣性，探究不同主觀皮膚類型的皮膚細(xì)菌與真菌組成差異，為“精準(zhǔn)護(hù)膚”和護(hù)膚用品的開發(fā)提供理論支撐。

對象與方法

一、試劑與儀器

吐溫20（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑北京有限公司），溶菌酶（北京百靈威科技有限公司），DNeasy 組織/血液DNA 提取試劑盒（德國QIAGEN 公司），Corneometer CM825 皮膚水分含量測試儀、Tewameter TM300 水分經(jīng)皮丟失測試儀、Sebumeter SM815皮膚油脂測試儀、Skin-pH-Meter PH905皮膚酸堿度測試儀（德國Courage+Khazaka公司），醫(yī)用紅外體溫計FR830（深圳家康科技有限公司），GeneAmp?9700 型 PCR 儀（美國ABI公司），AxyPrep 凝膠回收試劑盒（美國Axygen Biosciences公司），QuantiFluor?-ST 微型熒光計（美國Promega公司），Illumina MiSeq 測序系統(tǒng)（美國Illumina 公司）。

二、研究對象

招募31 例志愿者，均為北京工商大學(xué)在校女學(xué)生，生活環(huán)境較一致，年齡20 ～25 歲，面部皮膚健康。按照受試者對面部皮膚油膩及干燥程度的主觀感受將皮膚自評為干性（6例）、中性（8例）、混合性（9 例）、油性（8 例）4 組。取樣時間為2017 年12月24日；取樣前1個月內(nèi)，受試者皮膚表面不能涂抹任何含抗生素或糖皮質(zhì)激素類產(chǎn)品，且1個月內(nèi)未口服過任何抗生素或抗菌類藥品；取樣前8 h不能進(jìn)行面部清潔和涂抹任何化妝品。本研究符合2013年修訂的《赫爾辛基宣言》（www.wma.net/en/30publications/10policies/b3/index.html）的要求，所有受試者了解整個實驗?zāi)康暮瓦^程，并簽署知情同意書。

三、方法

1.皮膚生理指標(biāo)的檢測：使用Corneometer CM825 皮膚水分含量測試儀、Tewameter TM300 水分經(jīng)皮丟失測試儀、Sebumeter SM815 皮膚油脂測試儀和Skin-pH-Meter PH905皮膚酸堿度測試儀分別檢測受試者左右兩側(cè)面頰顴骨下方2 cm×2 cm區(qū)域皮膚水分含量、經(jīng)皮水分丟失、油脂含量和pH值，用醫(yī)用紅外體溫計FR830 檢測受試者額部體溫，比較不同自評皮膚類型間皮膚生理指標(biāo)的差異。

2.取樣方法：取2 支無菌棉拭子蘸取潤濕液（生理氯化鈉溶液-0.1%吐溫20），分別在受試者面頰皮膚左右對稱部位4 cm × 2 cm 區(qū)域各擦拭25 次，期間注意擦拭時轉(zhuǎn)動棉拭子，持續(xù)時間約15 s，然后將棉拭子放入收集管內(nèi)。采集過后，樣品放于干冰中保存，隨后轉(zhuǎn)入-80 ℃保存，并盡快提取DNA。

3.樣品DNA 的抽提及PCR 擴(kuò)增：采用DNeasy血液/組織DNA 提取試劑盒提取皮膚表面細(xì)菌總DNA。參照試劑盒說明書操作，部分優(yōu)化，即重復(fù)最后一步中洗脫緩沖液AE 加至濾柱膜中央洗提DNA，室溫（15 ～25 ℃）下孵育1 min，≥ 6000×g離心1 min。DNA 濃度和純度采用NanoDrop2000 超微量分光光度計進(jìn)行檢測，利用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA 提取質(zhì)量；用上游引物27F（5′-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3′）和下游引物338R（5′-TGCTGCCTCCCGTAGGAGT-3′）對細(xì)菌 16S rRNA V1-V2 可變區(qū)進(jìn)行PCR 擴(kuò)增，用上游引物內(nèi)源轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)（ITS）1F（5′-CTTGGTCATTTAGAGG AAGTAA - 3′ ）和下游引物 ITS2R（5′ -GCTGCGTTCTT CATCGATGC-3′）對真菌 ITS 進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增。細(xì)菌擴(kuò)增體系為20 μl，包括5 × FastPfu DNA 聚合酶緩沖液4 μl，2.5 mmol/L dNTPs 2 μl，5 μmol/L 上游和下游引物各 0.8 μl，F(xiàn)astPfu 聚合酶 0.4 μl，10 ng DNA模板，牛血清白蛋白0.2 μl，補(bǔ)ddH2O至20 μl。真菌擴(kuò)增體系為 20 μl，包括 10 × 緩沖液 2 μl，2.5 mmol/L dNTPs 2 μl，5 μmol/L 上游引物和下游引物各 0.8 μl，rTaq 聚合酶 0.2 μl，10 ng DNA 模板，牛血清白蛋白0.2 μl，補(bǔ)ddH2O至20 μl。擴(kuò)增程序為：95 ℃預(yù)變性3 min；95℃變性30 s，55 ℃（細(xì)菌）或53 ℃（真菌）退火30 s，72 ℃延伸45 s，共27（細(xì)菌）或37（真菌）個循環(huán)；最后72 ℃延伸10 min。

