曾乙心,金福財,熊正興,何永宏*
(1.文山州煙草公司 丘北縣分公司,云南 丘北 663299; 2.云南農業大學 植物保護學院,云南 昆明 650100)
煙草黑脛病主要是由于土壤中的越冬病原菌通過雨水、風、農事操作等進行傳播[1-2]。從煙苗移栽至煙株發病存在一定的時間,這段時間即為煙草黑脛病病原菌的潛育期。前人對煙草黑脛病潛育期的研究已過去較長時間,不能很好地指導現在黑脛病防治工作。本試驗以云南主要栽培品種為材料,獲取不同煙草品種發生煙草黑脛病的潛育期,為煙草黑脛病的防治提供時間推算依據。
煙草黑脛病菌采用土豆培養基培養。參試煙草品種有云煙85、云煙87、紅花大金元、K 326等4個,苗齡一致。
取實驗室提供的菌絲接種于土豆培養基上,28 ℃恒溫培養5~7 d,-4 ℃保存備用。參考楊建卿的游動孢子制作方法制作煙草黑脛病病菌游動孢子[3-5]。
將4個品種的煙苗移栽在裝有1.5 kg無菌土壤的花盆中,并每株澆灌1萬·mL-1煙草黑脛病病菌游動孢子懸浮液1.5 L,于30 ℃人工氣候箱中培養。每個品種澆灌10株煙苗。每天觀察記錄發病情況。
肉眼觀察分離純化培養的煙草黑脛病病菌,可看到培養基上有大量乳白色菌絲,表面凸起,質地黏稠。在顯微鏡下觀察,菌絲無色透明,無隔膜,粗細不一,梨形或橢圓形,內含顆粒,頂端有一乳頭狀突起,無色透明(圖1)。

圖1 煙草黑脛病病菌形態
煙草苗用灌根法接種煙草黑脛病,紅花大金元在接種后6 d就發病,9 d發病率迅速達50%(表1);云煙87在接種后12 d開始發病,15 d發病率迅速達50%;云煙85在接種后15 d發病,18 d發病率達50%;K326在接種后18 d發病,到21 d發病率達50%。紅花大金元的潛育期為9 d;云煙87為15 d;云煙85為18 d;K326為21 d。

表1 不同煙草品種接種煙草黑脛病菌的發病率
相較于噴施法和針灌法,灌根法對煙苗的損傷較小,澆灌量大,能使煙苗在最快時間感染煙草黑脛病。本試驗結果表明,紅花大金元屬于易感品種,云煙87屬于中抗品種,云煙85和K326屬于高抗品種,結論與前人研究結果一致[4-5]。
煙草品種對煙草黑脛病的潛育期的影響很大,紅花大金元在適宜發病條件下潛育期只有9 d,K326潛育期長達21 d,潛育期的跨度很大。此結果與田間發病規律非常相似,田間病情從移栽后要30 d左右才穩定即達到發病率最高值[2]。但試驗中人工氣候箱中的小環境與實際生產有差異,研究結果可作為生產實際的參考。