匹杉醇聯合自體外周血干細胞移植治療非霍奇金淋巴瘤的療效及對T細胞亞群的影響

鐘春林 李發祥 劉炎華

淋巴瘤是一種起源于淋巴細胞的惡性增殖性疾病，主要分為霍奇金淋巴瘤(Hodgkin's lymphoma,HL)和非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin's lymphoma,NHL)。NHL根據臨床分期和分型的不同，主要采用化療、放射性治療以及單克隆抗體等綜合治療，但隨著傳統 CHOP、CHOEP 或 COAP 方案藥物應用劑量的增加，心臟毒性也隨之增加，因此臨床尋求一種新型的治療方法。國內外研究表明，自體外周血干細胞移植(autologous peripheral blood stem cell transplantation，APBSCT)已用于難治復發性和(或)侵襲性非霍奇金淋巴瘤治療，但移植后40%～60%NHL患者出現復發并最終死亡[1]。匹杉醇為一新型蒽環類藥物，已由歐盟批準單獨用于治療成人復發難治侵襲性 B 細胞非霍奇金淋巴瘤。本研究旨在觀察匹杉醇臨床治療非霍奇金淋巴瘤療的療效及對患者T淋巴細胞亞群的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2014年1月1日至2016年12月31日本院確診的非霍奇金淋巴瘤80例，隨機分為觀察組(n=40)和對照組(n=40)。所有患者均經病理學診斷為B細胞非霍奇金淋巴瘤，經免疫組化證實為CD20陽性或強陽性。觀察組患者男性22例，女性18例；平均發病年齡(46.89±11.52)歲；臨床分期Ⅱ期26例，Ⅲ期6例，Ⅳ期8例。對照組患者男性20例，女性20例；平均發病年齡(45.64±12.37)歲；臨床分期Ⅱ期24例，Ⅲ期7例，Ⅳ期9例。2組年齡、性別、疾病構成、臨床分期、移植前疾病狀況等臨床情況比較，均無統計學意義，具有可比性(P>0.05)。本研究經本院倫理委員會批準，患者及家屬自愿簽署知情同意書。

1.2 治療方法

預處理：患者經全面檢查，確定無心、肺、肝及腎等重要臟器功能不全。給予常規對癥支持護理、骨髓抑制護理、抗感染護理及營養護理。NHL患者均在APBSCT治療前接受常規化療方案(CTOP±MTX或MOEP方案)+G-CSF。

APBSCT治療：NHL患者及家屬了解病情同意行自體外周血干細胞移植術并簽署書面同意書。聯合化療方案治療后，在WBC>5.0×109/L時，采用Baxter公司 CS3000plus型血細胞分離機進行外周血造血干細胞的采集，采集2次循環血量為4倍體循環血，獲得足夠數量干細胞。于移植當日在 40 ℃恒溫水浴中快速解凍，在中心靜脈置管中快速回輸。

匹杉醇治療：每個療程的第1、8、15天靜脈注射 50 mg/m2，28 d 為1個療程，連用 6個療程。

1.3 療效評價標準

參照張之南的《血液病診斷及療效標準》第3版和WHO標準將療效分為：①完全緩解(complete remission,CR)，無新病灶，病變的影像學和生物學異常全部消失；②部分緩解(partial remission,PR)，且無新病灶，病變的影像學和生物學異常病變減少>50%；③穩定(stable disease,SD)縮小未達PR或增加未達PD；④進展(progressive disease,PD)，出現新的病灶，或原病灶增大超過25%，或在治療期間原最小病灶增加超過50%。

1.4 T細胞亞群檢測方法

采集各組患者6 ml清晨空腹血，低溫4 ℃ 2 000 r/min 離心15 min，常規分離血清，采用流式細胞儀(美國，Guava EasyCyteTM8HT)檢測外周血T 細胞亞群，檢測方法為單克隆抗體免疫熒光標記法，檢測血液中的CD3+、CD4+、CD8+水平，以及對CD4+/CD8+比值進行計算。

1.5 隨訪

在每療程治療結束后3～6個月返回醫院進行相關檢查，對全部病例以預約門診及電話復診的形式進行追蹤隨訪，包括淋巴結超聲，CT或全身PET-CT掃描等檢查。

總生存期(overan survival,OS)：患者首次用藥到由于任何原因死亡的時間。在數據截止日尚生存的患者或在研究中失訪的患者將以其最后一次聯絡的日期作為截尾數值進行分析。

1.6 統計學處理

2 結果

2.1 2組患者的臨床療效比較

觀察組患者的疾病控制率(95.00%)和總有效率(85.00%)，明顯高于對照組疾病控制率(90.00%)和總有效率(50.00%)，差異具有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 2組患者近期療效的比較(例，%)