4.Miseq 測序系統(tǒng)對面部皮膚細(xì)菌16S rRNA V1-V2區(qū)和真菌ITS1-ITS2區(qū)進(jìn)行測序：用2%瓊脂糖凝膠回收PCR產(chǎn)物，利用AxyPrep DNA凝膠回收試劑盒進(jìn)行純化，Tris-HCl 洗脫，2%瓊脂糖凝膠電泳檢測。采用QuantiFluor?-ST 微型熒光計定量檢測PCR產(chǎn)物。根據(jù)Illumina MiSeq系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程將純化后的擴(kuò)增片段構(gòu)建PE300 的測序策略。測序過程均由上海美吉生物醫(yī)藥科技有限公司完成。

5.測序數(shù)據(jù)處理：原始測序序列使用Trimmomatic軟件質(zhì)控，使用FLASH軟件進(jìn)行拼接：①設(shè)置50 bp 的窗口，如果窗口內(nèi)的平均質(zhì)量值低于20，從窗口開始截去后端堿基，去除質(zhì)控后長度低于50 bp 的序列；②DNA 條形碼需精確匹配，引物允許2 個堿基的錯配，去除模糊堿基；③根據(jù)重疊堿基的重疊部分將兩端序列進(jìn)行拼接，其中重疊部分需＞10 bp。去除無法拼接的序列。

使用 UPARSE 軟件（version 7.1，http：//drive5.com/uparse/），根據(jù)97%的相似度對序列進(jìn)行OTU（operational taxonomic units）聚類；使用UCHIME 軟件剔除嵌合體。利用RDP 分類器（http：//rdp.cme.msu.edu/）對每條序列進(jìn)行物種分類注釋，比對數(shù)據(jù)庫為細(xì)菌Silva（Release128 http：//www.arb-silva.de）和真菌 Unite（Release 6.0 http：//unite.ut.ee/index.php）數(shù)據(jù)庫，設(shè)置比對閾值為70%。

6.不同主觀皮膚類型面頰皮膚微生物多樣性結(jié)構(gòu)差異分析：①Alpha多樣性：通過單樣本的多樣性分析反映微生物群落的豐度和多樣性，用Chao指數(shù)來評估物種總數(shù)，值越大，群落豐富度越高；Shannon 指數(shù)常用來衡量菌群多樣性；②Beta 多樣性：對 4 組樣本進(jìn)行 PCoA 分析，PCoA 是一種非約束性的數(shù)據(jù)降維分析方法，本研究采用加權(quán)的UniFrac，可以更完全地反映樣本之間的距離；③群落組成比較：分析4 組皮膚細(xì)菌、真菌在門、屬、種水平上的優(yōu)勢菌。

7.統(tǒng)計學(xué)分析：采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。皮膚理化指標(biāo)檢測結(jié)果采用表示，4 種皮膚類型間皮膚理化指標(biāo)的比較采用單因素方差分析，兩兩間多重比較采用LSD-t檢驗，P＜0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

一、不同主觀皮膚類型皮膚理化指標(biāo)差異

見圖1。皮膚水分和油脂含量隨干性、中性、混合性、油性皮膚分型逐漸上升，且4 種主觀皮膚類型間皮膚油脂含量（F=11.685，P＜ 0.001）和溫度（F=3.017，P=0.047）差異有統(tǒng)計學(xué)意義；4種主觀皮膚類型間皮膚水分含量、經(jīng)皮水分丟失和pH值差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（F值分別為0.258、1.977、1.287，均P＞0.05）。兩兩多重比較顯示，油性組皮膚表面油脂含量顯著高于干性、中性、混合性組（LSD-t值分別為5.15、4.86、4.06，均P＜ 0.001），其余各組間皮膚油脂含量差異無統(tǒng)計學(xué)意義。干性組皮膚溫度顯著低于中性組和油性組（LSD-t值分別為2.16、2.67，均P＜ 0.05），其余各組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

