隱匿性乙型肝炎病毒感染情況分析

張小蘭　趙潤(rùn)玲　吳依蕓　李紅梅

摘要目的：對(duì)隱匿性乙肝流行現(xiàn)狀進(jìn)行調(diào)查，分析乙肝病毒（HBV）隱匿性感染的血清學(xué)及HBV-DNA特點(diǎn)。方法：采用時(shí)間分辨熒光法和熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）法檢測(cè)血清乙肝血清標(biāo)志物和HBV-DNA600例。結(jié)果：血清血清表面抗原（HBsAg）陰性而HBV-DNA陽(yáng)性90例，隱匿性HBV檢出率為15%。其中HBsAg（-）的患者中，抗-HBe（+）抗-HBc（+）患者的隱匿性感染率顯著高于抗-HBe（-）抗-HBc（+）患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;Anti-HBe（+）隱匿性感染者的HBV-DNA水平顯著高于Anti-HBe（-）隱匿性感染者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：日常門診血清的隱匿性HBV檢出率較高，尤其是抗-HBe（+）抗-HBc（+）患者的隱匿性HBV感染率顯著高于其他人群，在診斷時(shí)需要注意。

關(guān)鍵詞 隱匿性感染;HBV;高敏HBV-DNA;時(shí)間分辨

隱匿性乙肝病毒（HBV）感染，又稱為免疫靜默感染，已發(fā)現(xiàn)應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）技術(shù)檢測(cè)部分血清表面抗原（HBsAg）陰性的個(gè)體血清和（或）肝組織中HBV-DNA呈陽(yáng)性"。這種感染狀態(tài)可見(jiàn)于HBV血清學(xué)標(biāo)志均陰性的個(gè)體，也可發(fā)生于抗-HBs和（或）抗-HBc陽(yáng)性的患者。我國(guó)是HBV高流行地區(qū)，可能存在很多未被證實(shí)的隱匿性HBV感染者，引起不明原因肝病。對(duì)五家渠第六師醫(yī)院的600份樣本進(jìn)行HBV血清學(xué)和核酸檢測(cè)，統(tǒng)計(jì)分析隱匿性感染情況及其血清學(xué)和HBV-DNA特點(diǎn)。

資料與方法

2016年6月-2017年12月收集日常檢查乙肝五項(xiàng)的門診患者血清學(xué)標(biāo)本600例。

HBV血清學(xué)檢測(cè)：采用時(shí)間分辨熒光分析法檢測(cè)乙肝五項(xiàng)標(biāo)志物。使用Abbott微粒子化學(xué)發(fā)光確認(rèn)。

HBV-DNA定量檢測(cè)：采用熒光定量PCR技術(shù)進(jìn)行定量檢測(cè)。

統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料用[n（%）]表，示，采用x“檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

600例樣本中共檢測(cè)到90例隱匿性感染患者，Anti-HBe陽(yáng)性、Anti-HBe陽(yáng)性66例，Anti-HBe陰性、Anti-HBc陽(yáng)性24例，見(jiàn)表1。

隱匿性感染患者情況分析：HBsAg陰性且Anti-HBc陽(yáng)性患者中，Anti-HBe陽(yáng)性患者的隱匿性檢出率顯著高于Anti-HBe陰性患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。Anti-HBe陽(yáng)性隱匿性感染者的HBV-DNA水平顯著高于Anti-HBe陰性隱匿性感染者（357.52IU/mLvs64.52IU/mL），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表2。

