探究新生兒溶血病三項(xiàng)檢測方法及臨床意義

何 杰

（揚(yáng)州市江都婦幼保健院，江蘇 揚(yáng)州 225200）

新生兒溶血病（hemolytic disease of newborn，HDN）是指由于母子血型不合，母親體內(nèi)產(chǎn)生與胎兒血型抗原不配的血型抗體。新生兒溶血三項(xiàng)檢測是臨床診斷新生兒溶血病的常用方法[1]，可為新生兒溶血癥的診斷及治療提供依據(jù)，對預(yù)后改善有重要意義。本文旨在進(jìn)一步分析新生兒溶血病三項(xiàng)檢測方法及臨床意義，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選取我院自2018年1月至2018年12 月收治的80例高膽紅素血癥患兒做為此次研究對象，納入標(biāo)準(zhǔn)：符合《中華兒科雜志》中的診斷標(biāo)準(zhǔn)，臨床表現(xiàn)為貧血及黃疸，患兒家屬理解并簽署該研究制定的知情同意書，自愿參與本次研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：無合并免疫系統(tǒng)疾病者、精神病者。男性患兒45例，女性患兒35例；年齡0～18 d，平均年齡（11.34±3.45）d；總膽紅素水平255～345 μmol/L，平均水平（278.67±14.78）μmol/L。

1.2 方法：①母嬰血型檢測。正定型：制備1.0%紅細(xì)胞鹽水懸液，撕開檢測卡的封膜，將1%待檢RBC生理鹽水各加50 mL到蘭A、黃B、灰D及其Control微柱管反應(yīng)腔中，按照每分鐘1800 r，2 min；每分鐘2500 r，1 min離心，取出檢測卡，判定結(jié)果。反定型：離心操作取出血漿待檢驗(yàn)，制備1.0%紅細(xì)胞鹽水懸液。于白色A、B、O及自身管中分別加入待檢血漿50 mL，然后再加入相對應(yīng)的1%A1、B、O試劑紅細(xì)胞、待檢紅細(xì)胞生理鹽水懸液50 mL。放置10 min后，按照每分鐘1800 r，2 min；每分鐘2500 r，1 min離心，取出檢測卡，判定結(jié)果。②溶血三項(xiàng)檢測。采用微柱凝膠免疫法測定紅細(xì)胞直接抗人球蛋白試驗(yàn)、游離抗體試驗(yàn)、抗體釋放試驗(yàn)。紅細(xì)胞直接抗人球蛋白試驗(yàn)（直抗試驗(yàn)）：采用生理鹽水洗滌新生兒紅細(xì)胞，洗滌3次，制作1%的紅細(xì)胞懸液，將50 μL紅細(xì)胞懸液加入到Liss/Coombs卡第一管中。游離抗體試驗(yàn)（游離試驗(yàn)）：與患者相同血型的50 μL 1%紅細(xì)胞懸液加入到Liss/Coombs卡第二管中，然后加入25 μL患兒血清。抗體釋放試驗(yàn)（釋放試驗(yàn)）：將處理的患兒紅細(xì)胞散液50 μL與25 μL 1%標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞加入到Liss/Coombs卡第三管中。將所有加完樣本的Liss/Coombs卡管均放入到恒溫孵育箱中，孵育15 min，均放入到離心機(jī)內(nèi)離心10 min，判定結(jié)果。新生兒溶血病的判斷標(biāo)準(zhǔn)：抗體釋放試驗(yàn)為陽性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：臨床所有數(shù)據(jù)均采用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料采用例數(shù)和百分比（%）表示，組間行χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05時，表示具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 測定結(jié)果：80例高膽紅素血癥患兒中，確診為ABO-HDN有12例，占15.00%。抗體釋放試驗(yàn)陽性11例，陽性率91.61%，直抗試驗(yàn)陽性6例，陽性率50.00%；游離試驗(yàn)陽性10例，占83.33%。溶血三項(xiàng)測定模式情況見表1。

表1 溶血三項(xiàng)測定模式及結(jié)果

2.2 新生兒溶血病血型分布情況：新生兒AB0-HDN血型中，母嬰血清O/A陽性率最高，占58.23%，均高于其他血型，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 新生兒AB0-HDN血型分布情況

2.3 新生兒溶血病陽性與患兒日齡關(guān)系分析：患兒日齡0～4 d內(nèi)，陽性率18.52%；患兒日齡＞4 d，陽性率為7.69%，二者經(jīng)比較，有顯著差異（P＜0.05），見表3。

表3 新生兒溶血病陽性與患兒日齡關(guān)系分析

3 討 論

新生兒溶血病的溶血三項(xiàng)檢測是當(dāng)前普遍認(rèn)為有效的檢測方法，包括紅細(xì)胞直接抗人球蛋白試驗(yàn)、游離抗體試驗(yàn)、抗體釋放試驗(yàn)，紅細(xì)胞直接抗人球蛋白試驗(yàn)陽性表明新生兒紅細(xì)胞上存在免疫性抗體IgG，其陽性強(qiáng)度與溶血程度相關(guān)，且呈正相關(guān)[2-3]。游離抗體試驗(yàn)主要是檢測新生兒血液中是否存在與紅細(xì)胞不合的ABO以外抗體，可為疾病程度提供參考依據(jù)[4]。若血清中多余的抗體并未結(jié)合到紅細(xì)胞中，當(dāng)產(chǎn)生新的紅細(xì)胞后，仍會致敏，有著較長的病程[5]。以上兩種試驗(yàn)陽性并不能確診新生兒溶血病，而抗體釋放試驗(yàn)可檢測放散液及酶處理的患兒紅細(xì)胞血型IgG抗體。若檢測為陽性，則表明患兒紅細(xì)胞與母親的IgG抗體相結(jié)合，可直接診斷新生兒溶血病[6]。在本次研究中，80例高膽紅素癥患兒中，有12例為ABO溶血病，抗體釋放試驗(yàn)陽性率91.83%，均高于其他兩種試驗(yàn)陽性率，充分證明了抗體釋放試驗(yàn)有著較高靈敏度，可為新生兒溶血病的診斷提供給依據(jù)。且本研究還發(fā)現(xiàn)新生兒ABO-HDN血型中母嬰血清O/A陽性率最高58.33%，可能是由于O型血母親缺乏新生兒父親所繼承的血型抗原A或者B型，此種抗原在母親懷孕及分娩時，可進(jìn)入到母體激活母體免疫系統(tǒng)，進(jìn)而產(chǎn)生抗A及抗B的IgG抗體，最終引發(fā)新生兒溶血病[7]。本次研究還發(fā)現(xiàn)新生兒日齡0～4內(nèi)，陽性率18.52%高于＞4 d的患兒，主要由于新生兒血液中有著較多的游離IgG抗體及致敏的紅細(xì)胞，且隨著發(fā)病時間的延長，IgG抗體以游離的抗原體抗體復(fù)合物而存在，失去反應(yīng)原性，進(jìn)而降低了陽性率。因此，應(yīng)盡早送檢患兒血液，提高新生兒溶血病的診斷率，以免誤診及漏診。

綜上所述，新生兒溶血病三項(xiàng)檢測方法中抗體釋放試驗(yàn)陽性率最高，溶血病的診斷與送檢時期相關(guān)，可為臨床診斷及治療提供參考依據(jù)。