圖1 31例健康年輕女性4種主觀皮膚類型面部理化指標(biāo)比較 皮膚水分和油脂含量平均值按干性、中性、混合性、油性皮膚類型逐漸上升，油性組皮膚油脂含量和溫度都明顯高于干性組，且油性組皮膚油脂含量也明顯高于其他兩組；4種主觀皮膚類型間皮膚水分含量、經(jīng)皮水分丟失和pH值差異無統(tǒng)計學(xué)意義。a：P ＜ 0.001；b：P ＜ 0.05

二、受試者面頰皮膚微生物組成

1.細(xì)菌群落組成：測序后共得到1 132 581 條細(xì)菌16S rRNA V1-V2 區(qū)序列，在97%的相似水平下，對31 個樣本進(jìn)行聚類和注釋，共得到2 434 個OTU，歸屬于28個菌門，776個菌屬，1 590個菌種。豐度＞1%的物種為面頰皮膚主要物種，本實驗組31個樣本1 132 581個細(xì)菌門水平上主要由放線菌門（575 896，50.85%）、厚 壁 菌 門（363 200，32.07%）、變性菌門（139 835，12.35%）、擬桿菌門（30 718，2.71%）和其他含量較小的菌門（22 932，2.02%）組成；屬水平上主要由丙酸桿菌（444 329，39.23%）、葡萄球菌（220 322，19.45%）、鏈球菌（93 136，8.22%）、紅球菌（35 821，3.16%）、棒狀桿菌（29 505，2.61%）、假單胞菌（20 916，1.85%）、微球菌（19 445，1.72%）、奈瑟氏菌（15 699，1.39%）和其他含量較小的菌屬（253 408，22.37%）組成。種水平上檢測到表皮葡萄球菌PM221 占14.53%（164 580），慶笙紅球菌（Rhodococcus qingshengii）占2.52%（28 551），人葡萄球菌占1.76%（19 909），馬胃葡萄球菌（Staphylococcus equorum）占1.74%（19 741）。

2.真菌群落組成：測序后共得到2 100 986 條真菌ITS1-ITS2 區(qū)序列，在97%的相似水平下，對31 個樣本進(jìn)行聚類和注釋，共得到806 個OTU，歸屬于 4 個菌門，284 個菌屬，471 個菌種。共檢測到4 個門類，主要為子囊菌門（1 795 030，85.44%）和擔(dān)子菌門（289 872，13.80%）。共檢測到15 個屬水平上平均豐度＞1%的菌群，其中9個有分類命名，依次為曲霉屬（429 787，20.46%）、鏈格孢屬（299 579，14.26%）、隱球酵母屬（130 189，6.20%）、青霉菌屬（52 810，2.51%）、馬拉色菌屬（48 453，2.31%）、赤霉菌屬（42 992，2.05%）、枝孢屬（40 912，1.95%）、支頂孢屬（38 399，1.83%）、鐮刀菌屬（26 394，1.26%）。

進(jìn)一步對屬水平豐度＞1%的物種進(jìn)行種水平分析，詳見表1。曲霉屬檢測到17 個種，其中豐度＞0.1%的可鑒定種有6個，占18.72%；鏈格孢屬檢測到4 個種，無豐度＞0.1%的可命名種；隱球酵母屬檢測到17個種，其中豐度＞0.1%的種有6個，占5.85%；青霉菌屬檢測到17 個種，其中豐度＞0.1%的可命名種有4 個，占1.12%；馬拉色菌屬共檢測到7 個種，其中豐度＞0.1%的種有2個，為限制性馬拉色菌（2.06%，43 382）和球形馬拉色菌（0.12%，2 481）；赤霉菌屬共檢測到3個種，其中豐度＞0.1%的種僅錯綜赤霉（1.98%，41 547）；枝孢屬檢測到7 個種，其中豐度＞0.1%的可鑒定種有3 個，占1.25%；支頂孢屬檢測到14 個種，豐度＞0.1%的種有3 個，其中有分類名種占1.24%，未命名種占0.18%；鐮刀菌屬檢測到14 個種，無豐度＞0.1%的可命名種。

