可溶性人類白細胞抗原G聯合癌胚抗原檢測在惡性胸腔積液中診斷價值

可溶性人類白細胞抗原G聯合癌胚抗原檢測在惡性胸腔積液中診斷價值

宋新宇陳世雄曾凡軍高寶安楊衛兵

(三峽大學第一臨床醫學院宜昌市中心人民醫院呼吸內科，湖北宜昌443003)

關鍵詞〔〕可溶性人類白細胞抗原(sHLA)-G；癌胚抗原；惡性胸腔積液；分子檢測

中圖分類號〔〕R561〔文獻標識碼〕A〔

基金項目：宜昌市醫療衛生科技計劃項目(No.A01301-16)

通訊作者：陳世雄(1963-)，男，教授，碩士生導師，主要從事肺癌研究。

第一作者：宋新宇(1979-)，男，副主任醫師，碩士，主要從事肺癌研究。

胸水細胞學檢查是診斷胸腔積液最常見的方法，但其診斷敏感度最高也僅有60%左右〔1〕。胸腔鏡獲取病理組織雖是診斷胸膜疾病的金標準，但部分患者不愿接受胸腔鏡有創檢查，且部分基層醫院不具備開展胸腔鏡的條件。因此，分子方法檢測胸水性質用于鑒別良惡性胸腔積液具有重要意義。人類白細胞抗原(HLA)-G作為腫瘤相關分子有助于鑒別組織的良惡性〔2〕?？扇苄訦LA(sHLA)-G作為一個潛在的腫瘤標志物，通過檢測胸腔積液中sHLA-G的水平能否鑒別胸腔積液的性質有待進一步證實。本實驗旨在評估聯合sHLA-G和癌胚抗原(CEA)在診斷惡性胸腔積液中的診斷價值。

1對象與方法

1.1研究對象選取2010年6月至2012年12月宜昌中心醫院呼吸科的胸腔積液患者70例，經胸腔鏡胸膜活檢證實為惡性腫瘤50例為惡性(MPE)組，證實為良性病變患者20例為非惡性(BPE)組。MPE組男32例，女18例，年齡32～73〔平均(54±12)〕歲；BPE組男14例，女6例，年齡27～70〔平均(48±10)〕歲，均知情同意。

1.2方法抽取患者約5 ml胸水于試管內，靜置5 min后，4℃ 3 000 r/min，離心10 min，分裝上清，210 μl/管，保存于-80℃冰箱備用。酶聯免疫吸附法(ELISA)法檢測sHLA-G和CEA的含量：提前20 min從4℃冰箱中取出ELISA試劑盒，-80℃冰箱取出待檢樣本，操作嚴格按試劑盒說明進行，實驗結果用ELISA統計軟件分析，設立標準曲線，X軸為標準品已知濃度，Y軸為各個濃度相對應的OD值。算出樣本中sHLA-G、CEA的含量。

1.3統計學方法運用SPSS18.0軟件，繪制受試者工作曲線(ROC曲線)，并計算曲線下面積，計數資料比較采用χ2檢驗，兩組之間均數比較采用t檢驗。

2結果

2.1胸水標本中sHLA-G、CEA的含量MPE組sHLA-G、CEA含量〔(37.09±2.47)ng/ml,(23.46±2.05)μg/L〕明顯高于BPE組〔(6.39±1.93)ng/ml,(3.87±2.05)μg/L〕(t=2.54，2.39；均P<0.05)。

2.2sHLA-G和CEA及其聯合在鑒別良惡性胸腔積液中的診斷效能sHLA-G聯合CEA診斷時，其靈敏度和特異度均明顯高于sHLA-G和CEA單項檢測時(χ2=7.85,6.32;5.87,8.49;均P<0.05)。sHLA-G聯合CEA的ROC曲線下面積為0.84(95%CI0.74～0.95)；而sHLA-G和 CEA單項檢測時的ROC曲線下面積分別為0.77(95%CI0.63～0.94)和0.65(95%CI0.49～0.80)，見表1，圖1。

表1　sHLA-G、CEA及聯合檢測惡性胸腔積液的靈敏度、

圖1　sHLA-G、CEA及兩者聯合時診斷惡性 胸腔積液的ROC曲線

3討論

HLA-G與經典HLA-Ⅰa 類抗原有較高的同源性，其在mRNA水平選擇性剪切，產生HLA-G1、G2、G3、G4 4種膜結合蛋白及G5、G6、G7 3種可溶性分子〔3〕。早期研究發現，HLA-G僅局限表達于絨毛膜外的細胞滋養層〔4〕，但后來在各種腫瘤細胞也發現HLA-G表達的大量研究〔5～10〕報道，在惡性黑色素瘤、腎細胞癌、肺癌、卵巢癌、乳腺癌和神經膠質瘤中均有HLA-G蛋白表達。且腫瘤細胞表達HLA-G被認為是其逃避宿主免疫監視策略的一部分，這與HLA-G在滋養層中幫助其逃脫母體同種異體識別所起的作用相似〔11〕。

sHLA-G來源于免疫細胞和腫瘤細胞的分泌，體外T細胞、樹突細胞和單個核細胞/巨噬細胞均能分泌sHLA-G〔12〕。研究〔13〕表明，sHLA-G在惡性腫瘤患者血漿中的表達水平明顯升高，其可能成為一種潛在的腫瘤標志物在鑒別良惡性腫瘤中發揮重要作用。CEA是一種蛋白多糖復合物，為胚胎性的致癌抗原，在惡性胸水早期即可升高，胸水CEA>20 μg/L常提示為惡性胸水。Rebmann等〔12〕研究發現，在惡性黑色素瘤、神經膠質瘤、乳腺癌和卵巢癌患者的血漿中，sHLA-G表達水平都明顯增高。Singer等〔14〕證實，乳腺癌和卵巢癌患者的惡性腹水中sHLA-G的水平明顯高于良性腹水。且晚期卵巢癌患者的惡性積液中，腫瘤細胞是否表達HLA-G被用作判斷腫瘤對化療敏感的指標〔15〕。本研究結果說明sHLA-G和CEA聯合檢測時具有更高的診斷價值，與Singer等〔14〕報道的結果也一致。

4參考文獻

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12Rebmann V，Regel J，Stolke D，etal.Secretion of sHLA-G molecules in malignancies〔J〕.Semin Cancer Biol，2003；13(5)：371-7.

13Zhu CB，Wang CX，Zhang X，etal.Serum sHLA-G levels，a useful indicator in distinguishing colorectal cancer from benign colorectal diseases〔J〕.Int J Cancer，2011；128(3)：617-22.

14Singer G，Rebmann V，Chen YC，etal.HLA-G is a potential tumor marker in malignant ascites〔J〕.Clin Cancer Res，2003；9(12)：4460-4.

15Davidson B，Elstrand MB，McMaster MT，etal.HLA-G expression in effusions is a possible marker of tumor susceptibility to chemotherapy in ovarian carcinoma〔J〕.Gynecol Oncol，2005；96(1)：42-7.

〔2013-10-17修回〕

(編輯趙慧玲/滕欣航)

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