牛病毒性呼吸道疾病診斷與防治

林玉海

摘要：牛病毒性呼吸道疾病是由多種病原引起的以呼吸道癥狀為主的疾病。其病因的復雜化導致本病在臨床上難于治療，給牛場造成嚴重的經濟損失，也導致養牛業的巨大風險，因此需要在養殖過程中重點防范。該文將針對牛病毒性呼吸道疾病的診斷方法和防治方法進行總結和歸納。

關鍵詞：牛;病毒性呼吸道疾病;診斷

中圖分類號：S858.23

文獻標識碼：B

doi：10.3969/j.issn.2096-3637.2019.22.035

0引言

牛病毒性呼吸道疾病給養牛業造成的危害十分巨大，其具有很高的發病率和死亡率。其發病不僅有多種病原，還含有多種誘因。在臨床上不注意就會發病，導致病牛出現死亡。

1疾病簡介

本病主要的發病對象為犢牛、奶牛及育肥肉牛，其高發季節為秋冬兩季[1]。主要是由于傳染性病原引起，包括病毒、細菌和支原體[2]。環境因素和應激因素也是本病發生的主要誘因，常見的誘因有溫度忽高忽低、養殖場養殖密度過大、環境中濕度過高、環境中噪音較大、斷奶應激以及運輸過程的問題。而且隨著過內養殖場不斷從國外的一些養殖場引進品種，造成本病發生的病原體的種類也隨之出現增加，也導致本病不斷復雜化。不僅在診斷中趨于復雜，而且在防治中情況也越來越復雜，不利于對本病預防。目前本病的主要病原有以下幾種，分別是牛病毒性腹瀉病毒、牛副流感病毒、牛傳染性鼻氣管炎病毒和牛呼吸道合胞體病毒以及牛2型腺病毒。當牛感染這些病毒后，會使牛免疫系統被病原所抑制，還會對牛的呼吸道中的上皮細胞形成危害，發生病理性反應。

2診斷方法

本病的診斷通過臨床癥狀和病理變化不能做出確診，需要通過實驗室技術進行確診，確診的具體方法分為病毒分離鑒定、病毒核酸鑒定、血清學鑒定方法、其他檢測方法。

2.1病毒分離鑒定

病毒分離鑒定是應用牛腎細胞進行培養，在臨床剖檢時采集病料后在這些細胞上培養，采集病料時要注意病料的種類和位置，種類有鼻腔分泌物，可以應用鼻腔拭子采集。氣管的病變以及肺部的病變可以直接取病料，注意采集發病部位和正常部位相交的位置，還可以采集病牛的血液供檢測，有的疾病還可以通過對脾臟的采集來分離。牛病毒性腹瀉病毒具有2種病變類型：致細胞病變型（°CP）和非致細胞病變型（nCP）[3]。其中致細胞病變型能夠導致感染細胞的胞漿內產生空泡，胞漿變成圓形，最后細胞會逐漸死亡。而臨床上發現更多的是非致細胞病變型。本病毒通過對血液的培養能夠分離到，其常存活于血液內的單核細胞內。在鑒定中應與牛傳染性鼻氣管炎病毒進行區別。牛副流感病毒3型能使牛腎的單層細胞呈現出拉網狀，并從細胞壁上脫落。本病毒可以吸附牛和豚鼠的紅細胞，所以可以通過此實驗確定有無病毒存在。牛呼吸道合胞體病毒能在呼吸系統的細胞的培養物中良好生長。通常在實驗中大多應用牛的鼻甲細胞進行此病毒培養。培養后可見病變細胞出現融合，有的呈現出氣球樣，在細胞生長發育晚期，可見其開始出現腫大和聚集的現象，最后會變得壞死和脫落。

2.2病毒核酸鑒定

病毒核酸鑒定具有高敏感性，高特異性，通過對病毒粒子的核基因組DNA或者RNA等進行檢測確定病毒是否存在，也可以確定本病發病的病原體。核酸鑒定常用的方法有RT一P°CR方法，有實時熒光定量P°CR法。這些方法的應用能顯著提升病毒檢測的靈敏性。應用本方法能縮短診斷時間，通常從病原分離到結果出來僅需要幾個小時就可以得出結果。本方法主要是通過GenBank上面公布的核酸序列設計相應引物，應用引物并根據相應的反應條件從而建立檢測方法，可以檢測出病料中是否感染有某種特定的病原體。