表1 健康年輕女性受試者面頰皮膚種水平上豐度＞0.1%的真菌物種

三、細(xì)菌多樣性差異分析

1.Alpha 多樣性：不同主觀皮膚類型細(xì)菌物種豐富度（圖2A）差異無統(tǒng)計學(xué)意義（F= 0.437，P=0.728）。而細(xì)菌物種多樣性（圖2B）隨干性、中性、混合性、油性皮膚類型逐漸降低，4 組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（F=5.634，P=0.004），其中干性皮膚細(xì)菌物種多樣性顯著高于油性皮膚和混合性皮膚（LSD-t=3.85、2.06，P=0.001、0.049），中性皮膚顯著高于油性皮膚（LSD-t=3.03，P=0.005），中性皮膚與干性皮膚和混合性皮膚間、混合性皮膚與油性皮膚間差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

2.Beta多樣性：見圖2C。PCoA分析顯示，干性組和油性組樣本完全無交叉，而中性組和混合性組交叉在兩組之間，說明干性皮膚和油性皮膚細(xì)菌組成結(jié)構(gòu)和豐度差異較大。

3.細(xì)菌群落組成比較：4 組皮膚細(xì)菌均以放線菌門最具優(yōu)勢（圖3A），但組間放線菌門相對豐度差異有統(tǒng)計學(xué)意義（F=5.045，P=0.007），其中油性組放線菌門相對豐度最高（74.05% ± 11.32%），干性組最低（39.51%±9.98%），兩兩多重比較結(jié)果顯示，干性組、中性組、混合性組均顯著低于油性組（LSD-t值分別為3.27、2.96、3.18，均P＜ 0.01），其余各組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞0.05）。厚壁菌門為各組第二優(yōu)勢菌，組間比較相對豐度差異無統(tǒng)計學(xué)意義（F=2.364，P=0.093）。此外，變形菌門（干性：18.03% ±12.43%、中性：15.44%±11.32%、混合性：11.46%±9.64%、油性：5.69% ±3.18%）、擬桿菌門（干性：4.71% ±4.53%、中性：3.99% ±3.93%、混合性：2.23% ±3.44%、油性：0.92% ±0.85%）、梭桿菌門（干性：2.37%±2.97%、中性：0.87%±0.86%，混合性：0.44%±0.65%、油性：0.14%±0.15%）按干性、中性、混合性、油性皮膚類型順序逐漸下降，且梭桿菌門相對豐度在各組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（F=3.304，P=0.035），變形菌門和擬桿菌門相對豐度在各組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞0.05）。兩兩多重比較顯示，干性組梭桿菌門相對豐度顯著高于油性組（LSD-t= 2.95，P= 0.006）和混合性組（LSD-t=2.61，P=0.014），其余各組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞ 0.05）。

圖2 31 例健康年輕女性不同主觀皮膚類型細(xì)菌物種多樣性分析 2A：不同主觀皮膚類型細(xì)菌物種Chao 指數(shù)差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P ＞0.05）；2B：不同主觀皮膚類型細(xì)菌物種Shannon指數(shù)差異有統(tǒng)計學(xué)意義（F=5.634，P=0.004）。a：P ＜ 0.05，b：P=0.005，c：P=0.001；2C：主坐標(biāo)分析PCoA（principal co-ordinates analysis）圖。PCoA是一種研究數(shù)據(jù)相似性或差異性的可視化方法，通過一系列的特征值和特征向量進(jìn)行排序后，選擇主要排在前幾位的特征值，通過PCoA可以觀察個體或群體間的差異。本研究使用的距離算法為Weighted-UniFrac（考慮物種間進(jìn)化關(guān)系和物種豐度）。PC1（principal co-ordinates 1）和PC2（principal co-ordinates 2）是兩個主坐標(biāo)成分，PC1 表示盡可能最大解釋數(shù)據(jù)變化的主坐標(biāo)成分，PC2 為解釋余下的變化度中占比最大的主坐標(biāo)成分。在主坐標(biāo)成分PC1維度上（解釋度52.7%）干性皮膚組樣本和油性皮膚組樣本可以完全分離開說明干性皮膚和油性皮膚的皮膚細(xì)菌組成和豐度差異最大