2.2 外周血干細胞數量及造血重建情況比較

對照組和觀察組患者外周血干細胞數量比較，其中單個核細胞數、CD34+細胞數比較，無統計學差異(P>0.05)。造血重建情況比較發現，2組患者中性粒細胞計數絕對值>0.5×109/l時間，血小板計數>2.0×109/l時間比較，無統計學差異(P>0.05)。見表2。

表2 外周血干細胞數量及造血重建情況比較

2.3 2組患者感染發生的情況

觀察組和對照組發生治療感染情況(敗血癥、帶狀皰疹、腹腔結核桿菌感染、食肛周感染、牙齦炎感染、口腔黏膜感染)及總感染率均無明顯差異,見表3。

表3 2組患者感染發生的比較(例，%)

2.4 2組患者T淋巴細胞亞群比較

治療后對照組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+表達顯著升高，而CD8+表達水平則顯著下降，差異具有統計學意義(P<0.05)。觀察組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+表達顯著升高，而CD8+表達顯著下降(P<0.05)。治療后觀察組T淋巴細胞亞群較對照組變化更顯著。見表4。

表4 2組患者T淋巴細胞亞群比較

2.5 2組隨訪結果比較

隨訪結果顯示，對照組患者總生存期為15.44月，少于觀察組的16.70月(F=5.63，P=0.00)；對照組復發率為17.50%(7/40)，高于觀察組的12.50%(5/40)，但差異不具有統計學意義(χ2=0.29，P=0.59)。

3 討論

外周血自體干細胞移植(APBSCT)雖然可以提高非霍奇金淋巴瘤的臨床緩解率，延長生存期，但患者容易復發，身體健康與生活質量仍然受到嚴重影響[2]，其主要原因可能是患者體內淋巴瘤細胞對高劑量的臨床化療逐漸產生耐藥，以及干細胞采集物仍殘存淋巴瘤細胞，造成血液輸注而復發[3-4]。難治性復發性NHL患者即使選用二線或三線化療方案，腫瘤仍然縮小不明顯或者迅速長大，最終導致患者的生存期短、臨床預后差。

匹杉醇 (pixantrone)為一新型蒽環類藥物，屬氮雜蒽二酮類抗腫瘤藥，在歐盟已獲批用于治療復發難治侵襲性 B 細胞 NHL。廣譜抗腫瘤藥物匹杉醇具有較強的腫瘤抑制作用、毒副作用比傳統蒽環類藥物輕[5]，其不僅可以嵌入細胞的 DNA，抑制拓撲異構酶Ⅱ；其側鏈末端伯胺基還可與腫瘤細胞 DNA 發生烷基化反應，導致 DNA 失活，最終引發細胞死亡[6]。國內外研究顯示，匹杉醇抑制淋巴瘤和白血病的作用更強，治療效果較好。同時匹杉醇與其他蒽環類化合物不同，其結構中缺少與鐵離子結合的側鏈基團，幾乎沒有或僅有較低心臟毒性，藥物安全性較高[7]。

本研究結果表明，匹杉醇治療對于自體外周血干細胞移植外周干細胞采集數量(單個核細胞數、CD34+細胞數)、造血重建情況(中性粒細胞計數絕對值>0.5×109/l時間，血小板計數>2.0×109/l時間)并無明顯減少及延長情況，說明匹杉醇對APBSCT治療效果影響較小。同時，觀察組患者的疾病控制率(95.00%)和總有效率(85.00%)，明顯高于對照組，且2組患者治療后感染情況(敗血癥、帶狀皰疹、腹腔結核桿菌感染、食肛周感染、牙齦炎感染、口腔黏膜感染)及總感染率并無顯著性差異。說明匹杉醇聯合自體外周血干細胞移植可以有效治療非霍奇金淋巴瘤，臨床療效較好，感染率發生較低。

T 細胞及其亞群(CD3+T,CD4+T,CD8+T)是T淋巴細胞表面最重要的分化抗原，主要參與機體細胞免疫反應，并在免疫應答中起重要的調節作用[8]。正常情況下CD4+T與CD8+T兩者是相互拮抗，各淋巴細胞亞群之間的相互協調、相互制約，保持動態平衡，以保證機體免疫功能的動態平衡和穩定[9-10]。當CD3+T、 CD4+T、CD8+T及CD4+T/CD8+T細胞比值發生改變，即可視為免疫調節功能異常，提示機體內免疫網絡失衡且免疫功能紊亂[11]。本研究結果表明，給予匹杉醇聯合自體外周血干細胞移植治療后，對照組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+表達顯著升高，而CD8+表達水平則顯著下降；觀察組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+表達升高更加顯著，而 CD8+表達下降更加顯著，說明匹杉醇聯合APBSCT可明顯促進外周血T淋巴細胞亞群數量增多、T 細胞功能增強，患者的臨床恢復較好，復發率較低。

綜上所述，匹杉醇不影響APBSCT造血干細胞的采集和造血重建，對非霍奇金淋巴瘤的臨床療效較好，安全性高，不良反應少。但由于匹杉醇上市不久，仍需進行深入的臨床研究。