2.3血清學鑒定方法

血清學方法是在診斷中比較常用的一種方法，在這類方法中可以應用的具體方法較多，常見的是病毒中和試驗、免疫熒光試驗、酶聯免疫吸附試驗和膠體金檢測試驗等。通過應用這些技術也能達到對病原的快速鑒定，進而達到對疾病的快速診斷。病毒中和試驗是檢測特異性抗體。本文研究的幾種病毒均可以通過中和試驗進行檢測。試驗是將病毒和已經稀釋后的血清進行作用，血清需要倍比稀釋，兩者在作用1h后可以添加進人一些指示性細胞，在379°C中進行恒溫培養，在4～5d后就可以對其進行讀數。在讀數時能阻止50%的細胞發生病變的血清的最大稀釋度為此次檢測抗體的效價。本試驗具有較高的敏感性和特異性，但試驗時間較長，受到的干擾因素也較多。免疫熒光試驗是對病原進行直接檢查的一種重要的技術手段。其應用具有一定的限定性，如在牛病毒性腹瀉病毒的鑒定中不適合應用。本方法的應用需要具有相對較高的技術水平和應用試劑，不能進行大量樣本檢測。酶聯免疫吸附試驗是一種可以對抗原和抗體均檢測的技術。目前已經得到廣泛應用，尤其是在進行流行病學調查時應用不僅能快速診斷，而且操作技術相對較為簡單方便，適合于在臨床上應用。本方法常用的就是普通ELISA，還可以應用雙抗體.夾心的ELISA和間接ELISA等。本方法與病毒中和試驗進行比較，可以發現具有快速和敏感的特征。膠體金技術也具有方便、快捷和敏感的特征。在臨床上也具有相當多應用。膠體金技術中常見的有膠體金免疫滲濾法和膠體金免疫層析法。目前已經得到廣泛應用。現在已經研制出牛病毒性腹瀉病毒的膠體金試紙，是利用抗原制備的試紙條，可以用來檢測抗體。

2.4其他檢測方法

常見的有多重RT-PCR技術、固相和液相的芯片以及多重膠體金檢測技術。目前還有人在研究反轉錄PCR-ELISA技術，這項技術的應用可以同時檢測人類的9種呼吸道病原體。而且具有較高的靈敏度和特異性，所以對牛的病毒性呼吸道疾病也可以研制此方法進行檢測。

3防治措施

本病預防還是需要通過加強飼養管理。在養殖中，應采用自繁自養的模式，避免從其他地方引種，這樣可以避免在引種的過程中將病原體同時帶進養殖場。如果確實需要引種，應對所引進的牛檢疫，在引進養殖場后還需要對其隔離觀察，待隔離30d后，如果沒有發病，方可混群飼養。在日常飼養管理中，要保持合理的牛群密度，不能過于擁擠。對不同年齡和不同來源的牛要分群飼養。牛舍要勤打掃，勤出糞，還要制定相應的消毒制度。按照制度定期消毒，在消毒時必須要做到全面，不能留有死角。消毒液要輪換使用，避免同一種消毒液讓病毒產生耐藥性。還要對進人養殖區的人員和車輛以及各種器具消毒。防止病原體被帶人養殖場，導致牛群感染發病。牛舍要保持相對穩定的溫濕度。尤其是在夏季和冬季要具有相應的措施維持溫度。還需要有通風條件，以便能將有害氣體排出。給牛飼喂良好的粗、精飼料和清潔的飲水。確保牛每天能攝取均衡營養物質供自身需求。

4結束語

在養殖中還需要避免各種應激因素，防止牛群發生應激。本病是由病毒引起，沒有特效藥物，治療是通過對癥治療和提高免疫力促使其康復。

參考文獻

[1]梁立華，牛病毒性呼吸道疾病診斷技術探析[J].當代畜牧，2015（29）：62-63.

[2]李鵬，張淑琴，溫永俊，等.牛病毒性呼吸道疾病診斷技術研究進展[J].動物醫學進展，2013，34（4）：90-93.

[3]孔祥明.牛病毒性呼吸道疾病診斷技術[J].湖北畜牧獸醫，2014，35（11）：48-49.