圖3 31例健康年輕女性不同主觀類型皮膚細(xì)菌物種組成柱狀圖 3A：門水平上至少在一組中豐度大于1%的細(xì)菌物種組成，根據(jù)豐度大小依次為放線菌門、厚壁菌門、變形菌門、擬桿菌門、梭桿菌門和藍(lán)藻細(xì)菌，其中變形菌門、擬桿菌門、梭桿菌門豐度隨干性、中性、混合性、油性皮膚類型逐漸下降；3B：屬水平上至少在一組中豐度大于0.5%的細(xì)菌物種組成，按物種豐度從高到低排列

屬水平上（圖3B），4 組皮膚細(xì)菌均以丙酸桿菌、葡萄球菌和鏈球菌為優(yōu)勢菌，且丙酸桿菌-葡萄球菌-鏈球菌（放線菌-厚壁菌微生物群）的聯(lián)合相對豐度隨干性、中性、混合性、油性皮膚類型逐漸上升（F=5.063，P=0.007），其中丙酸桿菌-葡萄球菌的聯(lián)合相對豐度及丙酸桿菌的相對豐度也逐漸上升，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（F= 5.533、5.535，均P=0.004）。兩兩多重比較顯示，油性組丙酸桿菌豐度（68.24% ± 14.78%）顯著高于干性組（18.83% ±14.49%，LSD-t=3.77，P＜ 0.001）、中性組（32.18% ±36.29%，LSD-t= 2.97，P= 0.006）和混合性組（35.22% ± 22.58%，LSD-t=2.80，P=0.009），其余各組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞0.05）。葡萄球菌相對豐度在混合性組（31.61% ± 24.01%）最高，且顯著高于中性組（11.30% ± 7.95%，LSD-t= 2.70，P=0.012）和油性組（14.23% ± 10.09%，LSD-t=2.31，P=0.029），其余各組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞0.05）。鏈球菌在中性組豐度最高（16.00% ±17.06%），且顯著高于油性組（2.14%±2.29%，LSD-t=2.50，P=0.019），其余各組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞ 0.05）。

除優(yōu)勢菌外，對豐度＞1%的菌屬進(jìn)行差異性檢驗，結(jié)果顯示，微球菌（F=3.514，P=0.029）、放線菌（F=5.507，P=0.007）、羅氏菌（F=4.394，P=0.012）、副球菌（F= 3.189，P= 0.040）相對豐度在4組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義。兩兩多重比較顯示，干性組微球菌和副球菌相對豐度顯著高于中性組（LSD-t= 2.94、2.65，P= 0.007、0.013）、混合性組（LSD-t= 3.05、0.29，P= 0.009、0.021）和油性組（LSD-t=2.53、0.08，P=0.027、0.011），中性組放線菌相對豐度高于混合性組（LSD-t=3.34，P=0.002）和油性組（LSD-t=3.42，P=0.002），中性組羅氏菌豐度高于干性組（LSD-t=2.41，P=0.023）、混合性組（LSD-t= 2.77，P= 0.006）和油性組（LSD-t=2.99，P= 0.003），其余各組差異無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞0.05）。其余菌屬，如紅球菌、棒狀桿菌、假單胞菌等相對豐度在4 組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞0.05）。

四、真菌多樣性差異分析

4 組皮膚真菌多樣性（Shannon 指數(shù)）和豐富度（Chao 指數(shù)）差異無統(tǒng)計學(xué)意義（F= 0.304、0.296，P=0.822、0.828）。進(jìn)一步分析顯示，4組真菌門水平上主要由子囊菌門和擔(dān)子菌門組成，且4組間比較相對豐度差異無統(tǒng)計學(xué)意義（F= 0.419、0.740，P=0.465、0.709）。4組屬水平上豐度＞1%的皮膚真菌組成見表2，單因素方差分析顯示，4 組間豐度＞1%的相對豐度真菌屬差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞ 0.05）。

討 論

干性皮膚者普遍存在屏障功能缺陷，皮膚干燥易引起皮膚敏感，甚至發(fā)展成為炎癥性皮膚病［15-16］，油性皮膚容易發(fā)生痤瘡和脂溢性皮炎［17-18］，了解不同皮膚類型微生物組成，從微生態(tài)的角度深刻分析不同皮膚類型皮膚狀態(tài)，對皮膚疾病的預(yù)防和治療有重要意義。人們通常根據(jù)主觀皮膚分型選擇相應(yīng)的皮膚護(hù)理方法，因此了解不同主觀皮膚類型的特點非常重要。由于20 ～25歲年齡段女性主觀皮膚類型與客觀皮膚無創(chuàng)性檢測結(jié)果的吻合度比較高［14，19］，本研究選擇受試者為 20 ～ 25 歲女性，按自評皮膚類型將31 例受試者分為干性、中性、混合性、油性4 組。比較4 組面部理化指標(biāo)顯示，皮膚水分和油脂含量按干性、中性、混合性、油性皮膚類型順序逐漸上升，且4組間油脂含量差異有統(tǒng)計學(xué)意義，說明自評皮膚類型與皮膚油脂含量基本相符。中性皮膚經(jīng)皮水分散失量最低，代表皮膚屏障最好，但4組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

