胰腺癌組織轉錄中介因子1及趨化因子受體-4的表達特點及臨床意義

符亮，吳冬冰，萬鴻興

作者單位：三亞市人民醫(yī)院消化內科，海南 三亞 572000

胰腺癌是一種惡性程度很高的消化道惡性腫瘤，其診斷和治療都很困難，約90%是起源于腺管上皮的導管腺癌［1］。臨床常見表現為上腹部飽脹不適、疼痛，還可能伴有黃疸、食欲不振、惡心、嘔吐、消瘦、乏力等癥狀［2］。目前根本的治療原則是以外科手術治療為主，還包括姑息治療、對癥支持治療［3］。胰腺癌作為一類預后較差的惡性腫瘤，早期不易發(fā)現，早期的確診率不高，手術死亡率較高，現如今如何提高胰腺癌的早期診斷率已成為國內外學者研究的熱點問題［4］。為探討中轉錄中介因子1（TIF1β）及趨化因子受體-4（CXCR4）蛋白水平與胰腺癌的關系，本研究采用免疫組化方法檢測胰腺癌和癌旁組織中TIF1β、CXCR4蛋白表達情況并分析其與臨床病理學特征的關系，報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料選取2012年1月至2017年5月三亞市人民醫(yī)院確診為胰腺癌病人病理標本180例，其中胰腺癌標本（病灶組）100例，癌旁組織標本（癌旁組）80例。臨床資料通過回顧病人的病歷記錄和病例報告獲得。病灶組，男52例、女48例，年齡范圍為34～78歲，年齡（59.1±11.7）歲；腫瘤的分化程度：高分化31例，中分低化69例；有淋巴結轉移56例，無淋巴結轉移44例；T分期：Ⅰ期33例、Ⅱ期21例、Ⅲ期26例、Ⅳ期20例；癌旁組，男36例、女44例，年齡范圍為33～80歲，年齡（60.1±12.5）歲，癌旁組織均經病理證實為炎癥或正常黏膜。兩組病人的年齡、性別比較，差異無統(tǒng)計學意義（t＝0.553，P＝0.581，χ2＝0.872，P＝0.351）。本研究符合《世界醫(yī)學協會赫爾辛基宣言》相關要求。

1.2納入排除標準

1.2.1納入標準 （1）術前未合并其他部位惡性腫瘤；（2）術后病理證實為胰腺癌；（3）病人腫瘤實施手術根治性切除，術后生存期＞30 d，且在圍術期沒有發(fā)生并發(fā)癥；（4）所有病人均有完整術后病理資料；（5）術前未接受放化療。

1.2.2排除標準 （1）合并其他系統(tǒng)嚴重疾病者。（2）未能完成隨訪者。（3）貧血及凝血功能障礙；（4）風濕及免疫系統(tǒng)疾病；（5）嚴重的肝腎功能疾病；（6）甲狀腺功能障礙；（7）因其他部位腫瘤進行過放化療治療者。

1.3免疫組化染色方法標本經脫蠟、脫水、高溫修復抗原、3%過氧化氫和山羊血清封閉非特異性蛋白后，選用TIF1β抗體（美國Sigma公司）、CXCR4抗體（美國eBioscience公司）進行鏈霉素親和素-過氧化酶復合物法，對兩種抗體的操作應嚴格按照說明書進行，PBS代替一抗作為陰性對照。

1.4免疫組化判定標準PBS代替一抗作為陰性對照，結果作為陰性；陽性對照以所提供組織按照說明書方法染色，CXCR4表達陽性細胞質內有淡黃色或棕黃色著色，TIF1β表達陽性細胞核內有淡黃色或棕黃色著色。每例標本采用隨機數字表法選取10個視野（400倍光鏡下），每個視野計數100個細胞中的陽性細胞數，取其平均值作為陽性百分率。采取二次計分法：先將染色按強度計分：棕褐色3分，棕黃色2分，淡黃色1分，無色0分，然后將陽性細胞所占百分比計分，陽性細胞占比≥75%為3分，51%～75%為2分，25%～50%為1分，低于25%為0分。將（細胞數得分+染色強度得分）作為判斷表達的結果，5～6分：強陽性（+++），3～4分：中等陽性（++），1～2分：弱陽性（+），0分：陰性（-）。所有病理切片的結果都是年資高的病理醫(yī)師通過盲法評定。

1.5統(tǒng)計學方法采用SPSS 16.0統(tǒng)計分析，采用±s描述，兩組間采用t檢驗，多因素方差分析采用Cox比例風險回歸模型分析；計數資料采用χ2檢驗；P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1兩組胰腺癌組織標本中的TIF1β、CXCR4蛋白表達情況比較病灶組和癌旁組的TIF1β蛋白表達陽性率分別為78.00%、12.50%（χ2＝76.309，P＜0.001），見表1。CXCR4蛋白陽性率分別為82.00%、13.75%（χ2＝82.902，P＜0.01），見表2。