討論

血清乙肝五項(xiàng)標(biāo)志是反映HBV復(fù)制能力和感染狀態(tài)的主要手段。一般情況下，HBsAg（-），抗-HBc（+）或抗HBe（+），表示機(jī)體已清除HBV或乙肝恢復(fù)期。但是近年來(lái)隨著基因診斷技術(shù)的發(fā)展，尤其是PCR技術(shù)已廣泛應(yīng)用于HBV診斷和治療，HBsAg（-）但HBV-DNA（+）的隱匿性感染狀態(tài)已越來(lái)越多地出現(xiàn)在臨床診療過(guò)程中，由于感染狀態(tài)因?yàn)槠涮厥獾臄y帶方式和臨床表現(xiàn)，會(huì)帶來(lái)嚴(yán)重的危害。本次研究在600例日常乙肝檢測(cè)樣本中發(fā)現(xiàn)90例為隱匿性HBV感染，隱匿性HBV檢出率為15%，與不明原因肝炎密切相關(guān)，與文獻(xiàn)報(bào)道一致。其中抗-HBe（+）抗-HBc（+）患者的隱匿性HBV感染率顯著高于其他人群，在診斷時(shí)需要注意。隱匿性感染的原因暫無(wú)定論，主要由以下幾種假設(shè)：①不同亞型HBV再感染：共同的抗原決定簇a和相互排.斥的抗原決定簇w/r.d/y決定了HBV的4個(gè)主要血清亞型（adw、adr、ayw.ayr）。而HBV核苷酸序列上的個(gè)別堿基決定了亞型的不同，從而決定了HBV的高度變異性。②宿主及相關(guān)因素：HBV隱匿性感染的另一個(gè)因素為感染時(shí)間長(zhǎng)或免疫應(yīng)答異常。普遍認(rèn)為終止HBV病毒的主要機(jī)制為細(xì)胞免疫介導(dǎo)的免疫應(yīng)答，隱匿性HBV感染會(huì)在機(jī)體免疫功能低下或處于免疫耐受狀態(tài)時(shí)出現(xiàn)，因此低水平病毒起不到清除作用。③HBV基因突變可能為隱匿性HBV感染者血清HbsAg陰性的一個(gè)原因：HBV變異體感染，產(chǎn)生HBVS蛋白（呈抗原性變化），即使用最靈敏的檢測(cè)試劑仍無(wú)法檢出，或攜帶能抑制S基因表達(dá)和（或）病毒復(fù)制的突變，Hu等也報(bào)道OBI患者體內(nèi)的乙肝病毒S區(qū)的MHR的變異導(dǎo)致HbsAg的抗原性的改變和減低病毒顆粒的分泌量，但對(duì)HBV-DNA和HBV-RNA的水平無(wú)影響”。④檢測(cè)試劑的特異性和靈敏度：臨床診斷試劑盒一般僅對(duì)某一種基因型或血清型有特異性。如由ay亞型抗體和抗原制備的Abbott試劑盒，對(duì)ad亞型靈敏度的檢測(cè)相對(duì)較低。⑤其他因素對(duì)HBsAg合成的影響或受其他病毒感染的干擾：體外實(shí)驗(yàn)已證實(shí)丙型肝炎病毒（HCV）的重疊感染可抑制HBV復(fù)制，丁型肝炎病毒（HDV）和血吸蟲(chóng)感染同樣可抑制肝實(shí)質(zhì)內(nèi)HBV活性，導(dǎo)致HBV復(fù)制受限而呈低水平的HBsAg。⑥多數(shù)研究發(fā)現(xiàn)，隱匿性HBV感染可能與低于檢測(cè)限的低水平HBV感染：隱匿性HBv感染者血清HBV-DNA水平很低，常規(guī)PCR技術(shù)無(wú)法檢出，其水平一般為l0～100copies/mL，需采用靈敏度及特異度高的PCR技術(shù)并進(jìn)行分子檢測(cè)確認(rèn)4。HBV血清學(xué)標(biāo)志檢測(cè)試劑的靈敏度低可能是我國(guó)隱匿性HBV感染的原因之一。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)乙肝病毒感染的治療主要采用保肝、抗感染、抗纖維化、抗病毒、免疫調(diào)節(jié)。抗病毒治療作為一種重要手段在臨床上被廣泛應(yīng)用，但抗病毒治療的指征僅為HBsAg陽(yáng)性的患者。目前對(duì)于HBsAg陰性患者是否應(yīng)接受抗病毒治療，如何規(guī)范用藥尚無(wú)相關(guān)研究。患者對(duì)病毒感染的清除能力因機(jī)體特異性免疫應(yīng)答缺陷而降低，可導(dǎo)致持續(xù)的HBV感染。因此，對(duì)HBsAg陰性HBV感染的治療，強(qiáng)化細(xì)胞免疫應(yīng)答可能為一種方法。

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