表2 健康年輕女性受試者不同主觀類型皮膚真菌屬（至少在一組中平均豐度大于1%）豐度的差異

本研究測序分析顯示，成年健康女性皮膚細(xì)菌群落門水平上以放線菌門等4個菌門豐度較高；屬水平上丙酸桿菌屬占主要優(yōu)勢，其次為葡萄球菌屬、鏈球菌屬、紅球菌屬等，與已有研究結(jié)果相似［10，20］；種水平上檢測到表皮葡萄球菌 PM221 等4 個菌種豐度較高。真菌群落主要為子囊菌門和擔(dān)子菌門，與以往研究中馬拉色菌為主要皮膚真菌的結(jié)論不同［21］，本研究中曲霉屬和鏈格孢屬在青年女性面部皮膚中豐度較高，而馬拉色菌豐度不占主要優(yōu)勢。推測造成差異的原因可能與測試部位、人群、地域或?qū)嶒灧椒ㄏ嚓P(guān)。而且，真菌穩(wěn)定性較細(xì)菌差。遲亮等［21］檢測的是上海4例男性和4例女性額部真菌，與面頰相比，額部油脂分泌量更高，更有利于馬拉色菌等親脂性真菌的生長。且本研究采用的方法為棉拭子法，主要采集皮膚淺表微生物，對于毛孔等更深處微生物的采集存在一定缺陷。

不同皮膚類型細(xì)菌物種豐富度差異無統(tǒng)計學(xué)意義，但細(xì)菌物種多樣性按干性、中性、混合性、油性皮膚類型順序逐漸降低，干性皮膚多樣性最高，油性皮膚多樣性最低，與同一個體不同部位之間細(xì)菌組成的差異（干性部位多樣性高，油性部位多樣性低）類似［8］。細(xì)菌多樣性與面部油脂含量整體變化趨勢相反，說明面部皮膚油脂對皮膚細(xì)菌定植可能有選擇性，與文獻(xiàn)報道相符［10］。微生物組成結(jié)構(gòu)比較發(fā)現(xiàn)，油性皮膚丙酸桿菌豐度極高，高油脂的環(huán)境為親油性的丙酸桿菌提供了良好的生長條件，而丙酸桿菌的高豐度可能引起菌群之間的拮抗，從而導(dǎo)致油性皮膚多樣性降低。中性皮膚是最理想的皮膚類型，皮脂分泌量和含水量基本保持平衡，皮膚屏障相對完整，屬水平上鏈球菌、羅氏菌和放線菌相對豐度高于其他3組。干性皮膚丙酸桿菌-葡萄球菌-鏈球菌三種主要菌群的聯(lián)合相對豐度較低，但微球菌和副球菌等非優(yōu)勢菌群相對豐度較高，且溶桿菌只存在于干性皮膚組。溶桿菌屬大多數(shù)細(xì)菌對許多病菌有高效的拮抗作用，在植物病害預(yù)防中起重要作用，而干性皮膚的屏障功能有一定程度受損，容易繼發(fā)病原菌的入侵和皮膚微生態(tài)失衡，溶桿菌屬可能在其中扮演拮抗病原菌的角色［22］。不同皮膚類型真菌多樣性和豐富度差異無統(tǒng)計學(xué)意義，可能由于皮膚類型間的差異對真菌定植的影響較小，或者由于本研究樣本量較少，皮膚真菌豐度較細(xì)菌低，未發(fā)現(xiàn)其在不同類型皮膚間的差異。

綜上所述，不同主觀皮膚類型面頰皮膚生理指標(biāo)和細(xì)菌多樣性存在一定差異，皮膚細(xì)菌定植依賴主觀皮膚類型，而真菌的定植則可能不依賴皮膚類型。本研究為“精準(zhǔn)護(hù)膚”和皮膚疾病的預(yù)防提供理論支撐，但不同皮膚類型與微生物的關(guān)系還需要加大樣本量進(jìn)一步研究。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突