表1 胰腺癌病灶組及癌旁組標本中TIF1β蛋白表達情況比較

表2 胰腺癌病灶組及癌旁組標本中CXCR4蛋白表達情況比較

2.2胰腺癌組織標本中TIF1β、CXCR4蛋白表達與病人臨床病理學特征的關系TIF1β、CXCR4蛋白的表達與淋巴結轉移、T分期有密切關系（P＜0.05），與病人的年齡、性別、分化程度無明顯關系（P＞0.05）。見表3。

表3 胰腺癌組織標本中TIF1β、CXCR4蛋白表達與臨床病理學特征的關系（n＝100）

2.3胰腺癌組織中TIF1β、CXCR4蛋白表達的相關性及與預后關系的多因素分析胰腺癌組織中CXCR4與TIF1β的表達呈正相關（r＝0.676；P＜0.01）；Cox風險比例回歸模型分析結果表示：CXCR4、T分期、淋巴結轉移是影響胰腺癌預后的獨立危險因素（P＜0.05）。見表4，5。

表4 胰腺癌組織中CXCR4與TIF1β蛋白表達的相關性

表5 胰腺癌組織中CXCR4和TIF1β與臨床預后的關系

3 討論

胰腺癌發(fā)病隱匿，惡性程度高，發(fā)現時常到達中晚期，5年生存率＜1%，該病還與性別存在一定聯系，絕經前的婦女發(fā)病率遠遠少于男性病人，絕經后婦女的發(fā)病率與男性病人相差無幾［5］。吸煙、飲酒、高脂肪和高蛋白飲食、環(huán)境污染及遺傳因素等均與胰腺癌發(fā)病有關，且近幾年的調查報告發(fā)現糖尿病人群中胰腺癌的發(fā)病率明顯高于普通人群［6］。病人常表現為上腹部飽脹不適、疼痛，還可能伴有黃疸、食欲不振、惡心、嘔吐、消瘦、乏力、焦慮、急躁、抑郁等癥狀，晚期病人還可能出現血栓性靜脈炎或動脈血栓形成［7］。目前臨床治療以外科手術為主，，其他方法包括姑息治療、對癥支持治療等適合于無法手術的病人，胰腺癌由于發(fā)病早期并無明顯癥狀，發(fā)現時間往往較晚，導致手術治療的時機已失去，故需要對胰腺癌病人實施綜合治療，綜合治療包括化療、放射治療、生物治療等［8］。近年來其發(fā)病率和死亡率近年來明顯上升，是預后較差的惡性腫瘤之一。

隨著對腫瘤分子生物學的研究，作為趨化因子的CXCR4在在消化道腫瘤進展中的作用逐步被認知，CXCR4通過促進新生血管的生成，誘導腫瘤細胞特異性遷移，胰腺癌組織中CXCR4呈現淡黃色或棕黃色著色，主要著色部位為細胞核，在正常胰腺組織中無表達，癌旁組織中因會存在少許遷移的癌細胞，也會呈現出少量陽性顯色［9］。由此可以解釋病灶組CXCR4蛋白陽性率明顯高于癌旁組，分別為82.00%、13.75%。TIF1β主要功能為轉錄抑制，還與細胞分化、增殖、凋亡、腫瘤轉移形態(tài)有關，在胰腺癌部位出現陽性顯色，表現為細胞核內有淡黃色或棕黃色著色，在癌旁組織中與CXCR4狀況相似，也會呈現出少量陽性顯色［10］。故病灶組TIF1β蛋白表達陽性率明顯高于癌旁組，分別為78.00%、12.50%。

研究表明，TIF1β、CXCR4蛋白的表達與淋巴結轉移、T分期有密切關系，結果分析如下。淋巴結轉移是腫瘤已到達中晚期階段的重要標志，T分期越高，病人體內腫瘤惡性程度也越高，分期越高越接近晚期，所以與體內誘導腫瘤細胞特異性遷移的CXCR4與TIF1β蛋白的表達也會同樣呈上升趨勢［11-15］。在性別方面已有研究發(fā)現男性發(fā)病率高于女性，但不能保證本研究取樣的隨機性，故在年齡方面未顯示出TIF1β、CXCR4蛋白的表達的明顯。研究結果顯示，TIF1β、CXCR4蛋白的表達與病人的年齡、分化程度無明顯關系，可能與目前并無確切資料顯示此兩種蛋白與病人的年齡、分化程度的確切關系，目前還處于研究階段，需要更大的樣本數據得出更具權威性的結論。胰腺癌組織中CXCR4與TIF1β的表達呈正相關；Cox風險比例回歸模型分析結果表示：CXCR4、T分期、淋巴結轉移是影響胰腺癌預后的獨立危險因素，提示我們可將CXCR4、T分期、淋巴結轉移對胰腺癌預后進行判斷。

綜上所述，TIF1β、CXCR4蛋白在胰腺癌組織中高表達，并且與腫瘤的發(fā)生發(fā)展關系密切，相關指標的檢測可能為疾病早期診斷及治療提供科學依據。